第2 4 卷增刊分析测试学报v 。，】2 4 1 竺! 兰! ! ! ! 型! ! ! 里! ! ! ! ! ! ! ! ! ! 竺! 兰! ! ! 竺! 型! ! ! ! ! 坚竺墼! ：! 竺!牛蒡苷元及代谢产物的傅立叶 变换离子回旋共振质谱研究赵宇峰1 ，于湛1 ，刘志强1 ，服部征雄2 ，刘淑莹“( 1 中国科学院K 春应用化学研究所新药研究实验室，长春质谱中，I i ，吉林妊春1 3 0 0 2 2 ；2 日本富山医科药科大学和汉药研究所药物代澍实验室，富山9 3 0 0 1 9 4 )1 9 8 0 年在人和哺乳动物中发现了2 种木脂素类化合物肠二醇、肠内酯。因其化学结构相似于雌激素，并在生理上起着弱的雌激素和抗雌激素的作用，被称为植物雌激素。研究证明，牛蒡苷和牛蒡苷元可被人和动物摄人后，在肠道菌丛的作用下形成肠内酯1 。2 j 。它们可影响人的生理功能，在老年性疾病如：冠心病、乳腺癌、前列腺癌、骨质疏松和更年期综合症上有一定的预防和治疗作用。我们以牛蒡苷元为底物建立肠内细菌的生物转化模型，从人的肠内细菌中分离出1 个新种细菌，研究其生物转化机理。利用傅立叶变换离子回旋共振质谱仪进行代谢产物的结构表征。1实验部分1 1 主要仪器及装置70T 傅立叶变换离子回旋共振质谱仪：美国I o n S p e c 公司产品，E A N 一1 4 0 厌氧培养箱：1 3 本E s p e c 公司产品。1 2 主要药品及试剂牛蒡苷元及2 一( 3 ，4 - d i h y d r o x y b e n z y ) - 3 一( 3 ”，掣- d i h y d r o x y b e n z y l ) b u t y r o l a c t o n e 对照品：日本富I l I医科药科大学和汉药研究所药物代谢实验室提供；G A M 培养基：日本，1 3 水公司；甲醇为色谱纯，美国，F i s h e rS c i e n t i f i c 公司。1 3 质谱条件电喷雾离子源，源温度8 0c c ，探针温度1 0 0 ，质量范围5 0 5 0 0 ，质量误差经过校正。样品通过注射泵进样，流速1 - L m i n 。负离子模式；离子源喷射电压3 8k V ，鞘气：氮气，碰撞气：氮气，射频电压：9 9 3 6 5v ，窗口宽度：m z1 0 。1 4 样品的肠内细菌的生物转化将含有牛蒡苷元和新种细菌的G A M 培养基在3 7 厌氧培养2 日，T L C 鉴别其代谢程度。该细菌可将牛蒡苷元最终代谢为2 - ( 3 ，4 - d i h y d r o x y b e n z y l ) - 3 - ( 3 ”，4 “ - d i h y d r o x y b e n z y l ) b u t y r o l a c t o n e ，分离、纯化代谢产物，以备结构分析用。2 结果与讨论牛蒡苷元及代谢产物的二级质谱数据见表1 。从7 0T 傅立叶变换离子回旋共振质谱仪对牛蒡苷元及其代谢产物的结构表征可以看出，m z的测定值与理论值的误差在0 0 9 29 6 3 1 9 44 2p p m 之间，小于1 0p p m ，对于准确进行结构推断提供了理论依据。结果表明，肠内细菌对牛蒡苷元的生物转化不是大范围的结构改造，而是对其进行部分结构修饰”j 。从新种细菌对牛蒡苷元的代谢终产物的结构表征来看，其代谢途径与混合肠内细菌的代谢途径“是不同的。新种细菌对牛蒡苷元的生物转化途径及其机理有待于进一步研究。1 2第5 期分析测试学报一擅型一 表1牛蒡苷元及代谢产物的二级质谱数据( 、M Hr 。、艄”一n c “，WM - H - C 0 2 喁”。仉“凡O C H ，M H C 0 2 一C H ，一O H 挑、M H c 仉一C H 3 一O H C H 3娜 良。M HM H C O ,M H C 0 2 一H 2 )M H C ，H 1 0 2 一HM H C 7 H 7 0 2 一H C 0 13 7 l 1 5 04 23 5 61 2 65 23 2 71 5 99 33 1 2 1 3 64 22 9 51 3 38 42 8 01 1 08 43 2 9 1 0 28 32 8 5 1 1 28 92 6 71 0 25 52 0 7 0 6 58 31 6 30 7 58 93 7 1 4 94 6 4 8 83 5 61 2 59 8 973 2 7 1 5 96 3 53 83 1 21 3 6 1 6 022 9 5t 3 34 2 0 3 92 8 01 0 99 4 52 13 2 91 0 25 1 45 22 8 51 1 26 8 50 22 们1 0 2 1 2 0 1 52 0 7 0 6 57 3 46 61 6 30 7 59 0 51 620 5 73 4】4 8 90 809 0 05 40 8 3 23 3I4 2 l7 631 9 44 20 9 5 86 10 7 1 89 416 0 93 10 4 6 04 30 0 9 29 6c - ，H 1x l M H c 1 2 H I3 0 41 0 90 2 91 91 0 9 0 2 89 5 482 5 72 3参考文献： 1 H E I N O N E NS ，N U R M IT ，L I U K K O N E NK ，e ta 1 I nV i t r oM e t a b o l i s mo fP 1 tL i g n a I l s ：N e wP r e c u r s o f s0 fL i g “8E n t e r o l a e t o n ea n t E n t e r o d i 0 1 JA g i cF o o dC h e m ，2 0 0 1 ，4 9 ：3 1 7 8 3 1 8 6 ( 2 X i EL H ，M i NEM ，Ha 1 T r a s f o r m a t i o no fA r c t i i nt oE s t r o g e n i em AA n t i e 帅铲n i eS u b s t a n c e sb yH u m a nl r L t e s t i n a IB a c t e r i a C h e mP h a mB u l l ，2 0 0 3 ，5 1 ( 4 ) ：3 7 8 3 8 4 S t u d yO i lA r c t i g e n i na n dP r o d u c t i o no fM e t a b o l i t e sb yF F I C RM SZ H A OY u - f e “9 1 ，Y UZ h a n l ，L I UZ h i q i a n g ，H A T F O R IM A S A 0 2 ，L I US h u y i n g “r 1 C h a n g e h u n l n s t i t u l eo f A p p l i e dC h e m i s t r y ，C h i n e s eA c a d e m yo f S c i e n c e s ，C h a n g e h u nC e n t e ro f M a s sS p e c t r o m e t r yC h a n g c h u n1 3 0 0 2 2 C h i n a ；2 I n s t i t u t eN a t u r a lM e d i c i n e T o y a m aM e d i c a la n dP h a r m a c e u t i c a lU n i v e r s i t y ，J a p a n )A b s t r a c t ：T r a n s f o r m a t i o no f A r e t i g e n i nt 0 2 - ( 3 ，4 - d i h y d r o x y b e n z y l ) - 3 一( 3 ”，4 ”一d i h y d r e 。x y b e n z y l ) b u t y r o l a c 。t 。n eb yH u m a nI n t e s t i n a lB a c t e r i aT h ea n a l y s i so fc 。n f i g u r a t i 。np e r f o r m e de x p e r i m e n t 。n7 0T e s l aU h i m a( 1 0 n S p e c 1 r v i n e ，C A ，U S A ) F o u r i e rt r a n s f o r mi o nc y c l o t r o nr e s o n a n c e ( 丌I C R ) M a s ss p e c t r o m e t e r -K e yw o r d s M a s ss p e c t r o m e t r y8 t u d yo nA r c t i g e n i n ；F o u r i e rt r a n s f o r mi o nc y c l o t r o nr e s o n a n c e ( F T I C R )