BRMS1 和骨桥蛋白在胃癌中的表达及其意义 李效良 逄小红 泰山医学院 摘 要： 目的 探讨乳腺癌转移抑制基因 (breast cancer metastasis suppressor 1, BRMS1) 和骨桥蛋白 (OPN) 在胃癌组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学技术检测胃癌组织和癌旁正常组织中 BRMS1 和 OPN 蛋白的表达水平。结果 BRMS1 在 73 例癌旁正常组织中均阳性表达, 表达率 100% (73/73) , 而胃癌组织中表达率为 32.9% (24/73) , 两组比较差异具有统计学意义 (P75%为 4 分。两者乘积2 分为免疫组化反应阴性, 3 分为阳性。1.4 统计学处理应用 SPSS18.0 软件进行统计学分析, 癌组织蛋白质表达与临床病理参数之间的关系用四格表或 RC 表 检验, BRMS1 与 OPN 表达的相关性分析采用独立性的 检验, 并计算列联系数。2 结果2.1 BRMS1 和 OPN 蛋白在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达BRMS1 蛋白主要表达于细胞核和细胞质, 呈棕黄色颗粒状。73 例癌旁正常组织中 BRMS1 蛋白均呈阳性表达, 表达率 100% (73/73) ;而在绝大多数胃癌组织中BRMS1 呈阴性表达, 只在部分胃癌组织中呈阳性表达, 表达率为 32.9% (24/73) 。BRMS1 在癌旁正常组织中的表达率明显高于胃癌组织 (=73.75, P=0.000) 。OPN 蛋白在癌旁正常组织不表达, 而在胃癌组织中表达 71.2% (52/73) , 主要表达于胃癌细胞质, 呈棕黄色颗粒状。2.2 BRMS1 和 OPN 的表达与胃癌临床病理特征的关系BRMS1 的表达与胃癌临床病理分期和淋巴结转移有关 (P 均0.01) , 而与肿瘤大小、胃癌细胞浸润深度、Borrmann 分型和组织学类型无关。OPN 的表达与胃癌细胞浸润深度、临床病理分期和淋巴结转移有关 (P0.01 或 P0.05) , 与肿瘤大小、Borrmann 分型和组织学类型无关 (表 1) 。表 1 胃癌组织中 BRMS1 和 OPN 的表达与患者临床病理特征的关系 下载原表 2.3 胃癌组织中 BRMS1 和 OPN 表达的相关性全组 73 例胃癌标本的免疫组化结果表明, BRMS1 阳性表达的胃癌组织中 OPN 多呈阴性表达;反之, BRMS1 呈阴性表达的胃癌组织中 OPN 多呈阳性表达 (表 2) , 二者呈负相关关系 (列联系数 C=0.582, P=0.000) 。表 2 胃癌组织 BRMS1 表达与 OPN 表达的关系 下载原表 2.4 胃癌组织中 BRMS1 和 OPN 联合表达与淋巴结转移的关系46 例 OPN 阳性表达同时伴 BRMS1 阴性表达者中 33 例发生淋巴结转移, 转移率为 71.7%;18 例 OPN 阴性表达同时 BRMS1 阳性表达者中有 7 例发生淋巴结转移, 转移率为 38.9%;9 例 OPN 和 BRMS1 同时阴性表达或阳性表达的胃癌组织中有 2例发生淋巴结转移, 转移率为 22.2%。OPN 阳性表达同时伴 BRMS1 阴性表达者淋巴结转移的发生率明显高于后两者 (P 均0.05) 。3 讨论BRMS1 是 2000 年 Seraj 等首先在乳腺癌细胞中发现的肿瘤转移抑制基因, 研究显示, 它能显著降低乳腺癌转移到肺和淋巴结的能力。随后的研究2-4发现, 在多种具有高度转移潜能的恶性肿瘤细胞内均表现为 BRMS1 基因表达的降低或缺失, 提示 BRMS1 在多种恶性肿瘤的转移中均起着重要的抑制作用。本研究结果显示, BRMS1 蛋白在 73 例癌旁正常组织中均表达, 而在胃癌组织中表达率为32.9% (24/73) ;胃癌组织 BRMS1 的表达率显著低于癌旁正常组织 (P0.01) 。我们还分析了胃癌组织 BRMS1 的表达与临床病理因素之间的关系, 发现胃癌组织中 BRMS1 的表达率与是否伴有淋巴结转移呈负相关, 即在有淋巴结转移的胃癌组织中 BRMS1 的表达率明显低于无淋巴结转移的胃癌组织;同时随着胃癌临床分期的升高, BRMS1 的表达率明显降低。上述研究结果表明, BRMS1 作为肿瘤转移抑制基因参与了抑制胃癌转移的过程, BRMS1 蛋白的低表达在胃癌细胞侵袭力的获得和增强发挥一定作用, 提示 BRMS1 表达下降和缺失可能预示胃癌组织的高侵袭倾向、易转移和预后较差的恶性生物学特征。OPN 是一种具有分泌性、粘附性的糖基化磷酸蛋白, 与其主要受体整合素和CD44 结合, 参与多种器官和组织的生理病理过程。其表达受多种激素、生长因子、肿瘤促进剂及原癌基因表达产物等的调控8-9。近年来诸多研究表明, 骨桥蛋白在肿瘤细胞的粘附、浸润、迁移及新生血管形成过程中起关键作用, 与肿瘤的发生、发展和侵袭转移有关, 可作为肿瘤进展标记物。本研究结果显示, OPN 在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织, 提示 OPN 可能参与了胃癌的发生和发展。我们对胃癌中 OPN 的表达与临床病理学特征之间的关系进行了分析, 发现 OPN 的表达与肿瘤细胞浸润深度、临床病理分期、淋巴结转移有关, 即肿瘤细胞浸润越深、分期越晚、转移程度越重, OPN 的阳性率越高, 与Higashiyama M10的研究结果相似, 提示 OPN 的高表达与胃癌的侵袭和转移密切相关, OPN 可能是判断胃癌预后的参考指标。本实验还对胃癌组织中 BRMS1 与 OPN 表达之间的关系进行了研究, 并对 BRMS1和 OPN 的联合表达与淋巴结转移的关系进行了分析, 发现 BRMS1 与 OPN 的表达呈负相关, BRMS1 阴性表达伴 OPN 阳性表达者易发生淋巴转移。由于 BRMS1 是 m Sin3-HDAC 转录辅助抑制因子复合体的一员11, 而 m Sin3-HDAC 复合体在各种基因的转录调节中起重要作用, 因此推测 BRMS1 可能通过减少 OPN 的表达抑制肿瘤转移。Samant RS 等12的体外研究结果为这一推测提供了证据, 他们利用启动子缺失的荧光素酶报告系统在 OPN 启动子上发现了一个新的 NF-B 位点, 并用电泳迁移率变动分析和染色质免疫沉淀作用 (Ch IP) 证实这个位点是BRMS1 在 OPN 启动子的调节位点 (OPN/NF-B) , BRMS1 可能通过抑制 NF-B的活性抑制 OPN 转录, 从而抑制肿瘤的转移。综上所述, BRMS1 和 OPN 的表达都与胃癌的侵袭和转移有关, 而且 BRMS1 和 OPN的表达呈负相关。说明在胃癌发生、发展的众多变化过程中, BRMS1 和 OPN 之间存在着一定的相互关系, BRMS1 可能通过减少 OPN 的表达抑制胃癌的转移, 其具体的关系有待进一步研究。临床中联合检测 BRMS1 和 OPN 的表达, 对判断胃癌良恶性程度及评估预后等具有一定指导意义。参考文献1Seraj MJ, Samant RS, Verderame MF, et al.Functional evidence for a novel human breast carcinoma metastasis suppressor, BRMS1, encoded at chromosome 11q13J.Cancer Res, 2000, 60:2764-2769. 2Shevde LA, Samant RS, Goldberg SF, et al.Suppression of human melanoma metastasis by the metastasis suppressor gene, BRMS1J.Exp Cell Res, 2002, 273:229-239. 3Seraj MJ, Harding MA, Gildea JJ, et al.The relationship of BRMS1and Rho GDI2 gene expression to metastatic potential in lineage related human bladder cancer cell linesJ.Clin Exp Metastasis, 2000, 18:519-525. 4Cromer A, Carles A, Millon R, et al.Identification of genes associated with tumorigenesis and metastatic potential of hypopharyngeal cancer by microarray analysisJ.Oncogene, 2004, 23:2484-2498. 5麻丽珍, 陈勇, 叶冠东, 等.乳腺癌细胞骨形态形成蛋白、骨桥蛋白表达与乳腺癌细胞的侵袭性及转移性的关系J.广西医科大学学报, 2016, 33 (3) :473-475. 6Cappia S, Righi L, Mirabelli D, et al.Prognostic role of osteopontin expression in malignant pleural mesotheliomaJ.Am J Clin Pathol, 2008, 130:58-64. 7桂淑玉, 李永怀, 左莉, 等.骨桥蛋白及其 mRNA 在肺癌组织中的表达及临床意义J.中华医学杂志, 2007, 87:3219-3223. 8Tuck AB, Hota C, Wilson SM, et al.Osteopontin-induced migration of human mammary epithelial cells involves activation of EGF receptor and multiple signal transduction pathwaysJ.Oncogene, 2003, 22:1198-1205. 9Ariztia EV, Subbarao V, Solt DB, et al.Osteopontin contributes toheaptocyte growth factor induced tumor growth and metastasis formationJ.Exp Cell Res, 2003, 288:257-267. 10Higashiyama M, Ito T, Tanaka E, et al.Prognostic significance of osteopontin expression in human gastric carcinomaJ.Ann Surg Oncol, 2007, 14:3419-3427. 11Meehan WJ, Samant RS, Hopper JE, et al.Breast cancer metastasis suppressor 1 (BRMS1) forms complexes with retinoblastomabinding protein 1 (RBP1) and the m Sin3 histone deacetylase complex and represses transcriptionJ.J Biol Chem, 2004, 279:1562-1569. 12Samant RS, Clark DW, Fillmore RA, et al.Breast cancer metastasis suppressor 1 (BRMS1) inhibits osteopontin transcription by abrogating NF-ka