12345678910 11 12黄曲霉毒素 B1 操作流程示意图1. 每孔加入 250ul 洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ；2. 1-6 号孔分别按次序由小到大加入浓度为 0-2ppb 标准品溶液各 50ul，剩余孔从 7 号开始分别加入要测定的样品的稀释液；然后从 1 号开始的所有孔分别加入 50ul 稀释后的酶标抗原溶液，加盖后放入 37培养箱，进行 30 分钟温育；3. 孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约 250ul 洗涤液，洗板 5 次；4. 5 次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ，按照先后顺序，所有孔先加入 50ul 底物 a，然后所有孔再加入 50ul 底物 b，加盖后放入 37培养箱，进行 15 分钟温育；显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到 1-6 号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。 ） ，样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图5. 显色反应完成后，在每个孔中加入 50ul 的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上 450nm 波长的酶标仪读取吸光度值。12345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 12呕吐毒素试剂盒操作流程示意图1. 每孔加入 250ul 洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ；2. 1-6 号孔分别按次序由小到大加入浓度为 0-360ppb 标准品溶液各 50ul，剩余孔从 7 号开始分别加入稀释好的样品液；然后从 1 号开始的所有孔分别加入 50ul 酶标记物溶液，最后在每孔加入 50ul 抗试剂，加盖后放入 37培养箱，进行 20 分钟温育；3. 孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约 250ul 洗涤液，洗板 5 次；4. 5 次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ，按照先后顺序，所有孔先加入 50ul 底物液，然后所有孔再加入 50ul 显色液，加盖后放入 37培养箱，进行 15分钟温育；显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到 1-6 号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。 ） ，样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图5.显色反应完成后，在每个孔中加入 50ul 的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上 450nm 波长的酶标仪读取吸光度值。12345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 12玉米赤霉烯酮毒素试剂盒操作流程示意图1. 每孔加入 250ul 洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ；2. 1-6 号孔分别按次序由小到大加入浓度为 02.4ppb 标准品溶液各 50ul，剩余孔从 7 号开始分别加入稀释好的样品液；然后从 1 号开始的所有孔分别加入 50ul 酶标记物溶液，最后在每孔加入 50ul 抗试剂，加盖后放入 37培养箱，进行 20 分钟温育；3. 孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约 250ul 洗涤液，洗板 5 次；4. 5 次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ，按照先后顺序，所有孔先加入 50ul 底物液，然后所有孔再加入 50ul 显色液，加盖后放入 37培养箱，进行 15分钟温育；显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到 1-6 号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。 ） ，样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图5.显色反应完成后，在每个孔中加入 50ul 的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上 450nm 波长的酶标仪读取吸光度值。12345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 12赭曲霉毒素 A 试剂盒操作流程示意图1. 每孔加入 250ul 洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ；2. 1-5 号孔分别按次序由小到大加入浓度为 08.1ppb 标准品溶液各 50ul，剩余孔从 6 号开始分别加入稀释好的样品液；然后从 1 号开始的所有孔均加入 50ul 赭曲霉毒素 A 抗体，加盖后放入 37培养箱，进行 30 分钟温育；3. 孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约 250ul 洗涤液，洗板 5 次；4. 5 次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ，按照先后顺序，所有孔均加入 100ul 酶标二抗，加盖后放入 37培养箱，进行 30 分钟温育；5. 孵育完成后，倒掉孔内试剂，每孔加入约 250ul 洗涤液，洗板 3 次；6. 3 次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破） ，按照先后顺序，所有孔先加入 50ul 底物液，然后所有孔再加入 50ul 显色液，加盖后放入 37培养箱，进行 15分钟温育；12345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 1212345678910 11 12显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到 1-5 号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。 ） ，样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图7. 显色反应完成后，在每个孔中加入 50ul 的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上 450nm 波长的酶标仪读取吸光度值。注：所有试剂盒操作流程仅适用于江苏省苏微微生物研究有限公司所生产的“苏微牌”酶联免疫检测试剂盒的操作，不同厂家试剂盒略有差异，以操作说明书为准！12345678910 11 1212345678910 11 12