盐酸小檗碱检验操作程序 编号：QC-YJ-025- 04浙江泰康药业集团有限公司 第/4 页盐酸小檗碱检验操作程序目 的：建立一个盐酸小檗碱检验操作程序,以规范操作。范 围：适用于盐酸小檗碱的质量检验。责任人：化验员、QA 检查员。程 序：检验依据：中国药典2010 版二部第 639 页和企业标准。简述：本品为5，6-二氢-9，10-二甲氧苯并g-1，3-苯并二氧戊环5，6-喹嗪盐酸盐二水合物。1、性状：本品为黄色结晶性粉末；无臭，味极苦。本品在热水中溶解，在水中或乙醇中微溶，在三氯甲烷中极微溶解，在乙醚中不溶。2、鉴别2.1、仪器与用具：天平、电炉、移液管、红外分光光度计、量筒、试管。2.2、试剂：氢氧化钠试液、漂白粉、稀盐酸、丙酮、硝酸、硫酸、5%没食子酸的乙醇溶液。2.3、操作2.3.1、取本品约 0.1g，加水 10ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液 4滴，放冷（必要时滤过） ，加丙酮 8 滴，即发生浑浊。2.3.2、取本品约 5mg，加稀盐酸 2ml，搅拌，加漂白粉少量，即显樱红色。2.3.3、本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 320）一致。2.3.4、取本品约 0.1g，加水 20ml，缓缓加热溶解后，加硝酸 0.5ml，冷却，放置 10 分钟，滤过，滤液显氯化物的鉴别反应。2.3.4.1、取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复编写人编写日期文件编号QC-YJ-025-04部门审核人审核日期颁发部门质量部质量部审核人审核日期颁发日期批准人批准日期生效日期分发部门档案室、质量部、中心化验室盐酸小檗碱检验操作程序 编号：QC-YJ-025- 04浙江泰康药业集团有限公司 第/4 页生成。如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。2.3.4.2、取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使用水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。3、检查3.1、有关物质：取本品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每 1ml 中含 1mg 的溶液，作为供试品溶液；另取盐酸药根碱对照品和盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每 1ml 中含 0.1mg 的溶液，分别作为对照溶液（1）和（2） ；精密量取供试品溶液 2ml 和对照品溶液（1）和（2）各 10ml，置 100ml 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；取对照品溶液（2）1ml，用供试品溶液稀释至 10ml，摇匀，作为系统适用性试验溶液。照高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以 0.01mol/L 磷酸二氢铵溶液（用磷酸调节 pH 值至 2.8）-乙腈（75：25）为流动相，检测波长为 345nm。取系统适用性试验溶液 10l，注入液相色谱仪，巴马汀峰与小檗碱峰间的分离度应符合规定。另取对照溶液10l，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使小檗碱色谱峰的峰高约为满量程的 25%。精密量取对照溶液与供试品溶液各 10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的 2 倍。供试品溶液的色谱图中，如有与药根碱峰和巴马汀峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，均不得过1.0%；其他杂质峰面积的和不得大于对照溶液中小檗碱峰的峰面积（2.0%） 。3.2、氰化物（合成品）3.2.1、仪器与用具：用砷盐检查法（中国药典 2005 年版二部附录 VIII J）项下第一法的砷测定器。3.2.2、试剂：碱性硫酸亚铁试纸：临用前，取滤纸片，加硫酸亚铁试液与氢氧化钠试液各 1 滴，使湿透，即得。3.2.3、操作：取本品 0.5g，依法（第一法）检查，应符合规定。3.3、有机腈（合成品）3.3.1、仪器与用具：天平、锥形瓶、垂熔漏斗（G5） 。3.3.2、试剂：无水乙醚、胡椒乙腈对照品、氯仿、苯-冰醋酸（25：0.1） 、5%钼酸铵硫酸溶液。3.3.3、操作：取研细的本品 0.25g，置 25ml 具塞锥形瓶中，加无水乙醚5ml，振摇 5 分钟，用垂熔漏斗滤过，用无水乙醚洗涤 34 次（每次 2ml） ，合并滤液与洗液，浓缩至 0.5ml，作为对照品溶液；另取胡椒乙腈对照品适量，加氯仿制成每 1ml 中含 0.1mg 的溶液，作为对照溶液，照薄层色谱法试验，吸盐酸小檗碱检验操作程序 编号：QC-YJ-025- 04浙江泰康药业集团有限公司 第/4 页取对照品溶液 10l 和供试品溶液全量，分别点于同一硅胶 G（厚度 0.5mm）薄层板上，以苯-冰醋酸（25：0.1）为展开剂，展开后，晾干，喷以 5%钼酸铵硫酸溶液，在 105加热 1020 分钟，检视，供试品溶液在与对照品溶液所显主斑点的相应位置上，不得显杂质斑点。3.4、水分3.4.1、仪器与用具：干燥箱、量筒、锥形瓶、电子天平、称量瓶。3.4.2、操作：取本品，照水分测定法测定（100干燥 5 小时） ，含水分不得过 11.0%。3.5、炽灼残渣3.5.1、仪器与用具：电子天平、箱式电阻炉、坩埚。3.5.2、试剂：硫酸。3.5.3、操作：取本品 1.0g，依法检查，遗留残渣不得过 0.2%（提取品）或 0.1%（合成品） 。3.6、重金属（合成品）3.6.1、仪器与用具：电炉、扭力天平、移液管、量筒。3.6.2、试剂：稀盐酸、蒸馏水、酚酞指示液、氨试液、醋酸缓冲液（pH3.5） 。3.6.3、操作：取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（第二法） ，含重金属不得过百万分之二十。1、含量测定4.1、仪器与用具：电炉、电子天平（感量为 0.1mg） 、滴定管、烧杯。4.2、试剂：重铬酸钾滴定液（0.01667mol/L） 、硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L） 。4.3、操作：取本品约 0.3g，精密称定，置烧杯中，加沸水 150ml 使溶解，放冷，移入 250ml 量瓶中，精密加重铬酸钾滴定液（0.01667mol/L）50ml，加水至刻度，振摇 5 分钟，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液 100ml，置 250ml具塞锥形瓶中，加碘化钾 2g，振摇使溶解，加盐酸溶液（12）10ml，密塞，摇匀，在暗处放置 10 分钟，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液 2ml，继续滴定至蓝色消失，溶液显亮绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml 重铬酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于12.39mgC20H18ClNO4.4、结果判断：本品按干燥品计算，含C20H18ClNO4提取品不得少于97.0%，合成品不得少于98.0%。5、微生物限度：按检验操作程序操作，细菌总数不得超过 600 个/g；霉盐酸小檗碱检验操作程序 编号：QC-YJ-025- 04浙江泰康药业集团有限公司 第/4 页菌、酵母菌数不得超过 60 个/g。