中华人民共和国国家标准GB xxxx xxxx 食品安全国家标准食品添加剂普鲁兰多糖（征求意见稿）中华人民共和国卫生 部发 布xxxx-xx-xx 发布xxxx-xx-xx 实施GB xxxx xxxx食品安全国家标准食品添加剂普鲁兰多糖1 范围本标准适用于由出芽短梗霉（Aureobasidium Pullulans ）对碳水化合物进行纯种培养发酵后，经加工制成的食品添加剂普鲁兰多糖。2 分子式和结构式2.1 分子式(C6H10O5)n2.2 结构式3 技术要求3.1 感官要求：应符合表1 的规定。表 1 感官要求项目要求检验方法色泽类白色取适量样品置于清洁、干燥的玻璃容器中，在自然光线下观察其色泽和状态。状态粉末4.3 理化指标：应符合表2 的规定。表 2 理化指标4.4 微生物限量：应符合表3 的规定。表 3 微生物限量项目采样方案及限量检验方法菌落总数 /（CFU/g）10000 GB 4789.2 大肠菌群 /(MPN/100g) 在25g中阴性GB 4789.3 项目指标检验方法粘度 /(mPa s) 25004000 附录 A 中 A.3 单糖、二糖和寡糖（以葡萄糖计），w/ % 10 附录 A 中 A.4 总氮， w /% 0.05 GB/T 609 干燥减量， w /% 10 GB 5009.3 直接干燥法a铅（ Pb）/（mg/kg）2.0 GB 5009.12 灼烧残渣， w/ % 8 GB 5009.4 pH 6.08.0 附录 A 中 A.5 a干燥温度和时间分别为105和 2.5h。附录 A 检验方法A.1 一般规定标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682 2008中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601 、GB/T602 、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2 鉴别试验A.2.1 在 10mL 普鲁兰多糖溶液 （ 10%）中加入 0.1mL 普鲁兰酶TS，混合， 静置， 得到没有粘性的溶液。A.2.2 在 10mL 普鲁兰多糖溶液（2%）中加入2mL 聚乙烯醇600，立即形成白色沉淀。A.3 粘度的测定A.3.1 仪器和设备A.3.1.1NDJ-1 型粘度计 (4号转子 60r/min) 或同等性能的布氏（Brookfield ）粘度计。A.3.1.3搅拌器 (800r/min) 。A.3.2 分析步骤A.3.2.1 量取 270mL 水于搅拌杯中，置于搅拌器上，开启搅拌；A.3.2.2 称取 30.0g 普鲁兰多糖，缓慢加入到搅拌杯中，于800r/min 下搅拌 30min；A.3.2.3 在 251条件下用粘度计4 号转子 60r/min 测定该溶液粘度。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2%。A.4 单糖、二糖和寡糖的测定A.4.1 方法提要试样用甲醇和氯化钾沉淀之后，用蒽酮-硫酸法测定试样中的单糖、二糖和寡糖含量。A.4.2 试剂和材料A.4.2.1饱和氯化钾溶液：量取适量水，置于烧杯中，加入氯化钾晶体，边加入边搅拌，加至所加晶体不再溶解时，然后静置取上层清液。A.4.2.2甲醇。A.4.2.3蒽酮溶液： 0.2g 蒽酮溶解100g 75% (v/v) 硫酸溶液中，现用现配。A.4.3 仪器和设备分光光度计，检测波长为620nm。A.4.4分析步骤A.4.4.1标准溶液的制备准确称取0.2g 葡萄糖，用水溶解，稀释定容至1L，从中量取0.2mL，加入到5mL 蒽酮溶液中，混合均匀，此为标准溶液。A.4.4.2空白溶液的制备量取 0.2mL 水，加入到5mL 蒽酮溶液中，混合均匀，此为空白溶液。A.4.4.3试样液的制备准确称取0.8g 试样，用水溶解，稀释定容至100mL ，此为试样贮备液。量取1mL 试样贮备液，置于一个离心管中，加入0.1mL 饱和氯化钾溶液和3mL 甲醇，剧烈混合20s，在 11000 r/min 条件下离心10min 。量取 0.2mL 离心后的上清液，加入到5mL 蒽酮溶液中，混合均匀，此为试样液。A.4.4.4测定将试样液、 标准溶液和空白溶液放在90水浴中保温15min，用分光光度计， 在 620nm 处分别测定这些溶液的吸光度。A.4.5结果计算单糖、二糖和寡糖含量以葡萄糖的质量分数w1计，数值以 %表示，按公式（A.1）计算：10041.0)(01 1mAAmAAwbsbt（A.1）式中：At测得的试样液的吸光度值；Ab测得的空白溶液的吸光度值；As测得的标准溶液的吸光度值；m1葡萄糖质量的数值，单位为克（g） ；m0样品质量的数值，单位为克（g） 。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2%。A.5 pH 的测定A.5.1 仪器和设备A.5.1.1酸度计：精度0.01pH值单位。A.5.1.2分析天平：精度0.001g。A.5.1.3搅拌器： 800r/min 。A.5.2 分析步骤A.5.2.1 量取 270mL 水于搅拌杯中，置于搅拌器上，开启搅拌；A.5.2.2 精确称量30.0g 普鲁兰多糖试样，缓慢加入到搅拌杯中，于800r/min 下搅拌 30min；A.5.2.3 在 251条件下用酸度计测溶液pH（精确至0.01pH 值单位）。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2%。