免疫检验学定位及临床免疫检验自动化现状姜黎黎 (鞍山市岫岩县中医院)摘要作者对免疫检验学及免疫检验的地位进行了定位，对临床免疫检验的自动化手段进行了较全面的分析，同时分析了自动化手段检验的优点。关键词免疫检验 定位 自动化 现状Abstract Objective：Inspection of the study of immune and immune status of the positioning test,clinical Immunology automated means test for a more comprehensive analysis,analysis of the advantages of automated testing tools.Key words: Immunoassay Location Automation Status1、免疫学和免疫学检验1.1 免疫学定义免疫学是研究宿主免疫系统识别并消除有害生物及其成分的应答过程及机制的科学。基础免疫学和临床免疫学构成医学免疫学这门学科。免疫检验学则是临床免疫学的重要组成部分。1.2 免疫学检验的定义及地位免疫学检验是依据免疫学原理，尤其是抗原与抗体反应原理，利用各种敏感的标记、示踪（放射性同位素、荧光素、酶、镧系元素、发光物质、胶体金等）技术，超微量地、特异地分析检测各种生理的和病理的免疫学指标，进行疾病的诊断，疗效的评估和预后判断的一组医学检验项目。免疫学检验在临床医学检验中所占比重日益增大，是临床医生借以研究疾病的一种重要手段 1。2、临床免疫学检验自动化现状近年来，临床免疫检验技术不断创新、发明，已经逐步摆脱了手工操作方法，经历了半自动化、完全自动化的发展过程， 、进入信息化的超微量分析时代。2.1 免疫浊度测定自动化免疫浊度测定包括透射比浊法和散射比浊法 2。透射比浊法在一定范围内，透射光被吸收的量(吸光度)与免疫复合物的量呈正相关，当抗体量固定时，根据免疫复合物的吸光度值，即可推算出待测抗原的含量。透射比浊法普遍采用自动化免疫浊度分析仪，使血浆、体液中特种蛋白及尿微量蛋白的测定准确、便捷、灵敏度高。散射比浊法原理为光线通过检测溶液时，被免疫复合物折射而产生散射光。散射光的强度与复合物的含量和散射夹角成正比，与光波波长成反比，其敏感性高于透射比浊法，但采用终点法测定时，反应时间仍较长，敏感性亦低于速率散射比浊法。散射比浊法是一种微量、快速、自动化检测体液中特定蛋白质成分的免疫化学分析技术。该技术是将免疫测定与散射比浊法的原理相结合而设计的一种快速免疫测定方法。主要用于对体液中单个蛋白成分的测定。目前在特定蛋白测定领域中最具代表性的系统：(1)自动速率散射比浊法：Beckman-Coulter 公司 ARRAY360 特定蛋白系统。(2)定时散射比浊法：Dade Behing 公司的 BN-100,BN-Prospec,BN-特定蛋白系统 3。以上两类主流产品在测定体液中特定蛋白质方面，其特异性、敏感性都符合临床检测的要求，检测范围较宽，药盒、菜单应用面广，是目前推荐检测体液中特定蛋白的首选。2.2 自动酶免疫分析（EIA）按照是否需要将结合的酶标记物和游离的酶标记物分离分为均相 EIA 和非均相 EIA。按照反应原理不同分为：(1)竞争性 EIA 检测方法；(2)非竞争性 EIA 检测方法，该法是目前应用最广、最普及的一种 EIA 技术 4。具有以下优点：由于固相包被和酶标记抗体均为过量，抗原抗体的结合是非竞争性的，所以对抗体亲和力的要求不像竞争性免疫测定那么高；灵敏度和线性范围可比 RIA 高 510 倍；双位点夹心法（应用两株单克隆抗体）明显提高了检测的特异性；反应迅速，采用短期保温即可。快速 EIA 测定技术的发展如酶联免疫斑点测定法（DEIA）,该方法是在免疫印迹技术上改良后发展起来的一种免疫学诊断新技术，它不但具有免疫印迹技术的高灵敏性和特异性，而且避免了免疫印迹电泳与转印的繁琐过程，其敏感性、特异性基本上相当于或高于常规的 EIA，并具有简便、快速、可单分检测、不需要配置酶标仪等特殊的仪器设备，结果易于判断等优点，现已广泛应用于检测病毒、细菌的抗原或抗体。2.3 荧光免疫分析（FIA）近几年，自动 FIA 检测领域得到了很大发展，目前已成为临床免疫检验中相对较为独特的一类检测技术。荧光偏振免疫法（FPIA）灵敏度高，线性范围广，有较好的精确度。目前此项技术的专利已被 Abbott 公司买断，他们生产的 IMX、AxSYM、TDx 等全自动免疫分析系统均是采用该技术进行测定。时间分辨免疫荧光测定(TRFIA)，这一新技术是基于镧系元素螯和物所具有的独特荧光标记特性而建立的。镧系元素的荧光特性有：(1)消失时间长；(2)Strokes 位移（即激发光波长与发射光波长之差）大；(3) 发射光谱峰尖、陡峭；(4)荧光强度高 5。2.4 化学发光自动免疫分析化学发光免疫分析（CLIA）已经从初期实验室的稀有技术过渡到临床免疫学检验中的常规检测手段。该技术灵敏度高、检测速度快、操作简便、所使用试剂对人体无危害。从技术上说应包括两部分免疫分析系统和发光系统，其基本原理和操作技术与放射免疫法（RIA） 、或酶免法（EIA）等类似，只是所用的标记物或检测的信号不同 6。根据其所采用的标记物不同可分为发光物标记、酶标记和元素标记化学发光免疫分析三大类。化学发光是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。3免疫检验自动化分析的优点3.1 灵敏度高。采用酶联免疫、荧光免疫、化学发光免疫、电化学发光免疫等先进技术，测定的灵敏度高，达到或超过放射免疫的检测水平。3.2 重复性好。一般 CV 值小于 10%，由于使用计算机数据处理系统，结果判断客观、准确，便于质量控制。3.3 速度快。一般在 30min 以内都可发出报告，还可开展急诊检测，随到随做，及时为临床提供信息。3.4 自动化程度高。自动化仪器操作灵活，可同时测定1020 个项目，标本和试剂用量少，可节约大量的人力、物力，有利于大批量标本的测定。3.5 试剂的稳定性好。一般有效期在 612 个月，比放免试剂的有效期长 24 倍。3.6 避免环境污染。由于不使用放射性同位素，因此对人体无伤害，对环境也没有污染。参考文献1李晓军,武建国.关于免疫学检验定位的思考J.临床检验杂志,2007,25,(5):321-3222 马占玺，齐秀荣.免疫自动化分析新进展J 中华医学研究杂志 2006, 1(6)3 武建国.临床免疫学检验的进展J临床检验杂志2002，3（20）：21164王兰兰，柳永和临床免疫学和免疫学检验M北京：人民卫生出版社，2006,2392425周新,涂植光.临床生物化学和生物化学检验M.第 3 版.北京:人民卫生出版社,2003,211.6李振甲，应希堂，马世俊化学发光免疫分析技术的研究现状与展望J国际检验医学杂志2006，27(1)：95作者单位：114300 辽宁鞍山 姜黎黎 女 鞍山市岫岩县中医院检验科主任 主管技师 15241281769通讯地址：鞍山市岫岩县中医院阜昌路中段