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KKME-专业医学搜索引擎 http:/www.kkme.net/半边旗半边旗 5F 对兔耳增生性瘢痕组织的影响对兔耳增生性瘢痕组织的影响作者:陈萍 吴志远 罗少军 汤少明 江黎明 作者单位:广东医学院附属医院整形外科研究所,广东湛江 524001;广东医学院附属医院中心实验室,广东湛江 524001【摘要】目的:观察半边旗 5F 对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法:建立兔耳增生性瘢痕动物模型,21d 时瘢痕局部注射不同浓度(20,40,80 mg/L)的半边旗 5F 或生理盐水,28d 时观察药物对瘢痕增生指数(HI)的影响及光镜下瘢痕变化情况。结果:各浓度组与生理盐水对照组以及各浓度组之间 HI 差异均有显著性意义 (P0.01);其瘢痕抑制效果与半边旗 5F 浓度呈剂量依赖性关系;光镜下见明显抑制成纤维细胞增殖及降低胶原纤维的含量。结论:半边旗5F 可抑制兔耳增生性瘢痕组织增生。【关键词】 半边旗;增生性瘢痕;动物模型Effects of Pteris Semipinnata 5F on the hypertrophic scar on rabbit earsCHEN Ping,WU Zhiyuan,LUO Shaojun,TANG Shaomin, JIANG Limin(Department of Plastic Surgery, Guangdong Medical College,Zhanjiang 524001, China)【Abstract】 Objective: To observe the effects of Pteris Semipinnata 5F on the hypertrophic scar on rabbit ears. Methods: KKME-专业医学搜索引擎 http:/www.kkme.net/Hypertrophic scars made on rabbit ears were injected with Pteris Semipinnata 5F at concentrations (20, 40, 80mg/L) or saline as control at day 21 started from the scars were made. At day 28 the rabbits were killed to observe hypertrophic index (HI) and morphological change of scars. Results: Compared with the control group, Pteris Semipinnata 5F significantly reduced HI in a dosage dependent manner (P0.05). The proliferation of fibroblast and collagen decreased in the Pteris Semipinnata 5F treated group. Conclusion: Pteris Semipinnata 5F could inhibit proliferation of hypertrophic scars on rabbit ears.【Key words】 Pteris Semipinnata 5F;hypertrophic scar; rabbit增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是现代医学的难题之一,研究上一直没有找到一种令人满意的动物模型。兔耳腹面皮肤全层缺损后产生瘢痕组织类似人皮肤增生性瘢痕1, 这为瘢痕研究提供了一种很好的实验工具。本研究旨在探讨兔耳模型的建立及其半边旗对兔耳瘢痕组织的影响,为瘢痕防治提供实验工具和药物临床应用提供理论依据。1 材料与方法1. 1 材料半边旗 5F,由广东医学院天然药物研究中心提供。1.2 动物新西兰大白兔 24 只,体重 2.32.8 kg, 雌雄兼用,购自广东医学院实验动物中心。KKME-专业医学搜索引擎 http:/www.kkme.net/1.3 实验方法兔适应性喂养 24 h,用氯胺酮肌注麻醉,用量为 1 mg/kg。在兔双侧腹侧分别做 2 个边长为 1 cm 的正方形切口,完整切除全层皮肤,直至软骨膜表面。用灼热铁丝烧灼创缘四周皮肤,创面贴敷创可贴。观察瘢痕形成情况,21d 时将兔随机分为 A、B、C、D 4组,每组 6 只,分别于兔耳瘢痕内基底部及瘢痕灶内注射不同浓度的药物或生理盐水,注射用量为 40L。A 组:注射生理盐水;B、C、D 组分别注射浓度为 20,40,80mg/L 的半边旗 5F。继续喂养,28 d 时,同样在麻醉条件下切取瘢痕组织标本于 4%福尔马林固定,测定瘢痕增生,然后石腊包埋,作苏木素-伊(HE)染色,光镜下检查。1.4 统计学处理对计量资料进行方差分析和 q 检验。2 结果2.1 瘢痕形成情况在兔耳腹侧形成创面后,伤口约 1315 d 后愈合,愈合过程中上皮化时即能触到硬块,此硬块不断高于皮面,淡红色,增生范围不超过原创沿,2022 d 增生到最高峰,厚度约为兔耳腹面皮肤厚度的 3 倍。2.2 瘢痕增生指数(HI)对比情况设定瘢痕的高度(scar height)为 SH,正常的皮肤高度(dermis height)为 DH,则 HI=SH/DH。4 组的 HI 分别为 A 组(99.60.7),BKKME-专业医学搜索引擎 http:/www.kkme.net/组(80.80.3),C 组(63.20.5),D 组(50.00.2),各剂量组与生理盐水对照组以及各剂量组之间 HI 差异均有显著性意义 (P0.01)。2.3 组织切片观察2.3.1 对照组 镜下显示瘢痕组织真皮层明显增厚,为周边正常真皮层厚度的 34 倍,主要是大量成行纤维细胞增殖,胶原纤维多而致密排列混乱,其间有少量炎性细胞,结构近似人的增生性瘢痕组织。2.3.2 用药组 B 组:真皮层厚度约为正常真皮层厚度的2.53.0 倍,成纤维细胞数量较少,胶原纤维致密下降,表层排列规则,呈水平向,内层排列方向似漩涡状。C 组:真皮层厚度约为正常真皮层厚度的 2.5 倍,成纤维细胞数量减少,核较小,胶原纤维致密下降明显,多层水平向排列。D 组:真皮层厚度约为正常真皮层厚度的 2.0 倍,成纤维细胞数量明显减少,核较小,胶原纤维束间有较大的空隙,排列比较规则,呈水平方向。3 讨论严重创伤、烧伤及外科手术后常常遗留增生性瘢痕,影响外观和功能。其发病机理尚未完全明了,也缺乏理想的治疗方法。传统的治疗如手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂和放射疗法等,均因术后易复发或严重的全身性副作用而限制了临床应用2,因此从祖国中医中药中筛选出疗效确切、副作用小的抗瘢痕纤维化的有效药物具有重要的临床意义。目前有关药物防治瘢痕增生的研究已经取得了一定的成绩,但尚无动物本身产生的瘢痕模型,KKME-专业医学搜索引擎 http:/www.kkme.net/这已经成为更深入地研究瘢痕发生、发展及其转归的重大缺憾。本实验成功地建立兔耳瘢痕动物模型,使药物对于瘢痕防治的研究手段有了新的方法。半边旗 5F 对生长增殖的细胞有抑制作用,具有高效低毒的多种体内外抗肿瘤活性3,有研究发现半边旗提取物 5F能明显抑制瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成45。本实验通过半边旗 5F 对兔耳瘢痕动物模型的防治研究,发现半边旗 5F 治疗组真皮层厚度,成纤维细胞数较生理盐水对照组明显减少;胶原纤维致密下降,排列较规则;且治疗组瘢痕增生指数明显低于生理盐水对照组,差异有显著性(P0.01)。本研究结果尚显示,药物治疗组中其瘢痕抑制效果与浓度呈正比,浓度最高者(80 mg/L)效果最显著,结果表明半边旗 5F 对兔耳瘢痕的形成有明显抑制作用。推测其机理可能是半边旗 5F 通过以下途径抑制瘢痕的增生:(1) 直接抑制成纤维细胞的生长增殖,诱导其凋亡,从而减少胶原的合成和分泌;(2) 增加胶原酶产生、增强胶原酶活性,促使已形成的胶原纤维降解和纤维重吸收。半边旗 5F 为中药半边旗中提取的活性成分,其药性作用强,副作用小,有望成为预防和治疗人皮肤增生性瘢痕的有效药物,为此这有待体内实验和临床进一步研究证明。【参考文献】1 MORRIS D E, WU L, ZHAO L L, et al. Acute and chronic animal models for excessive dermal scaring:quantitative studiesJ. Plastic Reconstr Surg, 1997, 100(3):674681.2 商庆新,张涤生,关文祥, 等. 丹参和川芎嗪对成纤维KKME-专业医学搜索引擎 http:/www.kkme.net/细胞生长的体外抑制实验J.中国修复重建外科,1998,12(6):321323.3 张晓,李金华,何承伟,等.半边旗中二萜类化合物的植化及抗肿瘤活性初步研究J.中国药学杂志,1999,34(8):512514.4 张云松,罗少军,汤少明,等.半边旗提取物 5F 对人病理性瘢痕成纤维细胞增殖的影响J.广东医学院学报,2003,21(3): 201203.5 左强,张培华,罗少军,等.半边旗 5F 对瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响J.广东医学院学报,2004,22(6): 205207.可以免费下载论文的浏览器可以免费下载论文的浏览器-文献检索浏览器文献检索浏览器www.wenxianjiansuo.com
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