第 6 章 微生物的生长生长：原生质与细胞组分的增加；繁殖：菌体细胞数量的增加：微生物的生长伴随体积增大和细胞分裂，所以，生长的概念中包含着繁殖。第一节 细菌的群体生长繁殖一 生长曲线将少量单细胞的纯培养，接种到一恒定容积的液体培养基中，在适宜条件下培养，定时取样，测菌量。以培养时间为横坐标，以细菌增长数目的对数为纵坐标，绘制所得的曲线。（一）迟缓期（lag phase）1.现象：活菌数没增加，曲线平 行于横轴。2.原因：由于细胞进入新环境,细胞数目无增长，甚至有所下降有一个适应过程，进行大量 的酶（诱导酶）的生成。 3.细胞特点:细胞的新陈代谢非常旺盛，个体体积显著增大，为细胞分裂作准备。4.此期长短：与菌种遗传特性、菌龄、接种量、培养条件有关。5.意义：在实际工作中，缩短 lag phase 的措施：1）加大接种量（群体优势-适应性增强）2）先用对数其的种子（此时细胞分裂旺盛）3）调整培养基的成分，使种子基含有发酵培养基的成分4）选用繁殖快的菌种（二）对数期(log phase)1. 现象：细胞数目以几何级数增加，其对数与时间呈直线关系。2.细胞特点：此时细胞的大小、组成、生理特征等均趋于一致，代谢活跃，生长速率高，代时稳定。代时（世代时间eneration time, G）：单个细胞完成一次分裂所需要的时间 G= t / n（）与菌种有关；（）受培养条件(温度、营养成分）的制约；同一菌种在不同培养条件下代时不同意义：（）代谢、生理研究的好材料 （）生产中用其作种(三)稳定期（stationary phase):1.现象：活菌数目不增不减，生长速率趋于 0,曲线有一下降的趋势。2. 特点:细胞的菌体形态典型，芽孢形成，细胞内开始 贮藏物质。3.出现原因：1）营养物质大量消耗；2）有毒代谢产物大量积累；3）外界条件影响（pH、高细胞浓度，氧化还原电位等）4. 意义：1）发酵生产形成的重要时期（抗生素、氨基酸等） ，生产上应尽量延长此期，提高产量，措施如下：补充营养物质（补料） 调 pH 调整温度2）稳定期细胞数目及产物积累达到最高。（四）衰亡期1.现象：细胞死亡速率生长速率。一般总菌数不变,活菌数曲线下降。2. 特点：菌体变形，大小 不一，细胞出现自溶,生理代谢活动停滞。二、连续培养 （一）恒浊培养概念：在恒浊器内，调节培养基流速，使细菌培养液浊度保持恒定的连续培养方法。原理：维持菌浓度不变。特点：基质过量，菌以最高速率生长；但工艺复杂，烦琐。（二）恒化培养概念：以恒定流速使营养物质浓度恒定而保持细菌生长速率恒定的方法。原理：恒化器中动态平衡的稳定性，是以某种生长限制因子（如碳、氮源；生长因子；无机盐等）的浓度来控制菌的生长速度。特点：维持营养成分的低浓度，控制微生物生长速率。连续培养的优点1、缩短发酵周期，提高设备的利用率；2、便于自控。降低动力消耗及劳动强度；3、产品均一；连续培养的缺点：易杂菌污染；菌种易退化三、同步生长同步培养法：能获得处于同一生长阶段的群体细胞的培养方法同步生长：运用同步培养技术，控制微生物生长，使之处于同一生长 阶段并同时分裂。获得同步生长的方法：1. 机械法 收集同样大小的细胞密度梯度离心：选择性滤膜法: 2. 环境条件控制：温度、光、限制因子等例：温度开始很低，使其均处在 仅活着的状态升高温度 同步生长. 抑制生长法： 加入代谢抑制剂，阻遏 DNA 复制解阻遏同步第二节 环境对微生物生长的影响一 营养物质二、温度 （一）三种基本温度：最低生长温度：微生物生长的最低温度下限；最高生长温度：微生物生长的最高温度；最适生长温度：微生物生长最快时的温度（二）按最适生长温度将微生物分类： 低温微生物（ 20）中温微生物（2045) 高温微生物（45）1、低温微生物：生长机理：细胞内的酶促反应在低温下进行，温度高（30-40） ，酶失活。胞膜中不饱和脂肪酸的含量高，故低温下膜的流动性较好。2、中温微生物：大多数微生物属此类（20-45 ）3、高温微生物：生长机理：1)细胞内酶、蛋白质抗热性强，热稳定性好酶促反应可在高温下进行。2)菌体内产多胺、热亚胺及高温精胺，可稳定细胞内蛋白质合成机构及保护大分子。3)膜中饱和脂肪酸和直链脂肪酸含量高，易形成疏水键，高温下仍能保持膜稳定及结构功能4) 核酸中 G+C 含量高（tRNA） ，可提供形成氢键，增加热稳定性 。高温微生物的特点:生长速度快，合成大分子迅速，可及时修复高温对其造成的分子损伤。耐高温菌具应用优势：在减少能源消耗、减少染菌、缩短发酵周期等方面具重要意义。（三）温度对微生物生长的影响1)影响胞内酶活，进而影响细胞物质的合成，影响微生物生长速率。2)影响胞膜的流动性，从而影响物质的吸收、分泌，进而影响微生物生长。3) 影响物质的溶解度三、pH（一）对微生物生长的影响1. pH 影响物质吸收：影响膜表面电荷及膜的通透性，进而影响膜结构。2. 改变酶活、酶促反应的速率及代谢途径：如：酵母菌在 pH4.5-5 产乙醇，在 pH6.5 以上产甘油、醋酸3. 改变环境中营养物质的可给性或产生毒物质。二) 不同微生物对 pH 要求不同细菌：pH 6.5 -7 .5 酵母、霉菌: pH 4.5 5.5 放线菌: pH 7.6 -819912012 年考研中医综合试题及答案 刘云 - 4 -1991 年硕士研究生入学考试 中医综合科目试题 一、A型题：每一道考题下面都有A、B、C、D、E 5个备选答案，在答题时请选择一个最合适的答案，写在答题纸上1. “阴在内，阳之守也，阳在外，阴之使也”，主要说明阴阳之间存在着：A. 对立制约 B. 互根互用 C. 互为消长 D. 平衡协调 E. 互相转化2. 与精神意识思维活动关系最密切的是A. 心主血脉的生理功能 B. 肝主疏泄的生理功能 C. 脾主运化的生理功能 D. 肺主治节的生理功能 E. 肾主藏精的生理功能3. 肺为“水之上源”的主要依据是A. 肺的通调水道的功能 B. 肺具有布散水液的功能 C. 肺具有输精于皮毛的功能 D 肺为脏腑之华盖 E. 饮入于胃上归于肺4.“乙癸同源”应归属于：A. 肝和心的关系 B. 肝和肺的关系 C. 肝和肾的关系 D. 肝和牌的关系 E. 肾和牌的关系 5.“吐下之余，定无完气”的生理基础是 A. 气能生津 B. 津能化气 C. 气能摄津 D. 津能载气 E. 气能行津6. 十二经脉气血充盛有余时，则渗注于：A. 经别 B. 别络 C. 浮络 D. 孙络 E. 奇经7 素问五藏生成篇说“多食酸”则：A. 脉凝泣而变色 B. 皮搞而毛拔 C. 筋急而爪枯D. 肉胝皱而唇偈 E. 骨痛而发落8. 临证指南医案指出“内风”的机理均属于 ：A. 体内气机的逆乱 B. 体内阴血的不足 C. 体内阳气之变动 D. 诸风掉眩，皆属于肝 E. 体内筋脉失常9. “气盛则身以前皆热”的经脉是A. 手少阴心经 B. 任脉 C. 冲脉 D. 足阳明胃经 E 足太阴脾经10. “寒因寒用，热因热用”属于 ：A. 逆治法 B. 阳病治阴，阴病治阳 C. 阳中求阴，阴中求阳 D. 扶阳配阴，扶阴配阳 E 以上都不是11. 李士材的诊家正眼把脉象分为多少种 ?A. 24 种 B. 28 种 C. 27 种 D. 32 种 E. 36 种12. 望色十法中 “夭”是指：A. 色惨 B. 色闭 C. 色开 D. 色深浓 E. 色枯楠13. 腐苔主病与哪一项无关？A. 食积 B. 痰浊 C. 湿温 D. 肝痈 E. 下疳14. 多食易饥 , 大便漉泄是A. 食积不化 B. 脾胃虚弱 C. 肝牌不和 D. 胃火亢盛 E. 胃强脾弱15. 天亮咳甚属于 ：A. 寒湿 B. 肾亏 C. 脾虚 D. 燥热 E. 肺实16. 下列哪种脉象不主实证 ?A. 革脉 B. 滑脉 C. 结脉 D. 肾脉 E. 弦脉17. 解索脉的特征是A. 脉在筋肉之间，脉搏极迟慢 B. 脉在筋肉之间，连连数急，三五不调C. 脉在皮肤，头定而尾摇 D. 脉在皮肤，如虾游水 E. 以上都不是18. 胸满，呕逆，飧泄，狐疝，遗溺属于 ：A. 足厥阴肝经病证 B. 足太阴脾经病证 C. 足少阴肾经病证 D. 足少阳胆经病证 E. 足太阳膀胱经病证19. 少阴热化证的心烦不寐是因 ：A. 热扰胸脯 B. 热扰心神 C. 内有燥屎 D. 肝阳上亢 E. 水亏火旺20. 温病上焦病证不见以下哪个症状 ?A. 口渴 B. 谵语 C. 肢厥 D. 瘛疭 E. 脉浮数21. 哪味药可治痹痛、疥癣?A. 麝香 B. 牛黄 C. 冰片 D. 苏合香 E. 菖蒲19912012 年考研中医综合试题及答案 刘云 - 5 -22. 蜀漆的来源是A. 漆树的枝叶 B. 泽漆的全草 C. 黄常山的嫩枝叶 D. 干漆的加工品 E. 田三七的根23. 蟾酥内服一次用量是A.0.0150.03 克 B.0.30.6 克 C.0.10.2 克 D.0.0020.004 克 E. 以上都不是24. 我国最早记载制成乌头碱结晶的文献是A. 本草纲目 B. 本草蒙荃 C. 炮制大法 D. 白猿经 E. 本草备要25. 地龙的功效是A. 息风、平喘、祛风湿 B. 息风、利尿、退黄疸 C. 息风、利尿、退虚热D. 息风、安神、平喘咳 E. 息风、平喘、通经络26. 栀子的归经是A. 心、肺、胃、三焦经 B. 心、肝、胃、肺经 C. 心、肺、胆、膀胱经D. 心、胃、肝、胆经 E. 心、胃、肺、膀胱经27. 清肝养血明目退翳的药物是A. 谷精草 B. 密蒙花 C. 青葙子 D. 菟丝子 E. 沙苑子28. 固精缩尿兼能涩肠止泻的药是A. 金樱子 B. 桑螵蛸 C. 覆盆子 D. 赤石脂 E. 乌梅29. 下列除哪项外均为苦味药的作用 ?A. 清热泻火 B. 泄降逆气 C. 引药下行 D. 通泻大便 E. 燥湿坚阴30. 既能燥湿止带，又能消肿排脓的药是A. 乌贼骨 B. 白蔹 C. 白芷 D. 苍术 E. 白果31. 下列方剂的组成药物中含有生地黄的是A. 阳和汤 B. 炙甘草汤 C. 六昧地黄丸 D. 泰山磐石散 E. 玉女煎32. 安宫牛黄丸、紫雪丹、至宝丹三方