福建疑n第三屉海洋生物高技术纶坛2 0 0 5 嬲1 9 2 3油茶皂甙对南美白对虾生长和肉质作用+詹勇4 ，黄磊，张艳秋，许梓荣4浙江大学动物科学学院，杭州，3 1 0 0 2 9摘要：选取同一放养批次健康南美白对虾，随机分为6 组。其中1 组为空白对照组，饲喂基础饲料；其余5 组为油茶皂甙组，分别饲喂添加7 5 、1 5 0 、3 0 0 、6 0 0 和1 2 0 0 m g k g 油茶皂甙试验饲料。每组设3 个重复，每个重复4 0 尾，平均体重为4 8 5 0 3 9 9 ，进行3 5 天的养殖试验。结果表明：饲料中添加1 5 0 m g k g 油茶皂甙组南美白对虾成活率比空白对照组提高1 7 4 9 ( P 9 8 样品制备：样品经绞碎混匀后，准确称取1 9 ，置1 0 m L 玻璃匀浆器中，用1 5 m L3 5 高氯酸溶液分3 次匀浆，匀浆液转入离心管中，并用少量3 5 高氯酸洗涤匀浆器，洗液并入离心管中，以3 5 0 0r m i n 离心1 0r a i n ，吸取上清液，沉淀物用3 5 m L3 5 高氮酸溶液再洗涤、离心，合并两次上清液作为提取液。用0 5 m o l LN a O H 溶液调提取液至p H = 6 5 ，用水定容至5 0 m L ，摇匀。移取l m L ，用水稀释至1 0 m L ，过0 4 5 I _ t m 滤膜，分离柱经流动相平衡】h 后，取标准系列T 作液及样品提取液各1 5 血上色谱柱。样品测定：洗脱液流最2 m l m i n ，记录仪低速0 5 c m m i n ，检测器波长为2 5 4 n m ，检测器满刻度吸光值A 调至0 1 0 。用洗脱液平衡分离柱约3 0 m i n s ，有进样器注入混合标准工作液，从色谱图上得到每一组分的保留时间和峰面积，计算出响应因子，F = c A ( F 为响应因子，A 为其组分的峰面积，C 为该组分已知浓度) 。再注入待测样品，以峰面积乘相应的响应因子，求出此组分的浓度，再经计算求出样品中的含星( m g g ) 。肌肉丙二醛( M a l e i cD i a i d e h y d e ，M D A ) 测定主要仪器：紫外光可见光分光光度计( 北京产)T U 1 9 0 0样本处理：取肌肉O 5 克，用5 m l 的冰冷生理盐水漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入小烧杯中。用移液管景取0 8 6 冷生理盐水，其体积总量应该是组织块重最的9 倍，用2 5 6摄建覆n第三届海洋生物高技术论坛2 0 0 5 0 8 1 9 2 3移液管取总量2 3 的生理盐水于烧杯中，用小剪刀尽快剪碎组织块。将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，冉将剩余的1 3 的冷生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块，一起倒入匀将管中进行匀浆。浆制备好的匀浆液用普通离心机3 0 0 0 r r a i n 左右离心1 0 1 5 分钟，取离心后的上清液进行测定。5 3 2 n m ，1 c m 光经，测O D 值。样品测定：按南京建成生物工程研究所试剂盒进行。肌肉中胆固醇( c h o l e s t e r o l ，C H o ) 含量测定称取样品0 2 9 ，加入5 m ! 氯仿：甲醇= 2 ：1 ，匀浆。匀浆液3 0 0 0 9 离心1 0 m i n ，取上清液2 m l在6 5 水浴中用N 2 吹干，残渣中加入1 0 m l K O H 一醇溶液( 1 2 K O H 用9 0 乙醇新鲜配制) ，在8 0 水浴中皂化1 5 m i n 。皂化完毕，取出试管，加5 m l 蒸馏水，冷却到室温。非皂化部分用1 0 m l 乙烷提取，静置分层后取5 m l 乙烷提取液在6 5 水浴中用氮气吹干。然后用宁波慈城生化试剂厂提供的试剂盒在紫外可见分光光度计上测定，5 0 0 n m ，l c m 光经，测O D 值。1 3 试验数据处理( E x p e r i m e n t a ls t a t i s t i c a la n a l y s i s )本次试验数据处理均采用E X C E L 和S A S 6 1 2 软件。2 结果2 1 油茶皂甙对南美白对虾生长性能作用在饲料中添加汕茶皂甙，通过养殖试验测定2 8 日龄南美白对虾成活率( s u r v i v a lr a t e ) 、增重率( w e i g h tg a i nr a t e ) 、特定生长率( s p e c i f i cg r o w t hr a t e ) 。在饲料中添加适最油荼皂甙具有提高南美白对虾成活率、增重率和特定生长率的作用( 见表2 、3 、4 ) 。饲料中添加1 5 0 m g k g 油茶皂甙，南美白对虾成活率比对照组提高1 7 4 9 ( P 0 0 5 ) ，重率比对照组提高2 6 3 6 ( P 0 0 1 ) ，特定生长率比对照组提高2 3 0 8 ( P 0 0 1 ) ；饲料转化率比对照组提高3 3 1 4 ( P 0 0 1 ) 。蛋白质效率比对照组提高3 4 2 1 ( P 0 0 5 ) 。但油茶皂甙在高剂量时，虾饲料转化率和蛋白质效率有降低趋势。表2 油茶皂甙对南美白对虾成活率影响T a b l e2 E f f e c to fs a s a n q u a s a p o n i no ns u r v i v a lr a t ei nP e n a e u sv a n n a m e iS Q S l 、2 、3 、4 、5 分别代表添加7 5 、1 5 0 、3 0 0 、6 0 0 、1 2 0 0 m g k g 油茶皂甙。同列肩注硝i 同小写字母者，差异显著( P O 0 5 ) ；同列肩注不同大写字母者，差异极显著( P 0 0 1 ) 。2 5 7表3 油茶皂甙对南荚白对虾增重率影响T a b l e3 E f f e c to fs a s a n q u a s a p o n i no nw e i g h tg a i nr a t e ( W G R ) i nP e n a e u sv a n n a m e ing组别初重( g )终重( )增重率( )G r o u pi n i t i a lw e i g h t ( g )u l t i m aw e i g h t ( g )W G R ( )对照组 94 9 8 o 4 56 2 1 4 - - 0 5 72 4 5 1 1 6 7 A aC o n t r o lS Q S 194 9 0 5 ：0 6 46 2 6 0 6 52 9 8 5 2 6 5 ”S Q S 294 6 3 5 ：0 4 96 0 6 5 ：0 6 93 0 9 7 5 ：3 0 8 “S Q S 394 6 2 士0 1 95 8 7 0 2 02 7 2 6 2 7 9 “S Q S 494 8 1 5 ：0 4 36 0 9 士0 4 62 6 6 8 5 ：1 6 3 6 4 0S Q S 594 9 5 5 ：0 2 26 2 8 _ + 0 1 92 7 0 0 2 1 4 “”沣：1 S Q S 1 、2 、3 、4 、5 分别代表添加7 5 、1 5 0 、3 0 0 、6 0 0 、1 2 0 0 m g k g 油茶皂甙。2 同列肩注q i 同小。写字母者，差异显著( P O 0 5 ) ：同列肩注小同大写字母者，差异极显著( P ( o 0 1 ) 。表4 油茶皂甙对特定生长率、饲料转化率、蛋白质效率影响T a b l e4E f f e c t so fs a s a n q u a n s a p o n i no ns p e c i f i cg r o w t hr a t e ，f e e dc o n v e r s i o nr a t i o ，p r o t e i ne f f i c i e n c yr a t i oi nP e n a e u sv a n n a m e i组别特定生长率( )侧料转化翠( )篮口J 页嫂译L G r o n o s“SGR()PCR()PER()对照组C o n t r o l90 7 8 0 0 5 舳1 5 2 1 1 8 8 舢0 3 8 5 ：0 0 5 ”S Q S l9O 9 3 5 ：0 0 7 劬。18 3 5 5 ：1 6 6 舭0 4 6 ：0 0 4 A S Q S 一290 9 6 _ - K ) 0 8 胁2 0 2 5 士1 9 5 卧0 51 0 0 5 肋S Q S 一390 8 6 士0 0 8 ”16 6 6 2 4 7 陆0 4 2 士0 0 6 8 “S Q S 一490 8 3 5 ：0 0 3 8 “16 7 0 o 6 58 ”0 4 2 0 0 2 脚S Q S 一59O 8 8 _ - - 0 0 6 ”1 7 5 6 士1 8 4 ”0 4 4 0 0 5 “注：1 S Q S ，1 、2 、3 、4 、5 分别代表添加7 5 、1 5 0 、3 0 0 、6 0 0 、1 2 0 0 m g k g 油茶皂甙。2 同列肩注4 i 同小。弓字母者，差异鼹著( P o 0 5 ) ：同列肩注4 i 同火写字母者，差异极显著( P 0 叭) 。2 2 油茶皂甙对南美白对虾肌苷酸影响2 5 8虾肉中肌苷酸含量测定结果见图1 董嗣卤。囱X | t 照组S O S - IS O S 一2S O S 一：3S O S 一4S O S 一5注：S Q S 一1 、2 、3 、4 、5 分别代表添加7 5 、1 5 0 、3 0 0 、6 0 0 、1 2 0 0m g k g 油茶皂甙组。图1 油茶皂甙对南美臼对虾肌苷酸影响F i g u r eIE f f e c to fs a s a n q u a s a p o n i no nI M Pi nP e n a e u sv a n n a m e i福建霞门。第三届海洋生物高技术论坛2 0 0 5 0 8 1 9 - 2 3图1 表明，添加3 0 0 m g k g ( 3 1 8 o 4 8 ) 、6 0 0 m g k g ( 2 9 9 _ + 0 1 9 ) 、1 2 0 0 m g k g ( 3 2 3 _ + 0 2 3 )油条皂甙，南美白对虾肌苷酸含量分别比对照组( 2 2 2 _ - 田4 1 ) 提高4 3 2 4 ( P O 0 1 ) 、3 4 6 8 ( P 0 0 1 ) 、4 5 5 0 ( P 0 0 1 ) ，随油茶皂甙添加量增加油茶皂甙组肌苷酸含量呈上升趋势。2 3 油茶皂甙对南美白对虾胆固醇影响虾肉中胆固醇测定结果见图2 。一如b o目虢 匦C 丑1对H 强组S Q S lS Q S 一2S Q S 一3S ( j S 一4S Q S 一5注：S Q S 一1 、2 、3 、4 、5 分别代表添加7 5 、1 5 0 、3 0 0 、6 0 0 、1 2 0 0m g k g 油茶皂甙组。图2 油茶皂甙对南美白对虾胆周醇影响F i g u r e 2E f f e c to fs a s a n q u a s a p o n i nO i lC H Oi nP e n a e u sv a n n a m e i结果表明，油茶皂甙对南美白对