上 海 交 通 大 学硕 士 学 位 论 文XIAP 过 度 表 达 对 顺 铂 耳 毒 性 的 拮 抗 作 用姓 名 ： 和 守 睆申 请 学 位 级 别 ： 硕 士专 业 ： 耳 鼻 咽 喉 科 学指 导 教 师 ： 陈 斌20090501第 一 部 分 小 鼠 顺 铂 耳 毒 性 两 种 建 模 方 法 的 比 较 摘 要 目 的 探 索 建 立 小 鼠 顺 铂 耳 毒 性 模 型 安 全 有 效 的 方 法 材 料 和 方 法 选 择 月 龄 小 鼠 只 将 其 分 成 四 组 每 组 只 局 部 给 药 两 组 通 过 左 侧 后 半 规 管 分 别 注 射 生 理 盐 水 后半规管生理盐水组 及 顺 铂 后 半 规 管 顺 铂 组 这两 组 小 鼠 破 坏 右 侧 耳 蜗 后 检 测 随 即 左 耳 给 药 给 药 后 第 七 天 再 行 检 测 然 后 处 死 动 物 行耳 蜗 基 底 膜 毛 细 胞 计 数 全 身 给 药 两 组 腹 腔 注 射 的 利 尿 酸后 其 中 一 组 肌 肉 注 射 的 顺 铂 另 一 组 肌 肉 注 射 的 顺 铂 这 两 组 小 鼠 于 给 药 后 第 七 天 处 死 行 耳 蜗 基 底 膜 毛 细 胞 计 数 结 果 后 半 规 管 生 理 盐 水 组 给 药 前 后 阈 移 无 统 计 学 意 义 后 半 规 管顺 铂 组 给 药 前 后 阈 移 有 统 计 学 意 义 后 半 规 管 顺 铂 组 给 药 前 后 阈 移 与 后 半 规 管 生 理 盐 水 组 相 比 有 统 计 学 差 异 后 半 规 管 顺 铂 组 毛 细 胞缺 失 数 与 后 半 规 管 生 理 盐 水 组 相 比 有 统 计 学 差 异 全 身 给 药 的 两 组 动 物毛 细 胞 缺 失 数 相 比 也 有 统 计 学 差 异 局 部 给 药 组 给 药 后 一 周 内 全 身 情 况良 好 无 死 亡 全 身 给 药 组 给 药 后 一 周 内 全 身 情 况 欠 佳 每 组 各 有 只死 亡 结 论 后 半 规 管 给 药 是 建 立 小 鼠 顺 铂 耳 毒 性 模 型 安 全 有 效 的 途 径 全 身联 合 应 用 顺 铂 和 利 尿 酸 极 易 造 成 小 鼠 死 亡 不 宜 用 来 建 立 小 鼠 顺 铂 耳 毒性 模 型 关 键 词 顺 铂 耳 毒 性 小鼠 第 二 部 分 过度表达对顺铂耳毒性的拮抗作用 摘 要 目 的 探 讨 连 锁 凋 亡 抑 制 蛋 白 过度表达能否在小鼠体内拮抗顺铂耳毒性 材 料 和 方 法 选择同源月龄小鼠只 利用 技 术 分 成 野 生 小鼠及转 基 因 小 鼠 将 其 分 成 六 组 小鼠只通过左侧后 半 规 管 注 射 生 理 盐 水 生理盐水组 小鼠 顺铂组 及小 鼠 顺铂组 各 只 通 过 左 侧 后 半 规 管 注 射 顺 铂 这 三 组 小 鼠 破 坏右 侧 耳 蜗 后 检 测 随 即 左 耳 给 药 给药后第七天再行检测 然后 处 死 动 物 行 耳 蜗 基 底 膜 毛 细 胞 计 数 小 鼠 只 通 过 双 侧 后 半 规 管 注射 生 理 盐 水 小鼠及小鼠各只通过双侧后半规管注射顺铂 这 三组 小 鼠 于 给 药 后 第 七 天 处 死 行 螺 旋 神 经 节 细 胞 计 数 及 血 管 纹 横 截 面 积 测 算 结 果 生理盐水组给药前后阈移无统计学意义 顺铂组及顺铂 组 给 药 前 后 阈 移 均 有 统 计 学 意 义 三 组 动 物 给 药 前 后 阈 移 两两 相 比 均 有 统 计 学 差 异 三 组 动 物 毛 细 胞 缺 失 数 及 螺 旋 神 经 节 细 胞 计 数两 两 相 比 均 有 统 计 学 差 异 血 管 纹 横 截 面 积 两 两 相 比 均 无 统 计 学 差 异 结 论 顺 铂 可 以 造 成 小 鼠 听 力 损 失 毛 细 胞 及 螺 旋 神 经 节 细 胞 缺 失 对血 管 纹 横 截 面 积 无 明 显 影 响 过 度 表 达 可 以 在 一 定 程 度 上 拮 抗 顺 铂所 致 的 听 力 损 失 毛 细 胞 及 螺 旋 神 经 节 细 胞 缺 失 对 血 管 纹 横 截 面 积 无明 显 影 响 关 键 词 顺 铂 耳 毒 性 小鼠 PART ONEA COMPARISON OF TWO APPROACHES TOESTABLISH MODELS OF CISPLATININDUCED COCHLEAR LESION IN C57 MICEABSTRACTObjective: To explore a safe and effective approach to establish cisplatininduced cochlear lesion in C57BL/6J mice.Materials and methods: 24 C57BL/6J adult mice (aged 2 months) enrolledin this study were assigned to four groups, 6 mice in each group. The localadministration groups included two groups, which received NS (normal saline,NS) and cisplatin respectively through the left posterior semicircular canalinjection. The right ears of the two groups were destroyed and ABR (auditorybrainstem response, ABR) was recorded, and the drugs were injected into theleft ears immediately after ABR recording; ABR was recorded 1 week afterthe injection, and then the cochleae were collected for establishingcytocochleogram. The systemic administration groups included two groups,which were both given EA (ethacrynic acid, EA, 40 mg/kg, i.p.); then onegroup was given cisplatin (0.3 mg/kg, i.m.), and the other group was givencisplatin (0.5 mg/kg, i.m.). The cochleae of the two groups were collected forestablishing cytocochleogram 1 week after the injection.Results: NS injection through the posterior semicircular canal didnt displayany ABR threshold shift after the injection, while cisplatin injection through theposterior semicircular canal showed profound ABR threshold shifts after theinjection; there was significant difference in ABR threshold shifts between NSinjection and cisplatin injection through the posterior semicircular canal afterthe injection. There was significant difference in HC (hair cell, HC) lossbetween NS injection and cisplatin injection through the posterior semicircularcanal, and significant difference in HC loss was found between the twogroups receiving cisplatin and EA systematically. The animals of the localadministration groups were in good condition and there was no death duringthe week after the injection, however, the animals of the systemicadministration groups were in poor condition and 4 mice of each group diedduring the week after the injection.Conclusions: The posterior semicircular canal injection is a safe and effectiveapproach to establish cisplatin induced cochlear lesion in mice; the systemicadministration of cisplatin and EA can easily induce mice to death, so itsunsuitable to establish cisplatin induced cochlear lesion in mice.KEY WORDS: cisplatin, ototoxicity, C57 micePART TWOOVER EXPRESSION OF XIAP PROTECTSAGAINST CISPLATIN OTOTOXICITYABSTRACTObjective: To explore whether over expression of XIAP (X-linked inhibitorof apoptosis protein, XIAP) can protect against cisplatin otot