中南大学学报（医学版） J Cent South Univ (Med Sci)2015, 40(12) htt p:/www.csumed.org1306乳腺丝氨酸抑制蛋白在膀胱癌组织中的表达及其 与淋巴结转移的关系 唐云华，祖雄兵，熊羊，张向阳 ( 中南大学湘雅医院泌尿外科，长沙 410008 )摘要 目的：检测膀胱癌组织中乳腺丝氨酸抑制蛋白 (mammary serine protease inhibitor，Maspin)的表达，探讨Maspin与临床病理及其与淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组织化学染色的方法检测72例膀胱癌组织和12例正常膀胱黏膜组织的Maspin表达；分析72例膀胱癌患者术前盆腔CT扫描图片以及术后患者淋巴结标本的病理资料，计算诊断标准的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值，比较分析Maspin检测、螺旋CT在术前诊断膀胱癌是否有淋巴结转移方面的诊断效果。结果：1)膀胱癌组织的Maspin阳性表达显著低于正常膀胱黏膜组织(P0.05)；在非肌层浸润性膀胱癌(Ta+T1期)中Maspin的阳性表达率为66.7%(8/12)，在肌层浸润性膀胱癌 (T2T4期)中Maspin的阳性表达率为34.4%(21/61)， 二者差异有统计学意义(P0.05女1174 病理分级 G1G22818100.05多发461432图1 膀胱癌组织中Maspin的表达(400)Figure 1 Maspin expression in bladder cancer (400)A: Negative expression of Maspin in bladder cancer tissues; B: Positive expression of Maspin in bladder cancer tissues; C: Positive expression of Maspin in metastasizing lymph node; D: Positive expression of Maspin in vein tissues ACDB2.3 Maspin 表达与淋巴结转移的关系 在有淋巴结转移的膀胱癌组织中，Maspin 的阳性表达率为18.2%(4/22)，而在没有淋巴结转移的膀胱癌组织中，Maspin的阳性表达率为 50%(25/50)，二者差异有统计学意义(P0.05；表 2，3)。中南大学学报 ( 医学版 ), 2015, 40(12) http:/www.csumed.org13102.4 Maspin 表达及 CT 诊断膀胱癌中发生淋巴结转移 的相关参数比较 通过回顾性分析72例膀胱癌患者术前盆腔 CT扫描图片以及术后患者淋巴结标本的病理的资 料，结果CT诊断出共有27例有盆腔淋巴结转移， 淋巴结转移阳性率为37.5%(27/72)；病理结果显示 72例膀胱癌患者发生淋巴结转移的共有22例，淋 巴结转移阳性率为30.5%(22/72)。以病理检查的结 果作为淋巴结转移的金标准，计算出72例患者通 过CT检查诊断淋巴结转移阳性的灵敏度为45.5%， 特异度为73.3%，阳性预测值为37.0%，阴性预测 值为66.7%；通过免疫组织化学检测Maspin蛋白表 达的淋巴结转移阳性的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为81.8%，50%，41.8%和 86.2%。最后将盆腔CT扫描联合免疫组织化学检测 Maspin蛋白表达共同诊断淋巴结转移的灵敏度为 90.9%，特异度为78.0%，阳性预测值为64.5%，阴 性预测值为95.0%(表4)。表 3 Maspin 在膀胱癌组织的表达和淋巴结转移的关系Table 3 Relationship of Maspin expression between the bladder cancer tissues and lymph node metastasis淋巴结转移nMaspin的表达P阳性(+)阴性()阳性224180.05阴性502525表 4 Maspin 及 CT 扫描诊断膀胱癌中发生淋巴结转移的相关参数比较Table 4 Comparison of relevant parameter in bladder cancer diagnose between Maspin and CT scan 检测项目淋巴结转移灵敏度/%特异度/%阳性预测值/%阴性预测值/%+Maspin +42581.85041.886.21825 CT +101745.573.337.066.71233 Maspin联合CT +201190.978.064.595.0239性膀胱癌中的表达显著减少。这一点在本实验结 果中也得到了体现，肌层浸润性膀胱癌较非肌肉 层浸润性膀胱癌Maspin的表达明显下调(34.4% vs 66.7%)。在体内及体外实验中，Maspin一直都被描述 具有抑制血管生成的作用。Zhang等5研究表明Maspin可通过抑制VEGF和成纤维生长因子诱导 的内皮细胞迁移以及限制有丝分裂和管腔的形成 来直接作用于培养的内皮细胞。另外，Maspin还 可以诱导内皮细胞的凋亡，通过在乳腺肿瘤中用 Maspin靶向内皮细胞可以导致新生血管破坏而发 生血管渗漏，而对成熟的血管没有损害作用10。 膀胱癌的淋巴道转移是最常见的一种途径，其中 微脉管系统在膀胱癌的转移中扮演着主要的角 色。目前，虽然Maspin表达具有抑制血管生成的 作用被相继报道，但其与微淋巴管关系的文献报 道甚少。研究11表明：微淋巴管和微血管在生物 学行为上具有同源性，两者均从原始静脉分化而3 讨 论Maspin基因位于染色体18q21.3q23上， cDNA基因的序列总长度达2 854 bp，其在1994年被首次发现。Maspin是丝氨酸抑制蛋白超级家 族的重要成员之一，它在肿瘤发生和转移的过程 中发挥重要作用，如抑制细胞迁移、抑制血管生 成、增加细胞的黏附能力以及诱导程序性细胞的 死亡，因此其被归类为一种抑癌基因8。研究9发现：Maspin蛋白的表达在乳腺癌、前列腺癌、 胃癌以及黑色素瘤中是下调的，而在胰腺癌、 胆囊癌、结肠癌及甲状腺癌中是过度表达的，这 表明Maspin在不同的细胞类型中也许发挥着不同 的作用。本实验中膀胱癌组织中的Maspin表达较 正常膀胱黏膜组织显著下调。近来研究9表明： 在体内和体外实验中，膀胱癌组织中Maspin表达 的下调与癌细胞的生长关系密切，特别是Maspin 表达存在于膀胱癌表浅肿瘤中，而其在肌层浸润乳腺丝氨酸抑制蛋白在膀胱癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系 唐云华，等1311来，两者均受到VEGF的调节，癌细胞可以通过 VEGF的调节作用促进淋巴管内皮细胞的发生， 从而促进新生淋巴管的增生，保证淋巴的顺利回 流，为癌细胞的生长提供了有利的微环境。刘志 强等12研究表明Maspin蛋白能抑制宫颈癌的微淋 巴管的增殖、迁移及分化。本实验中Maspin的表 达在淋巴结转移阳性的膀胱癌组织中显著下调， Maspin在膀胱癌组织中表达的下调与淋巴结转移 关系密切。这提示Maspin也许在诊断膀胱癌淋巴 结转移方面是一个有价值的肿瘤生物标志物。 术前盆腔淋巴结的转移情况极大地影响膀 胱癌患者的治疗决策，当前国际指南仍然推荐采 用CT或者MRI来评估淋巴结的状态。然而，这 些工具在评估淋巴结转移方面准确率不高。实际 上，将近有25%术前被分期为淋巴结阴性的膀胱 癌患者在术后通过病理检查证实为淋巴结转移阳 性13。目前CT对于淋巴结转移的阳性标准主要是基于淋巴结的大小、中心坏死情况及外包膜的 侵犯等做出判断的。其中最主要的问题就是根据 淋巴结的大小来评判淋巴结是否转移，对此目前 还有很多争议。CT在灵敏度和特异度方面，很 大程度取决于CT扫描的技术参数，如视野的选 区、矩阵的大小以及扫描的层厚等。在评估盆腔 淋巴结转移方面，CT扫描的可靠性为67%97%， 敏感度为48%75%，另外由于在正常大小范围的 淋巴结中不能排除存在微转移病灶存在的可能。 作者通过回顾性分析72例膀胱癌患者术前CT扫 描图片，结果共诊断出27例有盆腔淋巴结转移， 淋巴结转移阳性率为37.5%；病理结果显示72例 膀胱癌患者中发生淋巴结转移的共有22例，淋巴 结转移阳性率为30.5%。其中有17例错误诊断为 淋巴结转移阳性，术后病理结果证实为炎症反应 性增生，因CT在区分由炎症反应性增生和膀胱 癌转移引起的淋巴结增大方面有一定的限制，所 以有一定的假阳性存在。以病理检查的结果作为 淋巴结转移的金标准，计算出72例患者通过CT 检查诊断淋巴结转移阳性的灵敏度为45.5%，特 异度为73.3%，阳性预测值为37.0%，阴性预测 值为66.7%；这与国外其他学者的报道有一些不 同之处，Jeong等14报道对61例膀胱癌患者盆腔淋巴结进行CT扫描，结果灵敏度、特异度、阳 性预测值及阴性预测值分别为29.4%，97.7%， 83.3%，78.2%。综上所述，CT在区分由炎症反 应性增生和膀胱癌转移引起的淋巴结肿大以及准 确诊断一些微小转移病灶存在的淋巴结方面有一 定的局限。本研究发现通过免疫组织化学检测 Maspin蛋白表达的淋巴结转移阳性的灵敏度、特异度、阳性预期值和阴性预期值分别为81.8%， 50%，41.8%和86.2%。与CT扫描相比较，Maspin 的灵敏度明显增高(81.8% vs 45.5%)，而特异度 明显减少(50% vs 73.3%)，阳性预测值二者相差 不大(41.8% vs 37.0%)，阴性预测值增高(86.2% vs 66.7%)。作者进一步将CT扫描联合免疫组织化学 检测Maspin蛋白表达，结果发现灵敏度为90.9%， 特异度为78.0%，阳性预测值为64.5%，阴性测值 为95.0%。其中，灵敏度和阴性预测值较两种检测 方式单独检测时显著增高，灵敏度的增高可以让 泌尿外科医生更加准确地诊断出合并淋巴结阳性 的膀胱癌患者，弥补CT在发现存在微小转移病灶 方面的不足之处。从临床的角度来看，假阴性的 发现所造成的后果比起假阳性来说更为严重，因 为手术切除假阳性的淋巴结对患者造成的影响很 少15，因此将CT扫描联合免疫组织化学检测Maspin蛋白表达所得的阴性预测值是一个很有潜 力的指标，可以弥补CT在区分由炎症反应性增生 和膀胱癌转移引起的淋巴结肿大方面的局限性。 综上所述，Maspin在诊断膀胱癌患者淋巴结转移 中也许是一个有价值的肿瘤生物标志物，通过检 测膀胱癌组织中Maspin的表达联合盆腔CT扫描共 同评估膀胱癌患者中淋巴结是否转移的情况，比 起单独采用CT或者Maspin表达可能具有更大的潜 力和优势，但对于能否用于临床，仍需要进一步 研究其可行性及安全性。参考文献1 Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, et al. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012J. Int J Cancer, 2015, 136(5): E359-E386. 2 韩苏军, 张思维, 陈万青, 等. 中国膀胱癌发病现状及流行趋势分析J. 癌症进展, 2013, 11(1): 89-95. HAN Sujun, ZHANG Siwei, CHEN Wanqing, et al. Analysis of the status and trends of bladder cancer incidence in ChinaJ. Oncology Progress, 2013, 11(1): 89-95. 3 Tempany CM, McNe