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中国畜牧中国畜牧兽兽医学会医学会西南地区西南地区兽兽医病理学分会医病理学分会第五次学第五次学术讨论术讨论会会论论文文集集云南云南昆明昆明目目 录录大肠杆菌对藏鸡的致病性研究1山羊痘的病理形态学观察6山羊痘病变的超微病理学观察11贵州山羊痘的病原学研究与血清学检测16三种不同药性中药制剂对内毒素性肾衰的防治作用及其机理的比较研究22奶牛类乙型肝炎组织病理学观察24内毒素介导的动物急性肾功能衰竭及其发生机理的实验研究26内毒素致兔红细胞膜 ATP 酶活性改变及阳离子 A 的保护作用27抗内毒素治疗研究进展32内毒素的信号转导39细胞凋亡信号转导途径及调控的研究进展44内毒素信号转导机制的研究进展50线粒体与细胞凋亡57针对内毒素的治疗策略62一种全新的感染机制PRION66杂交瘤技术在病理学中的应用73二重 RT-PCR 同时检测 VSV 与 BVDV 核酸76电子显微镜在病理学中的应用81电子显微镜技术在病理学的应用84- 1 -大肠杆菌对藏鸡的致病性研究大肠杆菌对藏鸡的致病性研究纪素玲,强巴央宗,田发益,索朗斯珠,何玛丽(西藏农牧学院牧医系,林芝,860000)摘摘 要要 大肠杆菌病对藏鸡危害比较严重,可发生任何日龄的藏鸡,给西藏养鸡业造成较大损失。该病的发生涉及很多因素,常见的因素有致病因子诱发,多种感染途径感染和机体的抵抗力下降等。本文对藏鸡大肠杆菌的致病性及其感染机理进行探讨,对藏鸡大肠杆菌病提出更合理的防制措施。关关键词键词 藏鸡;大肠杆菌;致病性;感染机理西藏目前约有藏鸡30余万只,由于藏鸡的生产性能低,且善于飞行,大部分饲养户已开始淘汰藏鸡品种。藏鸡肉品质优良,口味极佳,市场前景广阔,但藏鸡的分布范围日益缩小、数量减少,各种疫病经常发生,以致该品种面临灭绝的危险。藏鸡大杆菌病是由大肠埃布氏菌的某些血清型菌株引起的一类疾病,该病的临床症状表现复杂多样,其中最常见的呈急性败血症和卵巢性腹膜炎1,大肠杆菌的血清型众多,西藏各地区流行的血清型不一。常见的01、02、078,但目前已报道的鸡致病性大杆菌血清型有50多个,其中有12个优势致病血清型2常易致病,最易发病于雏鸡,但成年鸡发病也较多。影响发病因素较多,如与致病因子的强弱、感染途径、机体的抵抗力等因素都有很大关系。本文就对藏鸡大肠杆菌的致病性及感染机理进行分析。1藏鸡大肠杆菌病的症状及剖检变化藏鸡大肠杆菌病的症状及剖检变化1.1 急性病例无明显症状而突然死亡,多数病雏脐孔红肿并常破溃,粪便粘稠、黄白色、腥臭。全身衰弱、闭眼、昏睡、垂翅、不愿走动,采食减少或废绝,一般出现症状后 12 天死亡。剖检可见卵黄吸收不良,充满黄绿色稀薄液体,胆囊肿大,质地呈暗红或士黄色,有点、斑条状出血;小肠膨气,粘膜充血,有出血点或出血斑。1.2 藏鸡体温升高 43以上,精神萎靡,缩头闭眼蹲于一边,饮水增多,采食量大减。有的腹泻,排绿色粪,有的发病初期出现打喷嚏、咳嗽、喘嘘等上呼吸道感染症状;随后单侧眼结膜充血,流浆液性眼泪,后期结膜肿胀,结膜严重充血,鼻孔流出大量鼻液。剖检藏病鸡常出现心包炎,肝周炎,腹膜炎,腺胃乳头间及腺胃与- 2 -食道,肌胃交界处有出血点;小肠粘膜炎性充血、出血,心包积液,心外膜有纤维蛋白覆盖物,肝脏充血、肿大、易碎,肝被膜增厚;脾脏肿大,色灰暗;肾肿大;喉头及气管充血,内有粘液;肺呈粉红色或紫红色,气囊混浊,眼睑内有脓性分泌物,鼻内有分泌物堵塞。2大肠杆菌对藏鸡的主要致病机理大肠杆菌对藏鸡的主要致病机理大量研究表明,藏鸡大量杆菌病存在有多种致病因子,较为严重的有毒素、大肠杆菌素、外膜蛋白等,这些致病因子通过不同的机理导致大肠杆菌在机体特定部位异常增殖,并可引起相应的组织损伤,呈现出明显不同的病理变化,病变较严重的是气管气囊、肺、脾、肝、肠等脏器。2.1 粘附作用粘附作用定居因子;也称粘附素,即大肠杆菌的菌毛。致病大肠杆菌须先粘附于宿主肠壁,以免被肠蠕动和肠分泌液清除。定居因子具有较强的免疫原性,能刺激机体产生特异性抗体。但在特定环境下可以致泻,从而引起发病。2.2 毒素的致病作用毒素的致病作用以前人们认为藏鸡大肠杆菌内毒素与致病力无关,但最近实验研究证实,藏鸡大肠杆菌内毒素对鸡有一定的致病作用,可引起藏鸡的组织细胞损伤及生物学效应。如发热、白细胞渗出及白细胞穿越内皮细胞3等 。细菌内毒素的主要成份为脂多糖(LPS) 。LPS 能够激活体内多种细胞成份合成和释放一系列炎性介质,并使机体释放这些内源性生物活性因子表现出内毒素的种种作用,藏鸡大肠杆菌内毒素主要是破坏肠粘膜屏障完整性,从而造成肠源性细菌感染。实验证明,藏鸡大肠杆菌内毒素可增高小血管的通透性,从而引起藏鸡的肠急性炎症,甚至能引起鸡急性死亡,并表现以出血和坏死为特征的出血性和坏死性炎症,结果表明,大肠菌内毒素对藏鸡有不同程度的致病作用。一般情况下,肠毒素分为两类, (1)不耐热肠毒素:对热不稳定,65经 30分钟即失活。为蛋白质,分子量大,有免疫原性。由 A、B 两个亚单位组成,可导致小肠液体过度分泌,超过肠道的吸收能力而出现腹泻。(2)耐热肠毒素:对热稳定,100经 20 分钟仍不被破坏,分子量小,免疫原性弱。在空肠部分改变液体的运转,使肠腔积液而引起腹泻。 2.3 外膜蛋白外膜蛋白- 3 -大肠杆菌的外膜蛋白也是一种致病因子,电泳时发现外膜蛋白约有 4 条带组成,相对分子质量在 3040KD 之间,认为大肠杆菌的外膜蛋白在菌株的致病作用中具有重要意义,并且其有一定的免疫抗原性4,可以加快巨噬细胞对抗原的摄取,激活淋巴细胞的增殖反应,刺激机体体液免疫和细胞免疫,从而抵抗同源菌和异源菌的攻击。3大肠杆菌感染藏鸡的主要途径大肠杆菌感染藏鸡的主要途径大肠杆菌分布广泛,引起机体感染途径有多种方式,致病机理也不尽相同,一般说来主要有以下几种感染机理。3.1 条件性致病菌的感染条件性致病菌的感染作为藏鸡机体正常菌群之一的大肠埃希氏杆菌在正常情况下,它的数量相对稳定,而且对于某些侵入的病原微生物具有拮抗作用5。但当机体受到外界刺激导致机体抵抗力下降或正常菌群失调时,如:支原体病、新城疫、禽流感、传染性支气管炎、传染性法氏囊炎等病毒,数量积累到一定程度时,强毒首先攻击鸡体,使鸡体抵抗力下降;继而强毒在鸡体内发作,出现典型症状。此时,环境中的大肠杆菌,或随强毒之后进入鸡体感染,或待鸡体衰弱后进入鸡体发病。这些构成了机体内大肠杆菌的条件致病菌6,有些血清型大肠杆菌可牢固地粘附于呼吸道、消化道的粘膜上皮上,短时间内大量繁殖,并产生毒素,引起动物腹泻,若侵入血液,则可引起全身败血症。此外,滥用抗生素,肠道条件致病菌可能在抗生素诱导下变成致病力很强的耐药变异菌,引起新的传染病暴发流行。3.2 外源性大肠杆菌的感染外源性大肠杆菌的感染消化道和呼吸道是外源性大肠杆菌侵入机体的门户,同时这些部位又是条件性大肠杆菌定居的场所。 大多数大肠杆菌是非致病性的,但血清型为O1、O2、O35、O78等这些大肠杆菌菌株具有较强的致病性。大肠杆菌从鸡粪中飘逸出来,就有可能落在呼吸道粘膜上,借助菌毛粘
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