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!“ 卷# 期 $%“ 年 $ 月 ! 日微生物学报 !“#$ %#%4?8:.?A;7作者简介: 史晶 (#404 B ) , 男, 山西太原人, 博士研究生, 研究方向为分子微生物学。637.82: CD8C8:9S-T7F) 购自J*U 6:92.:V M8;2.+ 公司; 受体菌 6W$02TFP(Q“ J.POZ2TF, P(Q“ 的 J.POZ2TF1,83PO2,#5%77;2TFJ.O2,P0Q5,%Q#1U*:$%) 洗板 “ 次, 然后加入 1MH 缓冲液稀释的肽库原液#%!F 后, 室温缓慢振荡#D。%Q#1MH1 缓冲液洗板#% 次, 洗 去未结合的噬菌体, 每孔加入 #%!F 洗脱液 (P$Q$, %Q$7;2TF甘氨酸3盐酸缓冲液) , 室温缓慢振荡 #%78: 洗脱结合于固相化表位肽的噬菌体, 加入约 #5!F 中和液 (P4Q#, #7;2TF 1,83PO2)中和洗脱液。以此侵染宿主菌 6W$02TF J.POZ2TF 硫酸终止反应。!“!5%观察结果, 并记录筛选出的阳性克隆数。!“$“#6FGHE 鉴定噬菌体克隆的特异性: 从筛选获得的噬菌 体克隆中, 分别选择 温育 8 产出数4投入数, 计算每轮筛选获得噬菌体克隆的产出率 (表 8、 #) , 从表 8 和 # 数据可以看出, 随着筛选轮数的增加,产出率逐渐增加, 表明筛选实现了噬菌体克隆的富集。表 !噬菌体肽库对表位模拟肽 %) :340 Q 35“6 3 1G=GE /,R?JKI S,:=GHGJ R*,,2; Q ;,!36 ; /JKE%KG V Y,- Q 4!226 - RL%I=J /,RL%I=J ,- Q 3,236 0 史晶, 荫俊, 王慧6 / 型肉毒毒素 *+ 片段 0 Q 42364“ FLL%JGI - /.0 ;-;4/-? =: ;A0- /?;6A: ;-;4/- 6/=,A,:* ?JM,S/( *F?!,( FJ,*Ba b?%ZcFJ(:$.$“2,“4“3)!REEGUJK?JM %F=CE6 )GL: -5Z4“Z5502-!;3;VZD%?L: MGJ“4“0dH?U6?J%6+D_G+G?HGK:3“ FJG 3“!./+GU=GK:4- FLI 3“!._GH?GK:; /FMF= 3“!-;4:* ?JM &$ .-6.A0$. ?#0“,7#,-,#0. :#+#0. (3“5) 25 (4)
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