1 摘要本发明公开了一种6 -甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，达到较高的6 -甲基强的松龙及其衍生物的收率和质量。以醋酸可的松为原料，包括在6 位引入次甲基，将次甲基转位成-甲基。通过节杆菌生物转化法将1，2 位脱氢成为 6 -甲基醋酸强的松。选择性还原 11-酮为 11-羟基，成为 6 -甲基强的松龙及其衍生物。该方法具有位置专一性强、收率高的特点，对甾体药物制备有重要意义。1 权 利 要 求 书1. 一种如式所示的6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其中R 为甲基、乙基、1-丙基或 2-丙基中的任意一种， R1、R2 为氢、乙酰基、丙酰基、丁酰基或琥珀酰基中的任意一种，R3为氢， 其特征在于以式所示的醋酸可的松及其衍生物为原料制备而得。OCOOOCH2OR1RR2R3R2OR1CH2OCOOO式式2. 如权利要求 1 所述 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）以式所示的醋酸可的松其衍生物为原料，将3- 酮进行醚化处理，同时转移 3-酮为3，5，得到式所示化合物；（2）将式所示化合物进行烷基化，得到式所示化合物；（3）将式所示化合物进行微生物转化法1，2- 脱氢，得到式所示化合物；（4）选择性还原式所示化合物的11- 羰基成为如式所示的6 - 甲基强的松龙其衍生物。CH3CH2C OOOOCH2OR1R2R2ROR1CH2OCOOO R2ROR1CH2OCOOO式式式3按权利要求2 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于将式 所示化合物与原甲酸酯、无水酸反应生成式所示化合物。4按权利要求2 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于式所示化合物与 N-烷基苯胺、 醛、钯碳酸盐、 环己烯、酸性溶液反应， 制得式所示化合物。5按权利要求4 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于反应过程如下：CH3CH2C OOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2ROCOOOCH2OR1R2RO式式式2 6按权利要求2 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于式所示化合物与卤化物、钯碳酸盐、酸性溶液反应，制得式所示化合物。7按权利要求6 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于反应过程如下：CH3CH2C OOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2ROBr3COOOCH2OR1R2ROBr2COOOCH2OR1R2RO式式式式8按权利要求2 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于式所示化合物与 DMF、POCl3、钯碳酸盐、环己烯、酸性溶液反应，制得式所示化合物。9按权利要求8 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于反应过程如下：CH3CH2C OOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2ROOCOOOCH2OR1R2ROCOOOCH2OR1R2RO式式式式10按权利要求 2 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于式所示化合物在微生物节杆菌（arthrobacter simplex AS 1.754）作用下生成式所示化合物。11按权利要求 2 所述的 6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于式所示化合物与盐酸氨基脲、 KBH4、NaNO2及酸性溶液反应， 生成 6 - 甲基强的松龙及其衍生物。12按权利要求11 所述的 6 -甲基强的松龙及其衍生物的生产方法，其特征在于反应过程如下：R2ROR1CH2OCOOOCOOCH2OR1RR2ONCNH2CONH2NHNNCOCH2OR1RR2ON CNH2CONH2NH NNR3OOCOOOCH2OR1RR2R3式式式式1 说明书6 - 甲基强的松龙及其衍生物的生产方法技术领域本发明涉及 6 -甲基强的松龙及其衍生物的生产工艺方法。本发明属于生物制药及医药工程领域。背景技术6 -甲基强的松龙又称 6 - 甲基泼尼松龙，它的化学名为11,17,21- 三羟基 -6 -甲基孕甾 - l,4-二烯- 3,20- 二酮。 6 -甲基强的松龙及其衍生物是一个有力的抗免疫应激反应的肾上腺类皮质激素类固醇，并且广泛地被用于抗免疫应激反应的临床应用之中。主要是用于脏器移植、抑制免疫作用、亦可用于急性肾上腺皮质功能不全及手术后休克等。关于6 - 甲基泼尼松龙的合成有许多报道，如Upjohn的以黄体酮为原料，经过11位羟化、3，20位缩酮、过酸氧化5，6、格氏反应生成 5- 羟基6- 甲基、消去 5- 羟基、john s试剂氧化11- 羟基、草酸丁二酯改造侧链、 SeO2脱氢和还原 11- 酮等一系列反应， 得到目标产物。专利GB2318790 以6- 甲基黄体酮醋酸酯再原料， 经过新月弯孢霉进行 11-羟化、诺卡氏节杆菌脱氢和液溴法改造侧链得到目标产物。国内也进行了大量的研究。如黄鸣龙等对合成6- 甲基进行研究，合成了目标产物的中间体6- 甲基副皮质醇乙酸酯。蔡祖恽等以11-酮17- 羟基黄体酮为原料， 通过原甲酸三乙酯醚化、 mannich反应引入 6-次甲基，钯/ 碳及环己烯还原成为 6-甲基，在酸性甲醇中转化成为6- 甲基或在酸性乙二醇中缩酮保护3，20-二酮，用KBH4还原11- 酮为11-羟基，上碘置换方法改造侧链， 再用DDQ或或微生物脱掉1，2氢成为目标产物。骆萌仿制了蔡祖恽的路线。由于目前的生产工艺复杂, 步骤繁琐，导致其收率偏低，同时需要使用如格氏试剂、重铬酸、Br2、SeO2或DDQ等危险试剂，所以研究一种具有收率高、反应条件温和、避免使用各种危险试剂的工艺方法，对甾体药物的发展有重要的意义。发明内容我国的醋酸可的松及其衍生物的生产在国际处于领先水平，但除了作为泼尼松和泼尼松龙系列产品的中间体外，其余的用途没有得到有效的开发。本发明的目的是提供一种以醋酸可的松为原料制备6 - 甲基强的松龙及其衍生物的方法。有效拓宽了醋酸可的松及其衍生物的用途。在 6 -甲基强的松龙及其衍生物生产工艺中，上6 - 甲基和1，2- 脱氢是其中的关键步骤。按照本发明提供的方法，具有反应专一性好，各步副产物少，每步的收率高，可以2 克服现有使用各种危险试剂，产品的收率低，质量不稳定的缺点。以下是对本发明方法的详细说明。（一） 、本发明以式所示的醋酸可的松及其衍生物即17，21- 二羟基 -孕甾-4- 烯-3 ，11，20-三酮类为起始原料，将3- 酮进行醚化处理，同时转移3-酮为3，5，制得式所示的化合物。R2OR1CH2OCOOOCH3CH2C OOOOCH2OR1R2式式醚化反应在无水条件下进行，以式所示化合物重量10-15 倍的醚类为溶剂， 所用的醚可以是乙醚、四氢呋喃等。所用的催化剂为式所示化合物0.01-0.03 倍的各种酸类如H2SO4、HClO4、对甲苯磺酸等。所用的醚化剂为式所示化合物0.5-1 倍的原甲酸酯，反应温度为 3059。反应的时间为 13 小时，最佳反应温度为 4050，若反应不完全，可以酌情增加醚化剂，并延长反应时间。（二） 、式所示化合物与N-烷基苯胺、醛、卤化物、DMF、POCl3、钯碳酸盐、环己烯、 HCl、氢气等试剂反应，制得式所示化合物。CH3CH2C OOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2RO式式若式所示化合物与N-烷基苯胺、醛反应。则如下图所示：CH3CH2COOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2ROCOOOCH2OR1R2RO式式式在上一步反应液中分别加入式所示化合物0.250.4 倍的 N-烷基苯胺、 醛反应 12 小时，反应温度2046。加 1020倍的水，于 2035搅拌反应 1 小时，制得式所示化合物。 式所示化合物用510 倍的 DMSO 溶解，用 0.10.2 倍的钯碳酸盐、 以等量的环己烯反应24 小时，反应温度为20180，最佳温度为130150。将反应液在温度 0120, 真空度 0.085atm下减压浓缩去除溶剂， 调节温度为 4050， 加入 35 倍的 37HCl， 保温 0.51 小时，加入 NaOH 调节 pH至 68， 加 1020 倍的水搅拌 13 小时，即可制得式所示化合物。3 若式所示化合物与卤化物为反应，反应过程如下图所示：CH3CH2C OOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2ROBr3COOOCH2OR1R2ROBr2COOOCH2OR1R2RO式式式式在上一步反应液中分别加入式所示化合物的14倍卤化物在室温下搅拌4050小时，过滤掉卤化物，即可制得式所示化合物。将式所示化合物用1530 倍的有机碱性溶剂溶解， 加热至回流 2050 分钟，冷却后加入 200 倍的水，制得式所示化合物。将式所示化合物用1020 倍的甲醇溶解，加入1.54 倍的三乙胺，加入0.10.5倍的 2钯碳酸盐，在室温与氢气下反应3060 分钟，直至反应液不再吸收氢气。过滤掉钯碳酸盐，将滤液用510 倍的 1mol/lHCl 室温下酸化 1 小时，加 200 倍的水，得到式所示化合物。 若式所示化合物与DMF/POCl3为反应，反应过程如下图所示：CH3CH2C OOOOCH2OR1R2COOOCH2OR1R2ROOCOOOCH2OR1R2ROCOOOCH2OR1R2RO式式式式将式所示化合物溶入12 倍的 DMF ， 加入 13 倍的苯，加入式所示化合物0.50.8 倍的 POCl3。在温度不超过 20下反应 13 小时，然后加入式所示化合物23 倍的醋酸钠 -甲醇溶液反应 12 小时，加入式所示化合物5 倍苯和 20倍的水，分去水层。将有机层减压浓缩使式所示化合物结晶析出。将式所示化合物用36 倍的甲醇溶解，在 3050下加入式所示化合物0.10.3倍的 KBH4，反应 23 小时。再加入 0.30.5倍的 37HCl，反应 11.5 小时。加入 200 倍的水，制得式所示化合物。将式所示化合物与上法相同处理，即可制得式化合物所示化合物。( 四) 、式所示化合物经过微生物转化，用重结晶方法分离出没有转化的式所示化合物，即可制得式所示化合物。如下图所示：COOOCH2OR1R2ROR2ROR1CH2OCOOO式式该反应以含节杆菌（ arthrobacter simplex AS 1.754）的发酵液进行，培养基组成：4 玉米浆：0.62.0；葡萄糖： 0.31.0；蛋白胨： 0.10.8，磷酸二氢钾： 0.10.6；初始 pH 为 6.47.5。节杆菌经过培养2228 小时后，酶活力在1 分钟内。将粉碎至1m 以下 121下湿热灭菌 20 分钟的式所示化合物投入到发酵液中，继续发酵48小时后，式所示化合物转化率可达 85以上。将发酵液酸化、过滤，得到含有式、式所示化合物的滤饼，使用合适的溶剂进行重结晶，溶剂可以是二氯甲烷、CHCl3、二氯乙烷、乙醇等，可以用其中的一种或其组合物，将滤饼溶解后，再蒸发掉部分溶剂，直到有少量的结晶析出，冷却至-515，过滤，即可获得式所示化合物。再将滤液蒸干，即可回收式所示化合物。（五） 、式所示化合物与盐酸氨基脲、KBH4、NaNO2反应，即可制得式所示的6甲基强的松龙。其反应过程如下图所示：R2ROR1CH2OCOOOCOOCH2OR1RR2ONCNH2CONH2NHNNCOCH2OR1RR2ONCNH2CONH2NHNNR3OOCOOOCH2OR1RR2R3式式式式由式所示化合物制成式所示化合物的反应为缩合反应，该反应的溶剂可以是甲醇