1HPLC 法测定复肾宁胶囊中丹皮酚的含量作者：陈亚利，陈亚芬，刘景霞，王国华【摘要】 目的：建立复肾宁胶囊中丹皮酚含量测定的方法。方法：采用 HPLC 法测定，色谱柱：Kromasil 5C18；流动相：甲醇-水(65：35)；测定波长：274nm。结果：含量测定丹皮酚线性范围 0.03864-0.5796g，r=1.0000，平均回收率为99.6%,RSD=0.95%。结论：本法灵敏、快速、准确,可用于测定复肾宁中丹皮酚的含量。 【关键词】 复肾宁胶囊 丹皮酚 高效液相色谱法 含量测定1 仪器与试药高效液相色谱仪:LC 2010 高效液相色谱仪(日本岛津)；丹皮酚对照品(供含量测定用，批号:0708 9704)购于中国药品生物制品检定所；复肾宁胶囊样品为吉林省精鑫药业集团有限公司生产；各味药材购置于吉林省药材公司；流动相甲醇为色谱醇，其它试剂为分析纯。2 含量测定2.1 色谱条件1 色谱柱：采用 Kromasil 5C18；流动相：甲醇-水(65：35)；流速：0.7ml/min；色谱峰基线分离。检测波长：对丹皮酚的对照品溶液进行紫外光谱扫描，其最大吸收为 274nm，并参考中国药典中丹皮酚测定波长，故选择其测定波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于 3000。2.2 供试品提取纯化条件的选择 将样品用甲醇超声；将样品用水蒸气蒸2馏。对方法、进行比较，经计算二者含量结果相近，但方法更简单，故选择方法制备供试品溶液。2.3 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量，加入甲醇制成每 1ml 含0.04mg 的溶液，即得。2.4 供试品溶液制备 取本品 20 粒，取其内容物，研细，取约 0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50ml，称定重量，超声处理 30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。2.5 阴性对照试验 取缺牡丹皮的阴性样品同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。精密吸取 5l 注入液相色谱仪进行测定，色谱图中在与丹皮酚对照品相应的保留时间处无吸收峰，表明阴性对照无干扰。 2.6 线性关系考察 精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每 1ml 含 0.03864mg 的溶液，精密吸取1.0、3.0、5.0、10.0、15.0l 注入液相色谱仪，测定，以对照品进样量(g)为横坐标，以峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程 y=-23690.52x+7470396.87(r=1.0000) 。表明丹皮酚进样量在 0.03864-0.5796g 范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系。2.7 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液 5l，重复进样 5 次，测定峰面积，结果 RSD 为 0.48%。2.8 稳定性试验 分别取同一放置 0、2、5、8、10h 的供试品溶液进行测定，供试品丹皮酚的峰面积的 RSD 为 1.28，说明牡丹皮在 10h 内稳定。2.9 重现性试验 对同一批号的复肾宁胶囊样品按上述的含量测定方法进行 53次平行提取测定，计算含量，结果平均含量为 0.79mg/粒，RSD=0.82%。2.10 回收率试验 精密称取已知含量的复肾宁胶囊(含量为 3.1567mg/g)5 份，每份为 0.40g，精密称定，分别置 5 个锥形瓶中，照含量测定方法测定，加入含丹皮酚 0.01824mg/ml 的甲醇液 50ml 作为提取溶媒，计算回收率，结果A=99.6%，RSD=0.95%。2.11 样品测定结果 3 批样品丹皮酚含量均值为 0.77、0.081、0.80mg粒。3 讨论牡丹皮为方中君药，丹皮酚为其主要成分之一。复肾宁胶囊原质量标准中无“含量测定”项，经查阅，未见处方中丹皮酚含量的相关报道，为更加有效准确地控制本药的内在质量，经方法学研究验证，采用高效液相色谱法对处方中牡丹皮中的丹皮酚进行含量测定，操作简便、结果准确、重现性好，具有专属性，能够有效地控制产品质量。【参考文献】1国家药典委员会编.中华人民共和国药典M.北京:化学工业出版社,2005.2王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究M.北京:中国医药科技出版社,1994.