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农业生物技术学报, 2010年, 第18卷, 第 3期, 第 545-555页 Journal of Agricultural Biotechnology, 2010, Vol.18, No.3, 545-555 研究报告 A Letter 鸡心脏型脂肪酸结合蛋白(HFABP)基因多态性对肉质性状和组织表 达的影响 邓龙华 1 谢亮 2 罗成龙 2 聂庆华 2 张细权 2* 1广东温氏食品集团有限公司,新兴, 527400 2华南农业大学动物科学学院,广州, 510642 *通讯作者, xqzhangscau.edu.cn 摘要 肌内脂肪含量(intramuscular fat, IMF)被认为是影响畜禽肉质风味的主要因素, 而作为影响畜禽肌 内脂肪沉积的候选基因, 心脏型脂肪酸结合蛋白(hearttype fatty acidbinding proteins, HFABP)基因对鸡肌内 脂肪的沉积起着重要的作用。本实验选择 H FABP 基因的 3 个变异(SNP 或插入缺失)对华南农业大学杏花 鸡伊 隐性白洛克鸡全同胞家系 F2 代资源群进行了标记 - 性状关联分析, 并利用实时荧光定量 PCR (quantita tive realtime PCR, qRTPCR)技术对不同组织、 不同日龄及不同基因型的 HFABP 基因 mRNA 表达水平上 的差异进行了研究。结果表明, G+926A 位点多态性与胸肌粗脂肪含量呈极显著相关(P0.05), 仅与 70 日龄和 84 日龄体重等生长性状 的相关性达到极显著相关水平(P 0.05); 与皮下脂肪、 脂肪带宽、 腹脂率等部分脂肪性 状也不相关(P0.05); 而仅与胸肌粗脂肪含量呈极显 著相关(P0.01), 与腿肌粗脂肪含量也有一定的相关 趋势(0.05P=0.063 20.1)。为进一步分析单点在胸 肌粗脂肪含量中的作用,在不用基因型间进行多重 比较,分析可知: G+926A位点的三种基因型对胸肌 粗脂肪含量的最小二乘均值间存在有显著的差异, 其中 AA 基因型测定值的最小二乘均值低于 AG 和 GG型, 且差异极显著(P0.01), 而 AG型与 GG 型间 差异不显著; 对于腿肌粗脂肪含量, 基因型间也存在 显著的差异,其中 GG 基因型测定值的最小二乘均 图 2 14 bp插入/ 缺失位点的PCRSSCP分析 注: 1,2,6,7,8,9,10,11,12,14:域 3,4,13,15: ID 5,16: DD Figure 2 PCRSSCP analysis of 14 bp ins/del Note: 1,2,6,7,8,9,10,11,12,14:域 3,4,13,15: ID 5,16: DD 图 3 C+2851T位点的 PCRRFLP电泳图谱 注: M: DL2000 marker 1,2: TT 3: CC 4,5,6,8:TT 7,9:TC Figure 3 Electrophoretogram of PCRRFLP of C+2851T Note: M: DL2000 marker 1,2: TT 3: CC 4,5,6,8: TT 7,9: TC 表 1 G+926A位点的多态性与鸡肉质性状的关联 Table 1 Association of the G+926A with meat quality traits of chicken P 0.971 9 0.431 7 0.334 6 0.958 9 0.933 0 0.248 7 0.381 6 0.616 7 0.240 6 0.863 0 0.919 4 0.958 1 0.652 0 0.404 1 0.066 1 0.003 8 0.063 2 AA 29.88依 0.22 (102) 1.49依 0.03 (102) 1314.9依 26.68 (102) 4.13依 0.16 (102) 12.04依 0.46 (102) 1199.0依 24.62 (102) 1040.6依 21.91 (102) 91.53依 2.00 (102) 112.80依 2.61 (102) 27.90依 2.05 (102) 1.90依 0.02 (102) 64.36依 1.08 (102) 53.85依 1.50 (102) 68.11依 3.15 (102) 29.31依 1.22a (102) 0.69依 0.11a (47) 3.13依 0.21a (47) AG 29.86依 0.16 (159) 1.47依 0.02 (160) 1303.6依 19.78 (160) 4.14依 0.12 (160) 11.89依 0.34 (160) 1193.3依 18.25 (160) 1035.6依 16.24 (160) 89.75依 1.49 (160) 113.8依 1.93 (160) 29.00依 1.52 (159) 1.94依 0.03 (159) 64.64依 0.80 (160) 54.92依 0.89 (160) 70.99依 2.33 (160) 31.64依 0.91ab (160) 0.86依 0.09b (86) 3.20依 0.23a (85) GG 29.92依 0.17 (194) 1.52依 0.02 (195) 1347.3依 20.29 (195) 4.09依 0.12 (195) 12.04依 0.35 (195) 1238.7依 18.73 (195) 1069.2依 16.67 (195) 91.25依 1.52 (195) 118.2依 1.98 (195) 28.33依 1.56 (195) 1.89依 0.02 (195) 64.40依 0.82 (195) 55.15依 0.91 (195) 73.88依 2.39 (195) 33.13依 0.93b (195) 0.95依 0.10b (83) 3.98依 0.22b (83) 注: HW:初生重 LWBS: 宰前活重 CW: 屠体重 SFT: 皮下脂肪厚 CFW:脂肪带宽 EYG:半净膛重 EY:全净膛重 BMW: 胸肉 重 LMW:腿肉重 AFW: 腹脂重 AFR:腹脂率 LMC: 腿肌肉色 BMC: 胸肌肉色 LMSS: 腿肌剪切力 BMSS: 胸肌剪切力 BM CFC: 胸肌粗脂肪含量 LMCFC: 腿肌粗脂肪含量值为最小二乘均值依 标准误; 表中相同字母表示差异不显著, 不同字母表示差 异显著,小写字母不同表示差异显著(P0.05), ()内的数字表示个体数 Note: HW: Hatch weight LWBS: Living weight before slaughtering CW: Carcass weight SFT: Subcutaneous fat thickness CFW: Cingulated fat width EYG: Eviscerated yield with giblet EY: Eviscerated yield BMW: Breast muscle weight LMW: Leg muscle weight AFW: Abdominal fat pad weight AFR: Abdominal fat pad ratio LMC: Leg muscle color BMC: Breast muscle color LMSS: Leg muscle shear stress BMSS: Breast muscle shear stress BMCFC: Breast muscle crude fat content LMCFC: Leg muscle crude fat content The values are indicated by Leastsquare Means依 SE Values within a row with different superscript lowercase letter differ sig nificantly (P0.05) Number in brackets showed the number of tested individuals of each genotype 性状 Traits HW (g) LWBS (kg) CW (g) SFT (mm) CFW (mm) EYG (g) EY (g) BMW (g) LMW (g) AFW (g) AFR (%) LMC BMC LMSS BMSS BMCFC (%) LMCFC (%) 鸡心脏型脂肪酸结合蛋白(H原 FABP)基因多态性对肉质性状和组织表达的影响 Association of Heart Fatty Acidbinding Protein Gene Polymorphismswith Chicken Meat Quality Traits 547农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 值高于 AA和 AG 型, 差异显著(P0.05), 而 AA 型与 AG型差异不显著。由此可见, G+926A位点的 G 等 位基因对胸肌、腿肌的肌内脂肪含量相对来说可能 是优势等位基因。 1.2.214bp插入/缺失位点多态性与鸡肉质性状的关联 从表 2 可以看出, 14 bp 插入位点与鸡脂肪等相 关性状关联分析的结果都是差异不显著,但在分析 过程中发现此点与 70 日龄和 84 日龄体重等某些生 长性状的相关性达到极显著相关水平(P0.01)。 1.2.3 C+2851T位点的多态性与鸡肉质性状的关联 通过关联分析, 从表 3 可以看出: C+2851T 位点 仅与腿肌粗脂肪含量呈显著相关(P0.05), 与胸肌粗 脂肪含量也有一定的相关趋势(P越 0.0563)。C+2851T 位点的三种基因型对腿肌粗脂肪含量的最小二乘均 表2 14 bp插入 /缺失位点与鸡肉质性状的关联 Table 2 Association of the 14 bp ins/del with meat quality traits of chicken 性状 Traits HW (g) LWBS (kg) CW (g) SFT (mm) CFW (mm) EYG (g) EY (g) BMW (g) LMW (g) AFW (g) AFR (%) LMC BMC LMSS BMSS BMCFC (%) LMCFC (%) P 0.310 0 0.738 2 0.785 6 0.197 5 0.349 6 0.661 3 0.669 2 0.740 5 0.623 1 0.669 1 0.414 1 0.701 8 0.297 4 0.642 0 0.232 6 0.991 4 0.446 6 域30.19依 0.37 (31) 1.52依 0.05 (31) 1347.75依 44.55 (31) 4.35依 0.26 (31) 13.03依 0.76 (29) 1239.76依 41.25 (31) 1073.61依 36.66 (31) 93.03依 3.34 (31) 117.58依 4.35 (31) 29.09依 3.41 (31) 1.92依 0.02 (31) 65.62依 1.80 (31) 55.80依 1.99 (31) 68.37依 5.28 (31)
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