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1苎麻纤维截面切片实验一、 实验目的与要求通过实验,掌握纺织纤维切片的制作方法,熟悉制作切片所用仪器的构造。用普通生物显微镜观察认识苎麻纤维的纵、横截面形态,掌握其特征。二、实验仪器、工具及试样Y172 型纤维切片器(或称哈氏切片器) 、手摇切片机、生物显微镜、刀片、火棉胶、甘油、载玻片、盖玻片、擦镜纸等。若使用手摇切片机时,还需准备石蜡、酒精、乙醚、蛋白甘油等试剂。试样为苎麻纤维。三、仪器的基本结构原理1、 Y172 型纤维切片器Y172 型纤维切片器(如图 1 所示)主要有两块金属板,一块金属板上有凸舌,另一块上有凹槽。当两块金属板啮合时,凸舌顶部与凹槽底部之间留有一定大小的矩形空隙。制作切片时,把适量纤维卡入凹槽,再用锋利刀片切去金属板两面露出的纤维。转动精密螺丝,矩形纤维束正上方的矩形小推杆前进,将纤维束从金属板的另一面推出,推出距离的大小(即切片厚度)由精密螺丝控制。若切片厚度小于或等于纤维直径,则可避免其倒伏。切好后,将切片放在载玻片上,盖上盖玻片,放在显微镜下观察,就清晰地看到纤维的截面形态。图 1 Y172 型纤维切片器1-金属板( 凸槽) 2-金属板(凹槽) 3-精密螺丝 4-螺丝 5-销子 6-螺座2、手摇切片机利用手摇切片机进行切片可得到较薄的纤维切片,并可连续进行切片,切2片厚度的调节范围为 1100m。切片前纤维或纱线需用石蜡或其他物质包埋。手摇切片机的构造如图 2 所示。图 2 手摇切片机1-石蜡块 2-夹持器 3-螺丝 4-切片刀 5-刀座 6-刀座凹槽 7-螺丝 8-固定螺丝 9-厚度调节器 10-回转轮 11-手柄3、生物显微镜显微镜的结构如图 3 所示,它主要由底座、镜筒、目镜、物镜、载物台、光阑、集光器、调焦机构等组成。显微镜的总放大倍数等于物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积(物镜、目镜的放大倍数都标于镜头侧面) 。3图 3 显微镜结构图1-底座 2-镜臂 3-粗调装置 4-镜筒 5-载物台 6-集光器 7-目镜 8-物镜转换器 9-物镜 10-微调装置 11-移动装置 12-光阑四、 实验方法、步骤1、试样准备(1)纤维纵向试样的制作取试样一小束,手扯整理平直,用右手拇指和食指夹取约 2030 根纤维,将夹取端的纤维按在载玻片上,用左手覆上盖玻片,并抽去多余的纤维,使附在载玻片上的纤维平直;然后在盖玻片的两对顶角上各滴一滴蒸馏水,使盖玻片黏着并增加视野的清晰度。(2)纤维横截面试样切片的制作采用哈氏切片法a. 用小螺丝刀旋松切片器螺丝,取下销子,将螺座转到与金属板 2 成垂直的位置,再将金属板 1 从金属板 2 上抽出。b. 取一束纤维用手扯法整理平直,把适量纤维放在金属板 2 的凹槽中,将金属板 1 插入,压紧纤维。纤维数量以轻拉纤维束时稍有移动为宜。4c. 用锋利刀片切去露出金属板两面外的纤维。d. 将螺座转向工作位置,用销子固定,旋紧螺丝。e. 旋动精密螺丝,使纤维束稍伸出金属板表面,然后在露出的纤维上涂上一层薄薄的火棉胶。待火棉胶凝固后,用锋利刀片沿金属板表面切下第一片切片,舍去不用。f. 从第二片开始做正式试样切片。切时,刀片应尽可能平靠金属板。g. 把切片放在滴有甘油的载玻片上,盖上盖玻片。采用手摇切片机法a. 取一束纤维,用手扯法整理平直,用 50%酒精浸润后取出,搓捻 23次,再放入 75%酒精中浸润,取出搓捻。如此反复 34 次,再在无水酒精中用同样方法浸润处理,再用乙醚酒精 1:1 混合液同样处理,经过上述处理,除去试样中的油脂、蜡质,并进行脱水。b. 用同样方法将试样放在火棉胶溶液中反复处理数次,取出后晾干,得到较为硬挺的棒状试样。c. 把棒状试样放入蜡模中,往蜡模中倒入即将凝固的石蜡溶液,冷却凝固石蜡块,试样包埋在石蜡中。d. 用手摇切片机切取适当厚度的连续的带纤维的蜡片:将试样石蜡块放人切片机的夹持器内,用螺丝夹紧石蜡块。将切片刀夹在刀座的凹槽中,用螺丝固定,切片刀的倾斜角度和高低可通过固定螺丝进行调节。将刀座的固定螺丝旋松,刀座可前后移动,使切片刀的上部与石蜡块相切(注意勿使试样石蜡块过分向前,以免损伤刀口) ,旋紧固定螺丝,将刀座固定好。校正厚度调节器到 15m 的刻度上,转动回转轮的手柄,使石蜡块逐渐向前移动,切割试样石蜡块,先切掉没有纤维的石蜡,然后调节厚度调节器至所需要的厚度的刻度上(视各种纤维不同而异) 。厚度的调节不得大于所试验的纤维宽度,继续转动手柄,进行连续切片。e. 在载玻片上涂上薄薄一层蛋白甘油,起黏附作用,将连续石蜡片平放在载玻片上,稍微加温,使石蜡熔化,纤维切片平贴在载玻片上。f. 将载玻片放入二甲苯中脱蜡,然后取出,放在显微镜下观察,选择满意5的切片,给以永久封固。g. 在使用手摇切片机进行切片时,应注意下列事项:把纤维试样放入蜡模狭缝时,应使纤维伸直。石蜡熔化后,须待其冷却至接近凝固时,方可倒入蜡模中去。切片刀的调节应恰好与石蜡块相切,逐渐把石蜡块切成平整。在装置石蜡块时,必须用固定螺丝将蜡块夹持器固定在最高位置,以防夹持器下落而将手割伤。(3)显微镜调节 检查显微镜各主要部件状态是否正常。 将显微镜面对北光,扳动镜臂,使其适当倾斜,以便舒适观察。 选择适当倍数的目镜放在镜筒上,将低倍物镜转至镜筒中心线上,以便调焦。 将集光器升至最高位置,并开启光阑至最大,用一眼从目镜中观察,调节反射镜,使整个视野明亮而均匀。 除去目镜,观察物镜后透镜,调节反射镜和集光器中心,使在物镜后透镜处光线均匀明亮,再调节光阑,使光阑与物镜后透镜大小相一致或小些,然后装上目镜。(4)观察试样 将置有纤维试样的载玻片放在显微镜载物台上(盖玻片朝上) ,调节移动装置,使试样移到物镜中心。 先用低倍物镜观察试样,旋转粗调装置,将装有低倍物镜的镜筒放在最低位置,但物镜不能触及盖玻片。从目镜下视,旋转粗调装置,自下而上,缓慢升起镜筒聚焦,直至见到试样像后再调节微调装置,使试样图像清晰(若视野中光线太强,可适当降低集光器位置,但不要随意改变光阑大小,以免影响通过集光器进入物镜的光锥顶角) 。 用高倍物镜观察试样。将用低倍物镜观察到的试样移至视野的中心,然后转动物镜转换器,用高倍物镜代替低倍物镜。此时,只要稍微调节微调装置,即可看到清晰的物像(为了充分利用高倍物镜和数值孔径,用高倍物镜观察时,集光器光阑可适当放大些) 。 将观察到的纤维纵向、横截面形态描绘在纸上,并说明其形态特征。6 实验完毕,将镜头取下放入镜头盒,用擦镜纸将显微镜揩拭干净,使镜臂恢复垂直位置,镜筒降至最低位置,罩上罩子,放入仪器箱。五、 实验报告内容1、实验名称2、仪器名称和型号、样品名称、编号;3、描绘苎麻纤维的纵向、横截面形态;4、试验日期,实验人姓名。六、思考题1纤维切片的要求有哪些?2比较哈氏切片法和手摇切片机法的优缺点?3使用显微镜时应注意哪些方面?
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