灵芝孢子粉抗宫颈人乳头瘤病毒感染作用研究摘要目的 探讨灵芝孢子粉在宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染治疗中的价值。方法 采取 HPV DNA 第二代杂交捕获实验（HC-）与阴道镜及宫颈活组织病理检查相结合方法检测出 HPV 感染患者，将 2014 年 3 月2015 年 3 月的 100 例 HPV 感染患者随机平均分为 4 组，第一组为灵芝孢子粉组，服用粤微牌灵芝孢子粉 3 个月；第二组为干扰素组，用安达芬栓（重组人干扰素 a2b 栓）3 个疗程；第三组为灵芝孢子粉+干扰素组，同时服用灵芝孢子粉和外用安达芬3 个疗程；第四组为空白对照组，不采取任何治疗措施，3 个月后观察 HPV 感染自然转归。随访 3 个月，3 个月用药不中断，3 个月后采用同样方法检测这些患者 HPV 感染情况，并对 4 组患者的治疗效果进行统计学分析。结果 所有用药组在用药 3 个月后 HPV 的 DNA 拷贝量下降。灵芝孢子粉加干扰素组下降最明显，其次是单纯用灵芝孢子粉组。用药组在用药后 3 个月细胞病理学有改善倾向，炎症消退明显。其中也是灵芝孢子粉加干扰素组下降最明显，其次是单纯用灵芝孢子粉组。结论 灵芝孢子粉对宫颈人乳头瘤病毒感染具有治疗作用。 关键词灵芝孢子粉；宫颈人乳头瘤病毒感染；治疗；炎症 人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是引起宫颈癌及其癌前病变的主要原因，在 99%的宫颈癌中可以检测到 HPV 的感染，其中涉及到大约 15 种致癌型 HPV。而流行病学和基础研究亦证实高危型人乳头瘤病毒（high-risk human papillomavirus，HR-HPv）持续感染是宫颈上皮内瘤样病变（cervicalintraepithelial neoplasia，CIN）和宫颈癌的主要病因。灵芝孢子粉作为目前较佳免疫调节剂，可显著提高人体免疫功能。鉴于目前在临床上还没有有效的抗病毒药和疫苗，清除病毒束手无策，只有靠人体自身清除。本研究组在临床上观察到因其他疾病使用灵芝孢子粉的患者 HPV 转阴率较高，故认为灵芝孢子粉对 HPV 感染具有治疗作用。该研究旨在探讨灵芝孢子粉治疗宫颈 HPV 感染的临床疗效及价值。 1.资料与方法 1.1 一般资料 选择 2014 年 3 月2015 年 3 月于中山大学附属第一医院妇科门诊检测出 HPV 高危型感染的 100 例患者为研究对象。年龄 2356岁，平均 35.4 岁。所有患者均有月经周期，大致正常；86 例已婚，14 例未婚，均有性生活史。纳入标准：（1）阴道分泌物检查正常，TCT 显示鳞状上皮内低度病变以下，宫颈高危型 HPV 感染，阴道镜检查及组织病理诊断明确为 CIN I 级以下；（2）既往月经周期规律，无其他影响临床治疗因素；（3）无药物过敏史，无肝肾功能异常、心肺功能不全、免疫系统疾病。所有研究对象均对本研究内容知晓并同意，同时经过医院伦理委员会通过。 1.2HPV 检测方法 HPV DNA 第二代杂交捕获实验（hvbrid capture-2，HC-）与阴道镜检查及宫颈活组织病理检查相结合方法，首先对慢性宫颈炎级宫颈糜烂患者进行 HC-筛查，对结果示 HPV 感染阳性患者进行阴道镜检查，对碘试验阴性区或可疑病变部位取活检送病理检查，病理检查结果是宫颈癌前病变（CIN）者则纳出本研究，建议手术治疗，结果仅为 HPV 病毒感染患者纳入研究。检测所需试剂盒：digene hybrid capture 2（HC2）high-risk HPV DNAtest（96 测试/盒） 。临床判定标准：1.0pg/mL（相?于 5000 拷贝/反应） 。 1.3 药物选择 灵芝孢子粉选用由中国科学院微生物研究所研制的粤微牌灵芝孢子粉（广东省粤微食用菌技术有限公司，G20050249） ，每天 6 包冲服，一个月为一疗程，持续用 3 个疗程；干扰素选择安徽安科生物工程（集团）股份有限公司生产的安达芬栓（重组人干扰素 a2b栓） ，每次一枚塞阴道后穹窿，隔日一次，10 次为一疗程，持续用3 个疗程。 1.4 研究分组及方法 采取 HPV DNA 第二代杂交捕获实验（hybrid capture-2，HC-）与阴道镜及宫颈活组织病理检查相结合方法检测出 HPV 感染患者，将 100 例 HPV 感染患者随机平均分为 4 组，第一组为灵芝孢子粉组，服用粤微牌灵芝孢子粉 3 个月；第二组为干扰素组，用安达芬栓（重组人干扰素 a2b 栓）3 个疗程；第三组为灵芝孢子粉+干扰素组，同时服用灵芝孢子粉和外用安达芬 3 个疗程；第四组为空白对照组，不采取任何治疗措施，3 个月后观察 HPV 感染自然转归。随访 3 个月，3 个月中用药不中断，3 个月后采用同样方法检测这些患者 HPV 感染情况，并作统计学分析 4 组患者治疗效果有无显著统计学差异。治疗效果判定标准参照临床疾病诊断依据治愈好转标准 。在 HPV DNA 载量层面：痊愈，HC260%；有效，HC2 下降30%；无效，HC2 下降 0.05） ，见表 1。 2.2 用药后各组 HC2 比较 考察用药后各组 HC2，与空白对照组相比，差异均有统计学意义（P 3.讨论 人乳头瘤病毒感染是引起宫颈癌及其癌前病变的主要原因，在约 99%的宫颈癌中可以检测到 HPV 的感染，其中涉及到致癌型 HPV大约 15 种。而流行病学和基础研究亦充分证实高危型人乳头瘤病毒持续感染是宫颈上皮内瘤样病变和宫颈癌的主要病因。以往对于宫颈癌的预防主要是靠细胞学普查及治疗癌前病变，后来随着 HPV 与宫颈癌关系的确定，HPV 筛查在临床被采用。HPV 筛查的目的主要是确定重点预防对象，在预防宫颈癌过程中，预防及治疗 HPV 感染极其重要，对早期 HPV 感染者进行干预，在提高远期防治 HPV 的致瘤性和肿瘤形成方面具有积极的意义。目前已经有预防 HPV 感染的疫苗，然而效果如何尚难确定。患者被检查出 HPV 感染后非常担忧，急切希望清除此病毒，然而对 HPV 感染的治?尚无良策，临床医生也只能表现出无奈。寻找有效控制 HPV 感染的方法是目前预防宫颈癌的重要任务。现在对 HPV 感染的治疗尚无特效方法，HPV 治疗性疫苗还在研究。75%女性在一生中都有可能感染 HPV，但是大多数可以自身清除，一般情况平均感染时间 8 个月。除了部分高危型 HPV可导致宫颈持续感染，多数 HPV 病毒可逐渐通过机体自身免疫系统被清除，不发展为浸润癌。研究表明，CIN 的发生与高危型 HPV 载量有关，CIN 发生危险度与病毒承载量成正比，因此早期诊断和治疗宫颈高危型 HPV 持续感染对预防宫颈浸润癌的发生至关重要。 以往多采用物理方法，如冷冻、激光、微波、电灼、聚焦超声及 LEEP 刀等。也有采用干扰素及中药局部使用。应用较多的是局部使用保妇康栓，保妇康是纯中药制剂，主要成份有莪术油、冰片等，具有活血、清热、化瘀、止痛的作用。干扰素作为一种广谱抗病毒药物能抑制病毒 RNA 的复制，调节机体免疫功能，同时还能诱导内源性干扰素的产生，提高机体免疫能力。还有学者局部使用苦参软膏、雄黄及聚甲酚磺醛也有一定效果。全身使用的药主要是中药，也有一定效果。但以上这些治疗远未达到满意效果，治疗后复发率高。如何控制宫颈高危型 HPV 持续感染成为当前需要迫切解决的难题。寻找其它更有效及长效的方法是本课题组的研究方向。 受疱疹治疗的启发，本研究组发现灵芝孢子粉除了可以治疗肿瘤外，对病毒感染性疾病也有很好效果，实践中发现应用灵芝孢子粉的患者感冒发生率很低。由此可以认为灵芝孢子粉应该可以治疗HPV 的感染，试用后发现结果与预想的一致。 灵芝孢子粉是灵芝散发出来的孢子体，药理研究已发现，灵芝孢子粉对脾细胞分泌 IL-2 具有促进作用，并能明显促进脾细胞的转化与增殖，增强巨噬细胞的吞噬作用。提示灵芝孢子粉可以通过增强机体免疫力来抵御或清除病毒感染。 在研究灵芝孢子粉治疗疱疹的机制时发现灵芝孢子中含有至少两类抗病毒物质，一类是水溶性物质，另一类是甲醇溶性物质。已经有研究发现水溶性物质具有特别的抑制单纯疱疹病毒 HSV-1 和HSV-2 的活性，进一步研究发现，从灵芝孢子中得到的 4 种抗疱疹病毒物质是蛋白结合多糖，其中酸 I 生蛋白结合多糖（APBP）显示了最强的抗疱疹病毒的活性。 在本研究中发现口服灵芝孢子粉加局部使用干扰素效果最明显，也许是两种药物通过不同的机理起到协同治疗作用。在本研究还发现单纯的灵芝孢子粉口服治疗效果优于单纯的外用干扰素。因此在治疗 HPV 感染中，口服灵芝孢子粉可作为治疗措施之一，最好与干扰素联合使用。由于本研究时间为 3 个月，远期效应还有待进一步研究。