1研 究 课 题 名 称 ：联 苯 双 酯 滴 丸 中 联 苯 双 酯 含 量 及 均 匀 度 分 析研 究 课 题 的 目 的 ：1.测 定 联 苯 双 酯 滴 丸 中 联 苯 双 酯 含 量 。2.分 析 联 苯 双 酯 滴 丸 中 联 苯 双 酯 的 均 匀 度 。选 题 的 依 据 和 意 义 ：1 依 据联 苯 双 酯 滴 丸 为 治 疗 肝 炎 的 降 酶 药 物 ， 有 利 于 肝 脏 病 变 的 恢 复 ， 但 其 降酶 效 应 似 与 肝 脏 病 变 的 恢 复 不 一 致 。 联 苯 双 酯 （ DDB） 对 细 胞 色 素 P450 酶 活性 有 明 显 诱 导 作 用 ， 从 而 加 强 对 四 氯 化 碳 及 某 些 致 癌 物 的 解 毒 能 力 。 对 部 分肝 炎 病 人 有 改 善 蛋 白 代 谢 作 用 ， 使 白 蛋 白 升 高 ， 球 蛋 白 降 低 1。联 苯 双 酯 的 突 出 优 点 是 降 酶 效 应 迅 速 ， 应 用 方 便 ， 罕 有 不 良 反 应 。 联 苯双 酯 可 减 轻 各 种 致 病 因 子 对 肝 组 织 的 结 构 损 伤 ， 具 有 显 著 的 保 肝 降 酶 作 用 。 在 临床 研 究 方 面 ， 应 用 联 苯 双 酯 与 甘 利 欣 (目 前 很 常 用 且 被 公 认 为 有 保 肝 降 酶 作 用 的甘 草 酸 制 剂 )对 慢 性 肝 炎 进 行 随 机 对 照 试 验 ， 结 果 表 明 联 苯 双 酯 的 疗 效 远 优 于 甘利 欣2。本 次 试 验 采 用 紫 外 分 光 光 度 法 测 定 联 苯 双 酯 含 量 ， 分 析 联 苯 双 酯 含 量 的均 匀 度 。 联 苯 双 酯 滴 丸 中 联 苯 双 酯 的 含 量 均 匀 、 差 异 性 小 是 用 保 证 安 全 用 药 的 关键 。 2 意 义滴 丸 是 利 用 固 体 分 散 体 的 技 术 进 行 制 备 。 当 基 质 溶 解 时 ,体 内 药 物 以 微 细 结晶 、 无 定 形 微 粒 或 分 子 形 式 释 出 ,所 以 溶 解 快 、 吸 收 快 、 作 用 快 、 生 物 利 用 度 高 。确 定 使 用 药 物 的 最 佳 条 件 降 低 毒 副 作 用 ， 提 高 用 药 质 量 。 联 苯 双 酯 滴 丸 中 有 效 成分 为 联 苯 双 酯 ， 联 苯 双 酯 的 含 量 直 接 影 响 到 药 物 疗 效3。 因 此 确 定 联 苯 双 酯 滴 丸中 联 苯 双 酯 的 含 量 至 关 重 要 。国 内 外 研 究 现 状 简 介 ：郭 亚 玲 等 将 人 肝 癌 细 胞 经 联 苯 双 酯 处 理 后 ， 生 长 和 克 隆 形 成 受 到 明 显 抑 制 ，电 子 显 微 镜 观 察 到 联 苯 双 酯 作 用 过 的 细 胞 核 仁 减 少 或 消 失 ， 核 与 胞 浆 比 例 缩 小 ，2a甲 胎 蛋 白 (AFP)的 分 泌 量 和 7谷 氨 酰 转 肽 酶 (7-GT)活 力 均 明 显 降 低 ， 联 苯 双 酯 还可 抑 制 癌 基 因 c-myc及 肝 癌 标 志 物 基 因 的 表 达 ， 增 强 P53抑 癌 基 因 的 表 达 。 应 用 联苯 双 酯 联 合 小 柴 胡 汤 加 减 治 疗 肝 硬 化 患 者 可 降 低 血 中 AFP水 平 4。唐 利 波 等 研 究 发 现 给 予 大 鼠 联 苯 双 酯 预 处 理 后 可 抑 制 脂 多 糖 (LPS)诱 导 的I-k降 解 ， 降 低 NF-cB活 性 ， 抑 制 肝 脏 TNF-am RNA的 表 达 ， 降 低 血 浆 TNF-a水 平 。实 验 结 果 表 明 联 苯 双 酯 可 通 过 抑 制 TNF-a的 形 成 进 而 抑 制 炎 症 反 应5。龙 尧 等 采 用 原 代 大 鼠 肝 细 胞 体 外 培 养 的 方 法 ， 观 察 了 四 氯 化 碳 (CCL4)和 D氨 基 半 乳 糖 致 肝 损 害 时 联 苯 双 酯 的 保 护 作 用 ， 此 实 验 还 发 现 连 续 1O天 给 大 鼠 口服 联 苯 双 酯 能 明 显 增 加 肝 脏 核 糖 体 特 别 是 游 离 型 核 糖 体 蛋 白 质 和 RNA含 量 ， 由 此推 测 联 苯 双 酯 可 通 过 增 加 二 者 含 量 ， 加 速 细 胞 固 有 结 构 蛋 白 质 的 合 成 ， 加 强 细 胞膜 的 结 构 和 功 能 ， 从 而 增 强 肝 细 胞 对 毒 物 的 抵 御 能 力 和 损 伤 修 复 能 力6。慢 性 肝 炎 治 疗 的 目 的 是 抑 制 病 毒 复 制 ,维 持 肝 功 能 正 常 ,阻 止 或 延 缓 肝 纤维 化 的 进 程 ,预 防 肝 细 胞 癌 的 发 生 。 邓 巧 娟 等 发 现 在 目 前 诸 多 保 肝 药 物 中 ,DDB可 能 是 一 种 选 择 。 大 量 的 临 床 和 实 验 研 究 均 证 明 ,DDB 除 了 具 有 显 著 的 降 酶 保 肝作 用 外 ,还 具 有 解 毒 、 抗 炎 、 抗 脂 质 过 氧 化 、 免 疫 调 节 、 抗 肝 脂 肪 变 性 、抗 乙 型 肝 炎 病 毒 、 降 低 慢 性 肝 炎 和 肝 硬 化 患 者 血 清 AFP 水 平 、 防 治 癌 变 等 多重 作 用7。 应 用 大 剂 量 DDB 治 疗 血 清 AFP 升 高 的 慢 性 乙 型 肝 炎 患 者 ,不 仅 在 保 肝降 酶 方 面 有 显 著 效 果 ,而 且 降 低 血 清 AFP 的 作 用 尤 为 突 出 8。联 苯 双 酯 的 三 种 异 构 体 都 是 重 要 的 医 药 中 间 体 ， 是 人 工 合 成 五 味 子 丙 素 和 五味 子 丁 酯 的 重 要 中 间 产 物 ， 同 时 联 苯 双 酯 本 身 也 是 一 种 重 要 的 新 型 药 物 ， 随 着 人们 对 新 型 药 物 研 究 的 不 断 深 入 ， 联 苯 双 酯 将 受 到 人 们 更 多 地 关 注 。 因 此 合 成 联 苯双 酯 具 有 重 要 的 理 论 意 义 和 现 实 价 值9。程 少 华 ， 贾 克 明 等 也 报 道 联 苯 双 酯 可 显 著 改 善 他 克 林 (THA)引 发 的 肝 损 伤 ，认 为 联 苯 双 酯 的 肝 保 护 机 理 可 能 亦 与 降 低 THA引 发 的 肝 脂 质 过 氧 化 反 应 有 关 10。李 烨 等 体 外 研 究 的 结 果 表 明 ， 在 体 外 ALT、 AST的 活 性 并 不 受 联 苯 双 酯 溶 液 浓 度 的影 响 ， 证 实 联 苯 双 酯 不 是 转 氨 酶 的 可 逆 性 抑 制 剂 。 联 苯 双 酯 不 仅 能 显 著 降 低 CCl4所 致 急 性 肝 损 伤 大 鼠 血 清 ALT、 A水 平 ， 而 且 经 肝 组 织 切 片 发 现 联 苯 双 酯 可 明 显 减轻 肝 细 胞 脂 肪 变 性 、 炎 细 胞 浸 润 和 纤 维 组 织 增 生11。Si-yuan PAN等 报 道 联 苯 双 酯 对 正 常 的 大 鼠 肝 脏 酶 类 无 明 显 影 响 ， 但 可 明 显降 低 化 学 性 肝 损 伤 大 鼠 的 肝 脏 酶 类 水 平 ， 病 理 学 检 查 显 示 肝 组 织 学 有 所 改 善 13。3参 考 文 献 ：1 林 绿 冬 .联 苯 双 酯 应 用 新 探 讨 J.黑 龙 江 中 医 药 ,2002,6（ 5） 53-54.2 王 华 平 ,高 建 军 .联 苯 双 酯 与 甘 利 欣 治 疗 慢 性 肝 炎 疗 效 比 较 J.贵 州 医 药 ,2002,2(7)63-66.3 林 炳 旺 ,殷 树 梅 .联 苯 双 酯 的 合 成 及 应 用 J.化 工 中 间 体 ,2008,(7):20-23.4 郭 亚 玲 ,马 玉 萍 .联 苯 双 酯 降 低 慢 性 病 毒 性 肝 炎 患 者 血 清 转 氨 酶 异 质 性 探 讨J.陕 西 医 学 杂 志 ,1997,26(1):47-48.5 唐 利 波 ,何 松 美 .联 苯 双 酯 临 床 应 用 的 再 评 价 J.实 用 肝 脏 志 ,2006,(3):185-188.6 龙 尧 ,邹 丽 宜 ,唐 利 波 .联 苯 双 酯 抗 大 鼠 四 氯 化 碳 肝 损 伤 的 实 验 研 究 J广 东医 学 院 学 报 2005,6(11):13-15.7 邓 巧 娟 ,冯 冰 .大 剂 量 联 苯 双 酯 治 疗 血 清 甲 胎 蛋 白 水 平 升 高 的 慢 性 乙 型 肝 炎的 初 步 观 察 J.实 用 肝 脏 病 杂 志 , 2007,6(3)65-68.8 崔 速 南 ,汪 明 明 ,范 桂 玲 .大 剂 量 联 苯 双 酯 抗 乙 型 肝 炎 病 毒 疗 效 的 临 床 观 察J.中 华 医 学 杂 志 2002,8(9):22-24.9 翟 惠 民 ,潘 德 敏 .联 苯 双 酯 滴 丸 溶 出 度 的 测 定 与 比 较 J.西 北 药 杂 志 ， 1992,7(6):30-31.10程 少 华 ,贾 克 明 .联 苯 双 酯 抗 大 鼠 四 氯 化 碳 肝 损 伤 的 实 验 研 究 J.广 东 医 学院 学 报 ,2005,24(1):30-31.11李 烨 ,李 燕 .联 苯 双 酯 对 他 克 林 引 起 的 肝 损 伤 的 保 护 作 用 J.药 学 学 报 ,2001,36(7):493-497.12KM JH,MUN YJ,CHUN HJ, et al Effect of biphenyl dime dicarboxylate on theHummel immunosuppressant J.Toxicology Sci,2000,22(11):905-913.13Si-yuan PAN,Rong YANG,Yi-fan HAN, et al.High doses of bifidity elevate criedlevels in rabbits and mice: animal models of acute hype J.Act PharmacologicalSinica,2006,27(6):673-678.14Shang-Ying Gui,Wei Wei, et al.Protective effect of Fufanghuangqiduogan againstacute live in jury in miceJ.World Journal of Gastroenterology,2005,11(19):2984-2989.4主 要 研 究 内 容 ：1.利 用 紫 外 的 方 法 测 定 联 苯 双 酯 的 含 量 。2.分 析 联 苯 双 酯 滴 丸 中 联 苯 双 酯 的 均 匀 度 。主 要 研 究 方 法 （ 实 验 设 计 ） 及 主 要 技 术 路 线 ：1 研 究 方 法1.1含 量 的 测 定 ： 紫 外 分 光 光 度 法 。1.2均 匀 度 的 变 化 观 察 ： 紫 外 分 光 光 度 法 。2 技 术 路 线数 据处 理含 量测 定 均 匀程 度外 观观 察2.1 取 形 状 差 异 较 小 的 联 苯 双 酯 滴 丸 5丸 ， 精 密 称 量 其 质 量 相 同 ， 分 别 测 量联 苯 双 酯 滴 丸 中 联 苯 双 酯 的 含 量 。 重 复 取 样 4次 。2