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1胰腺癌组织细胞中胰腺炎相关蛋白的表达及意义作者:王卫东 彭林 陈盛 孙建 【摘要 】 目的 研究胰腺炎相关蛋白在人胰腺癌组织和胰腺癌细胞系中的表达,分析其同胰腺癌患者临床病理表现的关系,探讨其在胰腺癌诊断中的意义。方法 采用免疫组织化学染色和 RT-PCR 方法检测 36 例胰腺癌组织、28 例胰腺炎组织、5 例正常胰腺组织以及胰腺癌细胞系 PANC-1 中胰腺炎相关蛋白(Pancreatitis-Associated Protein PAP)的表达,分析其与胰腺癌患者临床病理指标的关系。结果 PAP 在正常胰腺组织中完全不表达,在慢性胰腺炎组织中有一定表达(21.4%) ,在胰腺癌组织中表达明显( 77.7%) ,在胰腺癌细胞系中亦有表达。胰腺癌组织中 PAP 的表达高于慢性胰腺炎和正常胰腺(P0.01 ) ,胰腺癌的高表达与肿瘤周围淋巴结转移和远处转移有关(P0.05 ) 。结论 PAP 在胰腺癌组织中的高表达可能对胰腺癌的诊断和预后判断有一定作用。 关键词 胰腺炎相关蛋白 胰腺癌 诊断The expression of pancreatitis associated protein in the pancreatic carcinoma tissue【Abstract】 Objective To investigate the expression of pancreatic associated protein(PAP)in the pancreatic 2carcinoma tissue and cell line by analyzing the relationship of PAP expression and the pathololgic marker and discussing the role of PAP in the diagnosis of pancreatic carcinoma.Methods Immuno-histochemistry stain and RT-PCR method were used to examine the expression of PAP in36pancreatic carcinoma tissue,28pancreatitis tissue and5normal pancreatic tissue.The PAP expression in the pancreatic carcinoma cell line PANC-1was also measured.Results PAP was not expressed in normal pancreatic tissue,but was found overexpressed in77.7%pancreatic carcinoma tissue and21.4%chronic pancreatitis tissue.The incidence.PAP overexpression was significantly higher on pancreatic carcinoma than that in the other pancreatic disease(P0.01 )PAP expression was correlated with nodal involvement and distant metastasis(P50% ) ,阳性(阳性区域 30%50%) ,弱阳性(阳性区域 10%30%)和阴性(阳性区域10%) 。1.5 统计学方法 采用 SAS 统计分析软件行 2 检验,检验标准为 0.05。2 结果2.1 PAP 基因表达情况 RT-PCR 检测在正常胰腺细胞无 PAP基因表达,在胰腺癌细胞系中可扩增出 448bp 的 PAP 基因片段。2.2 免疫组织化学染色情况 正常胰腺组织为阴性表达,慢性胰腺炎组织为弱阳性或者阳性表达,阳性表达率为 21.4%(6/28 ) ,而胰腺癌组织则为强阳性或阳性表达,阳性表达率为77.8%(28/36) 。胰腺癌组织中的表达明显强于胰腺炎和正常胰腺组织(P0.01) 。2.3 PAP 表达和胰腺癌病理指标的关系 见表 1。PAP 的表达与胰腺癌的淋巴结转移、远处转移以及病理分级有密切关系,而与肿瘤大小、性别、年龄、肿瘤部位、有无黄疸、患者营养状况等临6床指标无明显关系。表 1 PAP 表达和胰腺癌病理指标的关系(略)3 讨论目前胰腺癌的诊断、治疗和预后均存在不少问题,临床确诊时患者往往已是中晚期,根治性手术切除率在 25%以下,5 年生存率和预后仍不容乐观。因此胰腺癌的早期诊断非常重要,临床预后的判断和合理的综合治疗是改善疗效的关键。对胰腺癌诊断有帮助的血清标志物如 CEA、CA50、CA199 等均有一定的作用,但灵敏性和特异性仍不满意而且无法判断胰腺癌的进展程度和预后。胰腺炎相关蛋白(PAP)是由胰腺细胞分泌的一种多肽,在正常胰腺细胞中几乎不表达但在急性胰腺炎时由胰腺细胞介导产生。一般认为PAP 与应激状态时细胞因子的产生如干扰素、肿瘤坏死因子、白细胞介素-6 的产生有关。但 PAP 在胰腺肿瘤特别是胰腺癌中的表达尚不清楚。本实验中笔者检测了胰腺癌组织和细胞系中 PAP 的表达,发现胰腺癌组织中 PAP 呈高表达且远高于慢性胰腺炎组织和其他组织,而且 PAP 的表达与病理分级、胰腺癌的淋巴结转移和远处转移密切相关,表明 PAP 可能对胰腺癌的诊断和预后判断有一定的价值。有报道显示胰腺癌患者血清中的 PAP 水平明显升高并且同血清 CEA和 CA199 的水平呈一致变化,认为检测血清 PAP 的水平有助于胰7腺癌的早期诊断 4 。笔者的结果支持这一观点,PAP 作为一种应激因子,其产生受到多种细胞因子的调节,在胰腺炎是一种急性应激反应而在肿瘤形成则是由肿瘤本身产生或由相关肿瘤因子调节产生。虽然 PAP 产生的确切机制目前尚不清楚但在胰腺癌时其增高的程度明显高于其他疾病却是不争的事实。采用免疫组化方法和RT-PCR 方法分别从蛋白水平和 mRNA 水平的检测均支持这一点。通过统计学的方法可以看出 PAP 的高表达预示着肿瘤淋巴结和远处转移的可能性较大,虽然目前没有患者生存时间和 PAP 表达之间关系的资料,但现有的资料显示 PAP 可能对胰腺癌患者的预后判断有一定帮助。笔者认为进一步研究 PAP 在胰腺癌发生、发展和转移过程中的作用,将有助于对胰腺癌患者的早期诊断和预后判断。 参考文献1 KeimV,Iovanna JL,Dagorn JC.The acute phase reaction of the exocrine pancreas gene expression and synthesis of pancreatitis associated protein.Digistion,l994,55 (2 ):65-72.2 Dusetti NJ,Frigerio JM,Fox FM,et al.Molecular cloning,genomic organization,and chromosomal location of the human pancreatitis associated protein 8gene.Genomics,1994,19(5):108-114.3 Dusetti HJ,Ortiz EM,Mallo GV,et a1.Pancreatitis associated protein,an acute phase protein induced by cytokines.J Biol Chem,1995,270(6 ):22417-22421.4 Motoo Y,Watanabe H,Mouri H,et a1.Serum levels of pancreatitis associated protein on digestive diseases with special reference to gastrointestinal cancers.Dig Dis Sci,1999,44(3) :1141-1147.
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