1海蛇发酵去腥后与其生药材的对比研究作者：雒换锋,胡昌江, 雷羽,王霞【摘要 】 目的 探讨海蛇经发酵去除腥味后 ,与其生品在生药学方面的差异,确定发酵对海蛇各方面的影响。方法 利用性状、显微、薄层及红外扫描四个方面对海蛇生品与发酵品进行研究。结果 海蛇生品与发酵品的生药学特征,发酵前后有一定的差别。发酵品与生品含有同样的氨基酸成分,海蛇在发酵去腥后,仍保持良好的功效。结论 发酵对海蛇的生药学特征影响不大,采用发酵去除海蛇腥味具有一定的可行性。 【关键词】 海蛇; 去腥;发酵; 生药学【Abstract】 Objective To study pharmacognostical difference between sea snakes and its deodorized products after fermentation and ensure how fermentation affects sea snakes.Methods Sea snakes and its deodorized products after fermentation were comparatively studied in four aspects including characteristics,microscopy,TLC and IR.Results Pharmacognostical characteristics between sea snakes and its deodorized products after fermentation showed a certain 2difference.The fermented and nonfermented products contained similar amino acid,which proved out that deodorized sea snakes after fermentation had the same functions as before.Conclusion Fermentation can slightly affect sea snakes.It is feasible to deodorize sea snake by fermentation.【Key words】 sea snakes;deodorization;fermentation;pharmacognosy 中华本草1中有关平颏海蛇论述 :为海蛇科动物平颏海蛇Lapemis hardwichii(Gray)的干燥全体。药性:味咸,性平。功能与主治: 祛风湿, 通络止痛 ,解毒。主治风湿痹痛, 肌肤麻木,疥癣,皮肤湿痒,疮疖。可见海蛇有着广阔的市场潜力,但其本身含有腥味,影响进一步的开发利用。通过研究,确定了发酵去除其腥味27 的工艺。据文献报道, 发酵去腥应用很少, 且其机理不清楚,故笔者分别从性状、显微、薄层及红外扫描对其进行研究,比较海蛇发酵前后的差异,确定发酵对海蛇的影响。1 材料1.1 材料3本品购于海南省海口市东门市场,经成都中医药大学卢先明教授鉴定为海蛇科平颏海蛇Lapemis hardwickii(Gray)的干燥全体。其多于夏、秋季捕捉,捕得后用沸水烫死, 除去内脏,烘干或鲜用。1.2 海蛇发酵品用净海蛇段, 依照如下操作,制得海蛇发酵品。取 5g 酵母菌,加 2蔗糖液 50 ml 敞开活化 30 min.取海蛇段 1 kg,将的处理液转移至海蛇药材中,并加入 3 000 ml 2蔗糖液和 pH=5 缓冲液 2 000 ml.充分搅拌,使液体均匀分布于海蛇体。敞开放置在 3540 培养箱内,发酵 100 min,每 20 min 搅拌 1 次。取出海蛇,尽量除去其携带的水,即得。1.3 化学试剂缬氨酸( 批号:24200104) 、丙氨酸(批号:624200104), 均购自中国药品生物制品检定所,其余均为分析纯。2 方法与结果2.1 海蛇炮制前后的性状鉴定4海蛇生品全体长 69.291.5 cm.头较长,鼻孔向上,鼻鳞彼此相接。体侧扁,全体带有深榄色宽横斑, 横斑间距 12 鳞宽,在体侧下方尖出呈三角形,有的形成完整环纹。体背鳞片菱形,呈镶嵌状排列,除去内脏的腹面,肌肉土黄色, 可见排列均匀而微隆起的肋骨。质坚韧,不易折断。气腥,味咸。海蛇发酵品: 海蛇干体长约 0.6 cm 横切小段。表面橄榄黄,较生药材颜色浅,发白, 无腥味 ,有酵母粉的淡淡清香味, 味咸。2.2 海蛇炮制前后的显微鉴定 89本品粉末黄色或淡黄色,气腥,味淡。角质鳞片淡灰色或近无色或淡黄色或红棕色,侧面观具半圆形或乳头状突起;表面观呈类圆形,分布有淡灰色或淡棕色细颗粒状物。皮肤碎片淡黄色或近无色或近红棕色,表面密布棕色或黑色色素颗粒, 常聚集成网状或分枝状,细胞界限较清楚。横纹肌纤维较多,淡黄色或近无色,呈条状或方状,直径 415 m,具极细的横纹,明暗相间,横纹平直或稍弯,有的边缘不平整, 断面观少见。骨碎片近无色或淡灰色,呈不规则的碎块。骨陷窝长梭形,大多同方向排列, 骨小管稀而稍粗,于横、纵断面均明显可见。5二者均具有基本的角质鳞片,皮肤碎片,横纹肌纤维,骨陷窝与骨小管,只是在结构上有微小差别。发酵品角质鳞片较生品少,且其淡灰色居多,无红棕色 ;侧面观乳头状突起不明显,表面观类圆形突起很大, 未看到有棕色颗粒密布。发酵品皮肤碎片和骨碎片较多,其骨陷窝与骨小管常一起,而生品只能看到外露的骨陷窝,长梭形,大多同方向排列。可见发酵会使得海蛇结构上产生一定变化。结果见图 1.2.3 海蛇炮制前后的薄层鉴定 1012海蛇( 海蛇发酵品) 粉末(过药典三号筛)1 g,加甲醇 10 ml,超声处理 30 min,滤过,滤液水浴蒸干,加 1 ml 甲醇溶解,作为供试品溶液。取 0.001 g 缬氨酸,0.001 g 丙氨酸, 分别加 1 ml 甲醇溶解, 制成 1 mg/ml 对照品液。照薄层色谱法实验, 吸取上述溶液各 1 l,分别点于同一硅胶 G 薄层板上 ,以正丁醇 冰醋酸 水(411) 与显色剂(0.5%茚三酮醇液 )以 101 的混合液及正丁醇 冰醋酸 乙醇 水(5112)与显色剂同样的混合液为展开剂,展开,取出,晾干,105 烘箱内烘至显清晰的斑点。2 种展开系统供试品色谱中 ,生品、发酵品与对照品色谱相应的位置上均显紫红色的斑点,说明二者含有同样的化学成分,只是发酵品的含量很明显低于生品。其原因可能是在发酵处理过程中,有些成分溶于水, 而损失部分含量。可见发酵未影响海蛇的氨基酸成分结构,只是含量有一定减少。结果见图 2.2.4 海蛇炮制前后红外图谱的对比研究1362.4.1 仪器与试药 仪器:Prestige21 型红外光谱仪(岛津国际贸易上海有限公司),FW4 压片机(天津天光光学仪器有限公司),远红外灯,玛瑙研钵。试药: 溴化钾分析纯。三批(090101、 090102、090103)放大试验海蛇生品与发酵品粉末 ,过六号筛。2.4.2 样品的制备 取 KBr 粉末与药材粉末以 1200 混匀,置烘箱烘干。测定时,取适量粉末置玛瑙研钵中研细,即得(操作在红外灯下进行)。2.4.3 KBr 的红外光谱图 取分析纯 KBr 约 100 mg,研细,装入压片模具,用压片机加压至 30 MPa,维持压力 2 min 后卸掉压力,得厚约 1 mm 的透明 KBr 片进行红外光谱测定 ,作为空白对照。2.4.4 海蛇样品的红外光谱图 取各批次海蛇生品与发酵品样品适量.按 2.4.3 项下操作 ,进行样品红外光谱测定。绝大多数有机化合物的基频振动出现在 4 000400 cm1 区域。6 种样品均有明显的两种吸收峰 :2 9003 400 cm 1,1 540 1 660 cm 1.推测 090101 生品与发酵品,090102 生品与发酵品含有酰胺键,而 090103 生品与发酵品含有CH3 及7C=O.090101 生品与发酵品在 3 000 cm 1 以上的吸收峰有差别,前者为 3 279.44 cm 1,后者为 3 422.36 cm 1.在 2 350 cm 1处, 二者亦有一定差别, 前者为波峰,后者为波谷。090102 生品与发酵品对比情况同 090101.090103 生品与发酵品图谱基本相同。可见发酵对海蛇化学成分的官能团有一定影响,结果见图 3.3 结论通过对海蛇生品与发酵品的性状、显微、薄层及红外扫描的对比研究,说明发酵对海蛇的结构及化学成分产生了一定影响,但二者含有同样的氨基酸成分,可认为海蛇在发酵去腥后,仍保持海蛇的生药学特征,应该不会影响其功效, 进一步说明采用发酵去除海蛇腥味具有较好的可行性。另外,此次研究也为海蛇的基础研究提供了一定依据。【参考文献】1 宋立人 .中华本草第九册M.上海:上海科学技术出版社,1999:428430.2 龚千锋 ,中药炮制学M.北京:中国中医药出版社,2003:134.83 王雅立, 张甫生,费帆.鱼腥草凉茶饮料的研制J.四川食品与发酵,2007,43(138):4446.4 吴光缸,洪玉菁 ,张金亮.水产食品学M.上海:上海科学技术出版社,1992:118124.5 裘迪红,周涛,戴志远,等. 鲐鱼蛋白质水解液脱苦脱腥的研究J.食品科学,2001,22(5):3739.6 毋瑾超,朱碧英 ,胡锡钢,等.鱼肉液体制曲的工艺条件J.湛江海洋大学学报,2002,22(3):3337.7 邓尚贵,章超桦. 双酶法在水产品水解蛋白制作工艺中的应用J.水产学报,1998,22(4):354356.8 张贵君.常用中药显微鉴定M.北京:化学工业出版社,2000:348350.9 胡淑琴 . 中国动物图谱M.北京:科学出版社,1962:5254.10 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典,2005 年版9M.北京:化学工业出版社,2005:225.11 夏建中,张昌权.金钱白花蛇药酒的薄层色谱鉴别研究J.现代中药研究与实践,2003,17(2):3536.12 李春平,欧春燕. 海蛇薄层层析鉴别 J.海蛱药学,1995,7(1):127128.13 王秀文,刘养清.六神丸红外指纹图谱的研究J.山西中医学院学报,2009,10(3):2627.