1冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖和 IL2 产生的作用【摘要】 目的 探讨冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL2 的产生的免疫学作用。方法 取小鼠 24 只，随机分为对照组和实验组，分别用生理盐水和 100%冬虫夏草水浸出液定期给小鼠灌胃，然后检测小鼠淋巴细胞增殖和 IL2 的产生。结果 实验组对以上两项免疫学指标均有显著增强作用，与对照组相比均有非常显著性差异（P 0.01） 。结论 冬虫夏草可明显增强机体免疫功能。 【关键词】 冬虫夏草 淋巴细胞增殖 白细胞介素2 小鼠 【Abstract 】 Objective To research the effect of cordyceps sinensis sacc.（ CSS) from the viewpoint of immunology.Methods 24 mice were divided into 2 groups(control group and experimental group) randomly.Filled the stomaches with NS and 100% water extract of CSS respectively and tested lymphocyte proliferation and interleukin2 production.Results Compared with control group the lymphocyte proliferation and interleukin2 production increased significantly in experimental group (P0.01).Conclusion The results indicated that CSS could enhance immune function obviously . 【Key words】 cordyceps sinensis sacc.(CSS),lymphocyte 2proliferation, IL2，mouse 冬虫夏草，始载于本草纲目拾遗 ，因其冬季为虫，夏季为草，故名；为麦角菌科真菌冬虫夏草cordyceps sinensis (Berk.) sacc.， CSS ，寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，主要功效为益肾补肺、止血化痰、止嗽定喘1 。我们对冬虫夏草进行了淋巴细胞增殖和 IL2 免疫学方面的初步研究。 1 材料与方法 1.1 试剂和仪器 冬虫夏草购采自滨州医学院附属医院。水煎液制备：取冬虫夏草 200 g，加 2 000 ml 水，浸泡 2 h，水煎 2 次，每次煮沸 30 min，合并水煎液，浓缩成 200 ml 备用。RPMI1640 为 GIBO 公司产品，LPL 和 ConA 为美国 Sigma 产品，MTT 为 FLUKA 公司产品，二甲基亚砜(DMSO) 为苏州化工研究所产。美国产全自动酶标仪（Multiskan)，CO2 培养箱，由美国Former 公司生产，低速冷冻离心机(Beckman,USA)，超净工作台由苏州净化设备厂生产，100 目不锈钢网，50 ml 离心管。 12 动物分组与给药 BALB/C 小鼠 24 只，体重 1822 g，雌雄不限，购于北京医科大学实验动物中心。将动物随机分为两组，每组 12 只。组为生理盐水对照组，组为冬虫夏草实验组。 组用生理盐水灌胃，0.5 ml/（次只） ，1 次/天；组用冬虫夏草液灌胃， 0.5 ml /（次只） ，1 次/天，共 15 次。 13 检测指标及方法 131 淋巴细胞增殖反应2：无菌制备小鼠脾细胞悬液，3用 RPMI1640 不完全培养液洗涤 2 次，每次 1 000 r/min ，离心 10 min ，然后用完全培养液配成 5106 /ml ， 取 100 l加入 96 孔细胞培养板（每孔含 5106 /ml 个细胞） ，加入终浓度为 5 g/ml 的 ConA ，置 37，5%CO2 培养箱中培养 48 h 后,每孔加入 10 l MTT 溶液（5 mg/ml） ，再继续培养 12 h，然后加入 DMSO 100 l ，充分震荡后静止 20 min，全自动酶标仪用560 nm 波长进行比色分析。 1.3.2 IL2 的诱生：取上述已制备的脾细胞悬液 5106 /ml，放入培养瓶，置 37，5%CO2 培养箱中培养 40 h，离心收集上清液，置-20 冰箱保存备用。 制备活化的脾淋巴细胞3 ，4：按上法无菌取正常 BALB/C小鼠脾脏，制成 5106/ml 细胞悬液，加入 ConA 使其终浓度为 5 g/ml ，置 37，5%CO2 培养箱中培养 48 h，收集细胞，离心洗涤 2 次，用完全 RPMI 1640 配成 5105/ml 细胞悬液，作为检测 IL2 的反应细胞。 133 IL2 活性检测 3：取-20保存的 IL2 上清液，并做 1/2 和 1/4 的稀释，在 96 孔平底培养板中，每孔加入 IL2 上清液或不同稀释度的 IL2 上清液 100 l 及上述反应细胞 100 l；阳性对照不加 IL2 上清，加 100 l 1640 培养液。每组各设 12 个复孔，置 37，5%CO2 培养箱中培养 48 h，每孔加 MTT(5 mg/ml) 10 l，继续培养 4h ，吸弃 100 l 上清液，加入酸化异丙醇 100 l(0.04 mol/L HCl异丙醇) 4 ，充分震荡后静止 20 min，全自4动酶标仪用 560 nm 波长进行比色分析。 14 结果处理 实验结果采用组间均数差异 t 检验的方法进行统计学分析。 2 结果 冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL2 产生的影响见表 1。 表 1 冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖反应和 IL2 产生的影响 表 1 显示实验组对脾淋巴细胞增殖反应明显，IL2 的产生明显增强，与对照组相比有非常显著性差异（P0.01） 。 3 讨论 本实验研究了冬虫夏草对小鼠淋巴细胞增殖和 IL2 产生的影响，结果表明冬虫夏草可使 ConA 激发的 T 淋巴细胞增殖反应明显增强，表明冬虫夏草对 T 淋巴细胞功能具有增强作用，同时对 B 淋巴细胞免疫功能也具有明显增强作用。已知 T 细胞是机体免疫系统赖以实现免疫调节的重要细胞，在机体特异性免疫应答中起核心作用 ，T细胞功能障碍会直接影响机体的细胞免疫应答和免疫调节。本研究还发现冬虫夏草对细胞因子 IL2 的产生有促进作用。IL2 主要是由辅助 T 细胞产生的非特异性细胞因子，作用于活化的 T 细胞促进其增殖，并对 B 细胞有调节作用。 冬虫夏草可明显促进小鼠脾细胞产生 IL2，间接增强体液免疫应答。分析上述免疫指标改变的原因可能是冬虫夏草对 T 淋巴细胞的直接促进作用，或作用于巨噬细胞促进 T 淋巴细胞的产生，从而促进了 T 淋巴细胞及 IL2 的产生。以上两项免疫学指标均明显增强，组间相比均有非常显著性差异5（P 0.01） ，说明冬虫夏草可明显增强机体免疫功能，是良好的保健食品。 【参考文献】 1 高学敏.中药学（下册） M .北京：人民卫生出版社，2000：16901696. 2 高梅，贾镭，陈芬，等. 虎尿对小鼠淋巴细胞增殖和 IL2产生的影响J.中国实验临床免疫学杂志，1999，11（3）：39. 3 邱世翠，李宗山，郭毅， 等. 枸杞对辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响J.中国中医药科技，2000,7 （6）：362. 4 邱世翠，李波清，王运平，等.康宝饮对小鼠的抑瘤作用J. 中国现代医学杂志，2001，11（2）：33.