烟草及烟草制品 棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的测定 气相色谱-火焰离子化检测器法标准编制说明贵州省烟草科学研究院2017 年 5 月1目目 录录一、编制的目的和意义.2二、任务来源及编制工作过程.2三、标准制定原则.3四、标准的构架和主要内容及指标确定的依据.4（一）标准的构架.4（二）标准的适用范围.4（三）标准的研制内容.4（1）前言.4（2）材料与试剂.5（3）前处理方法.5（4）色谱检测方法.6（5）前处理条件优化.6（6）衍生化产物稳定性研究.8（四）指标确定的依据.8（1）定量参数验证.8（2）标准应用.10五、与现行相关法律、法规、规章及相关标准，特别是强制性标准的协调性.12六、专利及涉及知识产权.12七、分歧意见的处理经过.13八、标准作为强制性或推荐性标准的建议.13九、贯彻标准的要求和措施建议.13十、废止现行有关标准的建议.13十一、其他应予说明的事项.13十二、推广应用的预期效果.14十三、标准水平分析.142一、编制的目的和意义有机酸是一类含有羧基的化学物质，具有抑菌、抗病毒、增加冠脉流量、抑制脑组织脂质过氧化物生成、消炎、抗突变、抗癌、软化血管，促进钙、铁元素的吸收、帮助胃液消化脂肪和蛋白质等生理功能，对许多食品的风味口感和营养价值都有重大的影响，因此一直备受关注。烟草中的有机酸主要指除氨基酸以外的其它有机酸。有机酸广泛存在于烟草中，含量约为 10%16%，有机酸的种类与含量直接影响着卷烟的吸味品质。烟草有机酸可中和游离碱，调节烟气酸碱性，降低烟气的辛辣、呛喉现象，改善余味使烟气变得舒适。因此，对烟草中有机酸含量的分析，对评定烟叶的品质、判断烟气是否醇和、指导烟叶生产和叶组配方等具有重要作用。烟草行业出台的检测标准为YC/T 288-2009 烟草及烟草制品 多元酸（草酸、苹果酸和柠檬酸）的测定 气相色谱法 ，但该方法检测的有机酸种类较少（主要为 3 种低级多元酸） ，未包含烟草中主要高级脂肪酸（棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸）的测定，无法完全反映有机酸对烟草品质的影响，且现行标准前处理过程复杂，需要冷凝回流衍生化和多次萃取，从而导致方法的重复性相对较差。因此，制定简单、易操作的烟草中主要高级脂肪酸的标准检测方法对统一评价烟草品质具有重要影响。烟草中有机酸的种类繁多，含量及性质差异较大，建立测定对烟叶品质有重要作用的多种有机酸的标准分析方法，可以进一步提高检测方法的准确性，为建立完善的质量评价体系及研究平台提供更为全面准确的检测依据。二、任务来源及编制工作过程（一）任务来源本标准于 2014 年由贵州省烟草科学研究院首次提出，上报贵州省烟草专卖局（公司）后，再经贵州省质量技术监督局批准，被列入贵州省 2014 年第一批标准化立项项目计划。项目获批后，我院成立了标准起草工作组，认真完成了方案制定、项目实施、总结梳理、标准编制、征求意见等多项工作。3（二）编制工作过程3.1 项目启动和文献调研阶段（2014 年 5 月2014 年 8 月）项目负责人召开项目启动会，对项目研究人员进行了明确分工，并制定了项目实施方案。项目组通过对文献、标准、专利等进行调研，收集高级脂肪酸（棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸）的色谱检测方法，并对收集的资料进行汇总、整理、分类。同时，结合行业的实际情况，提出初步意见和构想。3.2 标准方法实验室研究阶段（2014 年 8 月2015 年 6 月）3.2.1 前处理条件和色谱条件的优化（2014 年 8 月2014 年 12 月）项目组在文献报道方法的基础上，对比优化了样品的前处理方法和色谱分析条件，利用单因素分析实验优化了衍生化催化剂种类、反应时间、稀释液与萃取溶剂的加入量，从中选择最佳的衍生化与萃取条件。3.2.2 方法学验证及样品测试（2015 年 1 月2015 年 6 月）对优化的方法进行线性、重复性、回收率及稳定性验证，确保方法可靠（线性大于 0.999， 5 次重复试验的 RSD 小于 5%，回收率大于 90%，48 h 内衍生化产物稳定等） 。选择典型的烟草样品进行典型样品高级脂肪酸（棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸）的色谱分析，进一步验证方法的可靠性。3.3 标准方法初稿起草阶段（2015 年 7 月2015 年 10 月）完成标准方法初稿的起草工作，在前期大量实验的基础上撰写项目研究报告。3.4 项目总结阶段（2015 年 10 月-2017 年 4 月）项目牵头单位对形成的烟草及烟草制品 棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的测定 气相色谱-火焰离子化检测器法标准征求意见稿，同时在网上发布关于征求贵州省地方标准烟草及烟草制品 棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的测定 气相色谱-火焰离子化检测器法的标准意见函，广泛征求行业内外的意见。三、标准制定原则本标准符合以下制定原则：4（1）符合地方标准制修订管理工作规程对编制程序和工作的规定和要求。（2）符合地方标准检测技术的有关要求，适应行业的技术特点。（3）符合标准的科学性、先进性、实用性。标准的技术指标确定要有可靠的技术支撑。（4）符合国家法律、法规的有关要求，不与已有标准冲突。四、标准的构架和主要内容及指标确定的依据（一）标准的构架本标准由目次、前言、正文和附录 A 四部分组成。其中正文共 9 章，为范围，规范性引用文件，原理，试剂，仪器与材料，样品制备，分析步骤，精密度和回收率，检测报告。（二）标准的适用范围本标准适用于烟草和烟草制品中棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的测定。（三）标准的研制内容（1）前言有机酸是一类含有羧基的化学物质，具有抑菌、抗病毒、增加冠脉流量、抑制脑组织脂质过氧化物生成、消炎、抗突变、抗癌、软化血管，促进钙、铁元素的吸收、帮助胃液消化脂肪和蛋白质等生理功能，对许多食品的风味口感和营养价值都有重大的影响，因此一直备受关注。烟草中的有机酸主要指除氨基酸以外的其它有机酸。有机酸广泛存在于烟草中，含量约为 10%16%，有机酸的种类与含量直接影响着卷烟的吸味品质。烟草有机酸可中和游离碱，调节烟气酸碱性，降低烟气的辛辣、呛喉现象，改善余味使烟气变得舒适。因此，对烟草中有机酸含量的分析，对评定烟叶的品质、判断烟气是否醇和、指导烟叶生产和叶组配方等具有重要作用。由于有机酸在烟草中的重要作用，已有较多的文献对烟草中的有机酸进行5分析，检测方法主要有气相色谱、气质联用、液相色谱、离子色谱法等。目前较成熟的检测方法有气相色谱法、气质联用法和液相色谱法。气质联用法尽管具有定性和定量的能力，但质谱检测器没有火焰离子化检测器稳定，操作相对复杂，且质谱检测器也没有火焰离子化检测器使用普遍。此外液相色谱分离能力远远低于气相色谱，对有机酸的分离不够完全。因此，气相色谱-火焰离子化检测器对有机酸进行测定具有简单、稳定及快速等优点。烟草行业出台的检测标准为 YC/T 288-2009 烟草及烟草制品 多元酸（草酸、苹果酸和柠檬酸）的测定 气相色谱法 ，但该方法检测的有机酸种类较少（主要为 3 种低级多元酸） ，未包含烟草中主要高级脂肪酸（棕榈酸、亚油酸、亚麻酸