1普罗帕酮对豚鼠左心室流出道慢反应自 律细胞的电生理效应作者：王雪芳 刘艳明 赵兰平 张晓云 温晓竟【摘要】 目的：探讨普罗帕酮对左心室流出道自律细胞的电生理效应。方法：应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术，观察普罗帕酮对豚鼠左心室流出道（主动脉前庭）动作电位 0 相幅值（APA），最大除极速率（Vmax），动作电位时程（APD），50%复极化时间（APD50），90%复极化时间（APD90），自发电活动频率（HR）的影响。结果：1.用 0.5mol/L 的普罗帕酮灌流后与正常对照组相比自发电活动频率（HR）显著下降（P0.01）；2.用 1mol/L 的普罗帕酮灌流后与对正常照组相比动作电位0 幅值（APA）下降（P0.05），动作电位时程（APD）延长（P0.05）。结论：普罗帕酮能抑制左心室流出道（主动脉前庭）的动作电位 0 幅值，延长动作电位时程，使自发电活动频率下降。 【关键词】 普罗帕酮；左心室流出道；电生理【ABSTRACT】 Objective:To study the electrophysiology Effect of Propafenone on spontaneous slowresponse cells of the heart aortic vestibule of rats.Methods:We recorded the action potentials by conventional intracellular microelectrode technique and observe the amplitude of action potential(APA)date and action potentials maximal time of action potential depolarization.50% APD and 90% APD of action potential time on ventricle Muscle cell of rats that were perfused with propafenone were detected as well.Results:(1) Compared the rats perfused with 0.5mol/L Propafenone with that of control group, the heart rate(HR)decreasesgreatly(P0.01). (2) Compared the rats perfused with 1mol/L Propafenone with that of control group, the amplitude of action potential (APA) decreases (P0.05), date action potentials(APD)increases(P0.05) and the heart rate(HR) decreases greatly (P0.01),Conclusion:Propafenone can prevent the amplitude of action potential(APA) of rats left ventricular outflow tract,decrease the heart rate(HR) and 2increase date action potentials(APD).【KEY WORDS】 Propafenone；Left ventricular outflow tract ；Electrophysiology心律失常是临床上常见的心血管疾病，有研究表明有一部分心律失常的发生是由于心脏的特殊传导系统异常电生理活动所导致的1,2。在豚鼠主动脉前庭右瓣与后瓣交界处以下局部区域具有类似窦房结 P 细胞的慢反应自律细胞3。临床上常用普罗帕酮来治疗由于心脏的特殊传导系统异常电生理活动所导致的危及生命的心律失常，有研究表明4其可对相应的特殊传导系统降低收缩期的去极化作用，延长传导以及动作电位的持续时间和有效不应期，提高心肌细胞阈电位，明显减少心肌的自发兴奋性。左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞也属于心脏的特殊传导系统之一，普罗帕酮对治疗由左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞异常电生理活动所导致的心律失常即普罗帕酮单独对左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞的电生理影响未见报道，本工作观察了普罗帕酮对左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞电生理的影响，以阐明普罗帕酮对左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞与其它特殊传导系统是否具有同样的作用。1 材料和方法1.1 标本制备 选用 0.250.5kg 豚鼠，雌雄不拘。击颅致昏后迅速开胸取出心脏。置于 O2 饱和的改良 Locke 液（NaCl0.157mol/L，KCl0.5610-2mol/L，CaCl20.2110-2mol/L，NaHCO30.1810-2mol/L，葡萄糖 0.5610-2mol/L，pH7.4），经冠状动脉冲洗。从主动脉瓣的左瓣与后瓣之间剪开主动脉壁并向下将左心室剪开，尽量保证各瓣膜完整，并以此为宽度，向下切取约 4mm 的心室肌组织（主动脉前庭包括在内），除去周围多余组织，制成实验标本。制好的标本标本心内膜向上以不锈钢针固定于灌流槽内的硅胶上，用 350.5的改良3Locke 液，恒温、恒速灌流，流速为 10ml/min。在灌流液中持续充以 O2,标本在灌流液中稳定 30min 后开始实验。1.2 电位引导 玻璃微电极充以 3mol/L KCl 电极液（直流电阻为 1020）,在主动脉瓣的右瓣与后瓣之间引导记录慢反应自发电位，使微电极稳定于同一细胞内，记录其动作电位图形。如能记录到自发电位，则不再进行电刺激；若记录不到自发电活动，则将刺激电极置于远离瓣膜一端的心肌组织上，给以波宽（2ms，1Hz）两倍于阈强度的方波刺激，刺激时间由数秒至数分不等，直至诱发出稳定的自发节律，停止电刺激，待自发节律稳定后开始实验。细胞内玻璃微电极引导的电信号经型微电极放大后，一路输入监听器监听，另一路经高速数模转换器输入微机，采样存储动作电位并分析其各项参数指标。1.3 观测指标 动作电位 0 相幅值（APA），最大除极速率（Vmax），动作电位时程（APD），50%复极化时间（APD50），90%复极化时间（APD90），自发电活动频率（HR）。1.4 实验过程和分组待自发慢反应动作电位稳定后，开始采集一组正常的左心室流出道自律细胞动作电位做对照，然后改用不同浓度普罗帕酮药液灌流。分组：（1）0.5mol/L 的普罗帕酮组（n=8）；（2）1mol/L 的普罗帕酮组（n=8）。1.5 统计学处理 应用 Excel 统计软件进行，动作电位的各观察数据均用 xs 表示，给因素前后各项指标采用自身配对 t 检验。 2 结果2.1 正常对照组 动作电位 0 相幅值（APA）=43.453.16mV，最大除极速率（Vmax）=2.980.43v/s，动作电位时程（APD）=33814ms，50%复极化时间（D50）4=19710ms，90%复极化时间（D90）=26316ms,自发电活动频率（HR）=87.184.45beatmin-1。2.2 0.5mol/L 普罗帕酮组 动作电位 0 相幅值（APA）=43.932.55mV,最大除极速率（Vmax）=3.530.58v/s,动作电位时程（APD）=33016ms，50%复极化时间（D50）=19112ms，90%复极化时间（D90）=25418ms，自发电活动频率（HR）=79.501.96beatmin-1。2.3 1mol/L 普罗帕酮组 动作电位 0 相幅值（APA）=38.401.91mV，最大除极速率（Vmax）=3.012005 年 10 月王雪芳等：普罗帕酮对豚鼠左心室流出道慢反应自律细胞的电生理效应第 5 期 2005 年 10 月河北北方学院学报（医学版）第 5 期0.26v/s，动作电位时程（APD）=36014ms，50%复极化时间（D50）=20312ms，90%复极化时间（D90）=26514ms，自发电活动频率（HR）=77.752.25beatmin-1（见表 1）。表 1 普罗帕酮对豚鼠左心室流出道自律细胞的电生理影响 注：*P0.05 vs control;*P0.01 vs control3 讨论我室近年来通过对左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞的电生理活动研究发现，豚鼠主动脉前庭慢反应自律细胞动作电位 0 相、4 相去极离子流及复极离子流与窦房结起搏细胞相似，Ca2+内流为其 0 相主要离子流，其 4 相自动去极化过程有 ICaL 和 ICaT，If 在起搏电流中可能也起一定作用5，而普罗帕酮是一种钠通道阻滞药，其电生理效应是抵制钠离子内流，轻度钙离子通道阻滞6。在离体动物心肌的实验结果指出，0.51g/min 时可降低收缩期的去极化作用，因而延长传导。动作电位的持续时间及有效不应期也稍有延长，并可提高心肌细胞阈电位，明显减少心肌的自发兴奋性。普罗帕酮治疗室上性心动过速的电生理5基础是抑制旁路传导，抑制前向传导强于逆向传导，延长前向不应期，且对房室旁路的前向及逆向传导速度也有延长作用7。其抗心律失常谱广，疗效高，起效快，副作用小，作用持久。所以临床上常用于治疗阵发性室性心动过速、阵发性室上性心动过速、预激综合征伴室上性心动过速及心房扑动或心房颤动的预防。也可用于各种早搏的治疗，并对冠心病、高血压引其的心律失常有较好疗效8，普罗帕酮还有轻度抗交感、降压作用9。我们应用 0.5mol/L 的普罗帕酮灌流后与对正常照组相比，发现左心室流出道自律细胞动作电位 0 幅值（APA）下降（P0.05），HR 下降（P0.01）。用 1mol/L 的普罗帕酮灌流后与对正常照组相比动作电位时程（APD）升高（P0.05），HR 下降（P0.01），与对照组相比均有显著差异。通过本实验我们可以观察到普罗帕酮不仅作用于心房细胞、心室肌细胞，也使左心室流出道自律细胞动作电位发生明显改变，而且观察发现普罗帕酮对左心室流出道自律细胞的电生理作用与对心脏其它细胞的电生理作用基本一致。普罗帕酮可以抑制左心室流出道自律细胞的动作电位 0 幅值，延长动作电位时程，并使自发电活动频率（HR）显著下降，提示普罗帕酮对治疗由左心室流出道（主动脉前庭）慢反应自律细胞异常电生理活动所导致的心律失常有一定疗效。同时本实验也可为临床用药及普罗帕酮药效、药动学的研究打下基础。【参考文献】1 Sato Y,Kato K,Hashimoto M, et al. Localized right ventricular structural abnormalities in patients with idiopathic ventricular fibrillation:magentie resonance imaging studyJ.Heart Vessels,1996,11:1001032 Proclemer A,Basiklonna PT,Slavich GA,et al.Cardiac magnetic resonance imaging findings in patients with right ventricular outflow tract premature contractionJ. Em Heart J, 1997,18(12):200220103 Chen YJ ,Ge FG. A study of automatic activity and morphology of guineap