t 届中回中西部色谱掌术交流会2 0 0 6 年8 月固相萃取反相液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯张媛1 ，周敏2 ，马明广2 ，吴应琴2 ，陈慧扣( 1 西北师范大学地理与环境科学学院，甘肃兰州，7 3 0 0 7 0 = 2 西北师范大学化学化工学院，甘肃兰州，7 3 0 0 7 0 )奠耍：使用W s t e r s l l L B 圃相苹取柱和反相液相色谱法研究了水中邻幕二甲酸二甲蠢( D M P ) 邻苯二甲嚷二乙曩( D B P ) 、邻苯二甲蕞二T( D B P ) 的革取条件和测定方法利用正交试验对革取条件进行了优化。确定最佳圃相萃取条件：洗脱剂为甲尊：乙t ( 1 5 ：8 5 V V ) ，洗脱体积为6 e l , , 洗脱速率为1 0 m L s l n ，清洗刹为甲醇：未( 1 0 ：9 0 ) ，三种郇苯二甲酸膏的革取回收率在7 5 1 一I I I 3 _ 之同色谱峰面积与三种邻苯二甲酸膏类的滚废呈良好的线性关曩( r o 9 9 9 ) 曩低捡出限分别为o 2 4P S L ( 哪) O 5 1 雌L ( D E P ) 和o 1 2 P S L ( D B P ) 棒该法用于水样中三种邰苯：甲酸膏的测定，回收率分别为1 0 3 1 _ ( D E P ) 。1 0 3 8 I ( D B P ) 和9 5 7 - ( M P ) 。：关键词：固相革取；反相液相色谱法：邻苯二甲酸膏邻苯二甲酸酯( P h t h a l i c A c i d E s t e r s ，P A E s ) 是国际上确认的持久性有毒物质( P T s ) 和环境激素，主要用于塑料增塑剂。我国水中优先控制的污染物也包括D E P 和D B P 1 ，2 。此类物质一般难溶于水在水体环境中存在的量极低。分析测定时，首先需要加以富集经典的富集方法液一液萃取法 3 ，但前处理工作繁杂。固相萃取法( S o l i dP h a s eE x t r a c t i o n ，S P E ) 采用高效、高选择性的固定相，利用吸附剂对大体积水样中的有机污染物加以富集 4 3 ，戴树桂用C - 涸相萃取研究了环境水样中邻苯二甲酸酯的富集，得到了较高的回收率 5 。本文主要针对水中D M P 、D E P 、D B P 三种物质采用亲水一亲脂平衡H L B ( H y d r o p h i l i ca n di p o p h i l i cB a l a n c e ) 的固相萃取柱进行样品的预处理，对固相萃取条件、萃取回收率及影响因素及定量测定结果进行了讨论。1 实验部分I 1 仪器与试剂I I 1仪器：W a t e r s 高效液相色谱仪。S H Z 型循环水真空泵( 上海亚荣生化仪器厂) 。W a t e r s O A S I SH L B ( 6 m L ，2 0 0 r a g ) 小柱。S Y Z - 5 5 0 型石英亚沸高纯水蒸馏器( 金坛市正基仪器有限公司) 。D H G 一9 0 3 0 型电热恒温鼓风干燥箱( 上海精宏设备有限公司) I I 2 试剂：邻苯二甲酸二甲酯( D E P ) 、邻苯二甲酸二乙酯( D 肝) 、邻苯二甲酸二丁酯( D B P ) 和甲醇为H P L C级，其余试剂均为分析纯，无水硫酸钠。实验甩水均为新制二次蒸馏水。1 2 试样预处理方法：活化H L B 柱样品的萃取柱子的净化洗脱分析物小柱的再生洗脱液浓缩。最后将洗脱液用高纯氮气流缓慢吹至约0 3 m L ，用甲醇定容，保存待测1 3 分析测试条件：分析的色谱条件为：紫外检测波长为2 5 4 n m ，柱温为3 5 ，进样体积为2 5l lL ，流速为1 0m L m i n 洗脱剂为V ( 甲醇) ：V ( 水) = 8 0 ：2 0 。全部的分析时间为2 0 m i n 。3 1 8首届中国中西部色谱学术交流会2 0 0 6 年8 月2 实验结果与讨论2 1 固相萃取条件2 2 1 洗脱剂及洗脱体积的选择洗脱剂的选择是影响固相萃取回收率的主要因素之一，实验选择使用甲醇和乙醚的混合溶剂进行洗脱。根据甲醇和乙醚在不同体积比( 分别为5 ：9 5 、1 5 ：8 5 、1 0 ：9 0 ，甲醇：乙醚( V ：V ) ) 时得到的萃取回收率，可得出当选择的洗脱剂组成为V ( 甲醇) ：V ( 乙醚) “ - 1 5 ：8 5 时三种邻苯= 甲酸酯的回收率都较高。同时洗脱体积也对萃取效率有较大的影响，不同的洗脱体积( 分别为6 m L 、9 m L ，1 2 m L )对回收率的影响不同，当洗脱体积为6 m L 时洗脱效果较好，回收率最高。2 2 2 洗脱速率的影响洗脱速率是影响回收率的另一个重要因素。本实验考察了三种不同的流速( 分别为0 5 m L m i n 、1 0 m L m i n 、2 0 m L m i n ) 下的回收率，结果表明，洗脱速率为1 0 m L m i n 时洗脱效果较好，回收率最高。2 2 3 清洗剂的选择三种邻苯二甲酸酯的辛醇一水分配系数( 1 ) 分别为：4 0 7 4 ( D M P ) ，2 3 9 8 8 ( D E P ) ，和2 8 1 8 3 8( D B P ) 【6 】，可见D M P 的极性最强，D B P 的极性最弱，所选的清洗剂应该能够将极性比D M P 强的杂质洗下，保留住D M P 和极性比D M P 弱的待测物，因此实验中选择甲醇和水作清洗剂。依据甲醇与水的体积比分别是0 ：1 。5 ：9 5 和1 0 ：9 0 时的三种邻苯二甲酸脂的萃取回收率，最适宜的清洗剂组成为v ( 甲醇) ：v ( 水产1 0 ：9 0 。2 2 4 固相萃取条件的优化综合考虑上述四个因素对回收率的影响，本文设计了四因素三水平的正交试验，根据表1 ( 如下图所示) 中极差R 的大小分析可以看出，洗脱速率对三种酯的影响均最大，洗脱剂的影响最小。因此选择的固相萃取的最佳条件是：洗脱速率为1 0 m L m i n ，洗脱体积为6 m L ，清洗剂组成为V ( 甲醇) ：1 I r ( 水) = 1 0 ：9 0 ，洗脱剂组成为V ( 甲醇) ：V ( 乙醚) = 1 5 ：8 5 ，即保证了较高的回收率，又使萃取能在较短的时间内完成。裹 P A E s 正交试验极麓识) 优化分析结果r，I一，、1一页几一，0一一。，。，久，田1 邻苯二甲酸混标的液橹色谱粗3 1 9首届中圜中西部色谱掌术交流会2 0 0 6 年8 月2 4 回归方程和检出限取一系列不同浓度的混合标准系列溶液，每一样品进样2 5l lL ，平行测定3 次，以峰面积Y 对浓度x 进行线性回归，回归方程和相关系数见表2 。2 5 方法的精密度和回收率 取水样1 L ，按固相萃取的最佳条件做3 次平行实验，结果见表3 。3 种邻苯二甲酸酯的回收率分别是：D E P 为1 0 3 1 ，D B P 为1 0 3 8 ，D M P 为9 5 7 ，相对标准偏差在0 3 6 0 0 - 2 1 之间。囊2P A E e 的回归方程检出l i l t3 小结以W a t e r sH L B 固相萃取柱反相液相色谱法用于萃取水中3 种邻苯二甲酸酯类环境激素的研究表明，在洗脱荆为甲醇：乙醚( 1 5 ：8 5 ，v v ) ，洗脱速率为1 0 m L m i n ，洗脱体积为6 0 m L ，清洗剂为 甲醇：水( 1 0 ：9 0 ，V v ) 的萃取条件下，3 种物质的回收率都较高，回收率分别为在1 0 3 1 ( D E P ) 1 0 3 8 9 6 ( D B P ) 和9 5 7 ( D M P ) 同时这种方法在实验中样品和溶剂用量少、重现性好，可应用于痕量物质定量的前处理分析。参考文献：C l 】昊邦灿费龙现代环境监测技术 M 】北京t 中国环境科学出版杜，1 9 9 9 【2 藏天有周文教水和废水中酞酸酯的测定中囱环境科学r1 9 9 4 1 4 ( 2 ) t8 5 - 8 9 I S 韩关根，吴平谷J 王惠华等邻苯二甲酸酯对城市供水的污染及现行水处理工艺净化效果的评价 J 】环境健康杂志2 0 0 1 ，1 8 ( 3 ) l1 5 5 - 1 5 6 【4 】壬超荚，李碧芳环境中邻苯二甲酸酯样品前处理研究进展 J 】贵州教育学院学报( 自然科学) 2 0 0 4 - Z 5 ( 2 ) t5 2 5 4 5 】戴树桂，张东海。张仁江笱固相萃取技术预富集环境水样中邻苯：甲酸醢C J 】环境科学2 0 0 0 2 1 ( 2 ) t6 6 - 6 9 【6 】C h 盯I 嚣AS 恤币I 嚣D e n B i sRP e 缸e l 蛳，T h o m a sFP a r k e r t o n 就越1 ke n v i r o m m m m lf a t eo f 曲t h l I 哟e 呶髓l - l i r aa ! v i e w P l C 咖p I l e 嘻l 盼7 3 5 ( 4 ) l6 6 7 - 7 4 9 3 2 0