醛( 2 5 ) 1 5 m i 。一2 3 法莫替丁甲壳胺最佳配比的确定法莫替丁与甲壳胺的质量比为2 ：3 ，3 ：3 ，4 ：3 ，5 ：3 采用前面优化的制备工艺，制得号微囊7一般来讲，为保证药物浓度，希望微囊中载药量越多越好，但同种微囊中F a m o t i d i n e 含量增多，甲壳胺的含量减少，其缓释效果也相对下降，当P a m o t i d i n e ：甲壳胺4 ：3 时缓释作用较5 ：3 时好，甲壳胺为2 ：3 、3 ：3 时因微囊含药量较少，突破效应相对较强，缓释部分较少，总的来说缓释效果没有4 ：3 时理想，因此综合考虑，为保证微囊最大载药量，同时保证微囊较好的缓释效果，我们选择F a m o t i d i n e ：甲壳胺- - - 4 ：3 为最佳配比：。13 结论；采用悬浮一交联法制备F a m o t i d i n e 甲壳质衍生物微囊的最佳制各工艺条件为：苯6 3 m i 、3 P V A 水溶液6 9 、3 _ 9 6 的甲壳质衍生物乙酸水溶液( 含4 F a m o t i d i n e ) 1 5 9 、搅拌速度为8 0 0 r m i n 、悬浮一交联时间为1 O 5 h ：F a m o t i d i n e ：甲壳胺- - - - 4 ：3 的比为两者的最佳配比。( 参考文献略)一海洋硫酸多糖9 1 1 ，9 1 7 电泳行为的研究王远红吕志华赵蛱李春林徐家敏( 青岛海洋大学药物与食品研究所2 6 6 0 0 3 )9 1 1 、9 1 7 是海洋多糖类化合物，分子量分布较宽的线形分子，属于低分子类肝素物质。实验已经表明分子量与其生物活性和生物利用度密切相关，分子量范围的分布直接影响其在生物体内的生物活性和生物利用度。因此，测定9 1 1 、9 1 7 分子量范围大小和分子量的分布情况意义极其重要。9 1 1 、9 1 7 以聚阴离子钠盐的形式存在，其分子本身在一定p H 值水溶液中解离而带电，能在电场的作用下向一定的方向泳动。本实验采用醋酸纤维膜电泳法对9 1 1 、9 1 7 的电泳行为进行了研究并与肝素的电泳行为进行了对比：并对P A G E 法初步测定9 1 1 、9 1 7 分子量的分布进行研究的探讨。1 材料1 1 样品9 1 1 、9 1 7 ( 青岛海洋大学药物与食品研究所提供)1 2 标准品C l i v a r i n ( 4 5 0 0 ) ，肝素( 8 0 0 0 ) ，硫酸葡聚糖( 1 3 0 0 0 ) ( 中国药品生物制品检验所提供) 。1 3 试剂硼砂，氯化钡阿利新蓝，三个羟甲基氨基甲烷( T r i s ) ，过硫酸胺。丙烯酰胺，N N N N7 一四甲基乙二胺( T E M E D ) ，甲叉双丙稀酰胺( B i s ) ，甘油，溴酚蓝，醋酸纤维膜。1 4 仪器B I O - R A D 电泳仪，D Y Y - 3 性电泳槽，卜型竖直电泳槽，V - 1 6 夹心垂直电泳槽。2 实验方法2 1 醋酸纤维膜电泳电极缓冲液的配制：p H 9 0 硼砂缓冲液；电泳条件：电压I O O V ；染色用0 2 的阿利新蓝脱色液：脱色：5 的醋酸溶液。2 2P A G E2 2 1 溶液的配制3 0 丙烯酰胺溶液的：p H 8 8 ，T r i s H C l 分离缓冲液，p H 6 8 。T r i s H C I 浓缩胶缓冲液，p H 至8 8 ，T r i s - 甘氨酸缓冲液，电泳缓冲液：0 0 2 5T r i s O 1 9 2 m o l L 甘氨酸p H _ 8 ，加水至1 L 。标准及样品溶液制备 溶于电极缓冲液中。2 2 2 胶溶液的配制，见表1 ，2表1分离胶溶液的配制( m 1 )分离胶浓度1 0 一1 5 2 0 2 4 3 0 9 6 丙稀酰胺1 01 52 04 2分离胶b u f f e r ( p H 8 8 ) 757 57 57 5T 秘E D2222。 1 0 过硫酸胺0 10 10 10 1加水定容至总体积3 03 03 03 0表2浓缩胶溶液的制备( m 1 )胶连度3 0 丙稀酰胺浓缩胶4 0 16 1 3l 柏b u f f e r ( p H 6 8 ) 删E D l O 1 2 50 12 50 1过硫酸胺加水定容至总体积O 150 11 02 2 3 胶的制各将分离胶混合后到迸制胶槽，水封，静止1 S t a i n ，然后放置3 0 4 0 的温箱中凝胶1 h 。浓缩胶混合后到入制胶槽，插入梳子，3 0 4 0保存，第二天使用。2 2 4 上样2 0 pg ，进行电泳。2 2 5 染色与脱色用0 2 的阿利新蓝水溶液染色4 0 m t n ，5 的醋酸水溶液脱色1 2 h 。3 结果与讨论3 1 醋酸纤维膜电泳从电泳结果来看，9 1 1 R f 值0 8 5 ，9 1 7 R f 值0 9 6 ，C l i v a r i nR f 值1 0 2 ，与肝素有着相似的电泳行为，均为肝索类物质。醋酸纤维膜是化学惰性的，能将对流减到最小，用这一介质分离原理主要是基于物质的电荷密度，可以用于物质的定性研究。电泳时间的长短和电压的高低，对肝素类物质在醋酸纤维膜电脉中影响巨大，斑点形状时有不规则现象。染色时阿利新蓝中加入乙醇，对9 1 1 、9 1 7 起着的固定作用。3 2P A G E3 2 1 分离条件选择通过实验结果表明，提高交连度的浓度分离多糖时染色带明显延长。凝胶浓度2 0 交连度2 6 ，与凝胶浓度1 5 交连度4 时的分离效果相当。综合凝胶浓度，凝胶交联度，电压高低，样品浓度，上样体积，染色条件，等因素，选用如下条件：凝胶浓度1 5 ，凝胶交联度4 电压1 8 0 V ，样品浓度l m g m 1 ，上样体积1 0 ul ，0 2 阿利新蓝染色1 小时，标样l m g m l ，测分子量分布。3 2 2 电泳P A G E 使带电的离子在电场的作用下定向移动，电荷与分子的大小就决定了分子的泳动速率和距离。提高不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳系统的分离胶浓度，对分子量大的分子阻力增大，移动速度和距离均减小，而对小分子影响小，从而可以使酸性多糖分子在电场与凝胶分子筛的作用下实现分离9 1 1 、9 1 7 在一定的p H 溶液中进行电泳，使其分离。同时用已知分子量的肝素作为参照物。通过肝素与9 1 1 、9 1 7 出现的位置，初步测定了分子量的分布。51 4 l凝胶电泳分离多糖，不同于电泳分离蛋白质。蛋白质分离带是不连续的，而多糖分离获得的带大部分是连续的，说明多糖分子量分布是连续的；多糖分离带随凝胶浓度的提高而延长，而随电压的增高带变化却不明显，说明P A G E 中分子大小是决定移动距离的主要因素，而分子自身带的电荷影响小；第三条带是C 1 i v a r i n 的带，C l i v a r i n 的分子量大约是4 5 0 0 ，分子量最小，出现在最前( 下)端。分子量越小移动的距离越大，凝胶浓度越大，移动距离越小，移动距离与电压相关性小；第一条带9 1 1 与第四条带肝素，第五条带硫酸葡聚糖分布范围相差不大，在二者之间，与实C 1 i v a r i n 相似，亦符合其分子量分布范围。通过电泳方法的研究可以看出：用醋酸纤维膜电泳测定电泳R f 值可以对硫酸多糖进行定性鉴别；P A G E 方法进行分子量测定。顶空气相色谱法测定。9 1 6 ”中溶剂残留吕志华王远红赵峡夏蕴秋徐家敏( 青岛海洋大学海洋生物与食品研究所2 6 6 0 0 3 )“9 1 5 ”是一种以海洋甲壳质为原料，经分子修饰引入有效基团而获得的类肝素新药，具有很好的抗动脉粥样硬化的作用。用于制备工艺中使用乙醇、丙酮这两种有机溶剂，故应对此两种溶剂的残留量进行检测。药物中的残存溶剂一般采用气相色谱法分析，常见的方法是水溶液直接进样法，这种方法操作简便，重现性好，但灵敏度较低，且样品会污染进样口及色谱柱。本文分别采用水溶液顶空分析和固体项空分析两种顶空气相色谱法，以正丙醇为内标物，测定了“9 1 6 ”中的溶剂残留，避免了样品对色谱柱的污染，而且方法的灵敏度高，简单快速，测定结果令人满意1 仪器与试药1H P 5 8 9 0 气相色谱仪( 美国惠普) “9 1 5 ”样品( 由青岛海洋大学海洋药物与食品研究所提供) ，乙醇丙酮、正丙醇均为分析纯。2 方法与结果2 1 色谱条件色谱柱：A C 一2 0 毛细管柱( 0 3 2 m m X 3 0 m ) ；柱温：7 0 ：进样口及检测器温度：1 8 0 ；氢火焰离子化检测器( F I D ) ；载气为氮气对照品及样品的图谱见1 4 2