1 2 8药物分析杂志C h i nJP h a r mA n a l2 0 0 3 ，2 3 ( 增刊)表2 对同一批号的盐酸环丙沙星片溶出度进行H P L C 法及紫外法测定的五组实验结果的比较紫外分光光度法H P L C 法两组均溶出度均值R S D溶出度均值R S D值之平丝丝 丝丝丝 望塑偏差19 5 1 39 5 7 429 5 2 79 6 0 639 4 5 69 5 0 30 2 79 5 3 19 5 5 10 4 80 2 549 5 1 29 5 6 659 5 0 89 4 7 91 4 2对另两个批号进行如1 2 1 3 的重复操作取另外两个批号的盐酸环丙沙星片如1 2 1 3 操作，测得另两组数据，与前一个批号的数据一起共3 批，分别与相应的紫外分析结果进行比较，分别计算相对平均偏差，结果分别为：0 2 5 ，0 4 4 及0 2 9 ，证明对于各个批号的盐酸环丙沙星片的溶出度的测定，液相与紫外两种分析结果无显著差异。结果列于表3 。表33 个批号的盐酸环丙沙星片溶出度均值测定结果比较2 讨论本实验采用H P L C 法测定环丙沙星片的溶出度，结果稳定，与紫外分析结果之间无显著差异，证明此方法方便可行，结果准确，更为重要的是，它较紫外分光光度法的专属性，特异性强，这一点恰恰是药品检验一直致力于追求的目标。也就是说，它可使作为药品生物利用度监测指标的溶出度测定在特异性方面向前迈进一步，这对药物生物利用度的监测及发展促进具有一定意义。十一酸睾酮胶囊溶出度测定方法的建立王国兰1余立1黄昌顺2穆晓进2王伟2( 1 北京市药品检验所北京1 0 0 0 3 5 ；2 北京蕾波制药厂北京1 0 0 0 7 6 )十一酸睾酮为一雄性激素类药，原主要用于男性性激素分泌不足的替代治疗，如男性性功能低下症。但近来研究发现，这种从体外补充的雄性激素还可抑制精子的生成。由此，十一酸睾酮将起到男性避孕的作用。中国药典2 0 0 0 年版只收载了十一酸睾酮注射液一种制剂。目前也有本品的软胶囊上市，但尚未见到生产十一酸睾酮硬胶囊的报道。本文所报道的十一酸睾酮硬胶囊为北京蕾波制药厂试制的一种新剂型。因本品为口服固体制剂，因此在制定质量标准时设立了溶出度检查项。本品的主成分为水不溶性物质，在乙醇中溶解度也较低，因此不能采用常用的溶出介质作为溶剂。经实验摸索，现建立了以0 2 十二烷基硫酸钠的0 1 m o l L 。的盐酸溶液为溶剂的溶出度检查方法，并进行了方法学验证。结果显示本法具良好的线性、回收率和精密度，可以较好地控制产品的质量。1 仪器、药品与试药Z R S 一8 C 溶出度测定仪( 天津大学无线电厂) ；T U 一1 2 2 1 紫外分光光度计( 北京通用技术公司) ；十一酸睾酮胶囊供试品及对照品( 北京蕾波制药厂提供) ；盐酸、十二烷基硫酸钠均为市售分析纯。2 实验方法的确定2 1 溶出液中十一酸睾酮测定方法初选：参考十一酸睾酮原料的含量测定方法，根据本品在2 4 0 n m 波长处有最大吸收的特点，初步确定本品采用紫外分光光度法测定溶出度，测定液浓度应在1 0 1 x g m l 。左右，以使溶液的紫外吸收值在0 3 0 5 范围内。2 2 溶出介质的选择：本品为普通胃溶硬胶囊，按常规溶出条件，用篮法每分钟1 0 0 转，9 0 0 m l 溶剂量，首先试验溶剂为0 1 m o l L 。1 盐酸。经用上述u V 方法测定，本品在0 1 m o l L 。1 盐酸中超声6 0 分钟溶出量仅为3 ，几乎不溶。后在0 1 m o l L 。盐酸中添加入了不同浓度的十二烷基硫酸钠，经测定溶出曲线筛选，并考察了溶剂背景吸收( 0 0 2 ) ，最后确定在0 1 m o l L 。的盐酸溶液中加入0 2 十二烷基硫酸钠为本品的最佳溶出介质。2 3 检测波长的确定：溶出介质确定之后，经对其进行紫外扫描，吸收图谱显示，其最大吸收峰位已移至2 4 5 n m 波长左右，因此，最后将检测波长调整至2 4 5 n m 波长处。2 4 篮法与桨法的比较：除将装置由篮改为桨外，上述其余溶出及测定条件不变，试验结果两法差距不大，最终确定选用硬胶囊常规首选的篮法。2 5 转速的选择：除将转速使用5 0 r r a i n “和1 0 0 r r a i n 。1 外，上述其余溶出及测定条件不变，试验结果表明5 0 r m i n 。的转速使本品溶出较为缓慢，曲线水平较低，而1 0 0 r m i n 。1 的转速使本品溶出正常，最终确定选用硬胶囊篮法常规首选的1 0 0 r p m 转速。2 6 基本确定的溶出度检查方法：以0 2 十二烷基硫酸钠的0 1 m o l L 。1 的盐酸溶液9 0 0 m l 为溶剂，采用中国药典2 0 0 0 年版溶出度测定二法的装置1 ，转速为每分钟1 0 0 转，经3 0 分钟时取溶出液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用上述溶出介质稀释制成每1 m l 中约含十一酸睾酮1 0 p 。g 的溶液，作为供试品溶液；另精密称取十一酸睾酮药物分析杂志C h i nJP h a r mA n a l2 0 0 3 ，2 3 ( 增刊)1 2 9对照品适量，用乙醇溶解并稀释制成每l m l 中约含0 1 m g的溶液，精密量取适量，用溶出介质稀释制成与供试品溶液浓度相当的溶液作为对照溶液。取上述两种溶液，照分光光度法( 中国药典2 0 0 0 年版二部附录A ) ，在2 4 5 n m的波长处分别测定吸收度，按二者吸收度的比值计算每粒的溶出量。3 方法学验证3 1 线性关系考察取十一酸睾酮对照品约1 0 m g ，精密称定，置1 0 0 m l 量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液2 0 m l 、3 0 w l 、4 0 m l 、5 0 m l 、6 0 m 1 分别置5 0 m l 量瓶中，用同溶剂稀释至刻度，摇匀。在2 4 5 n m 处测定吸收度。以浓度为横坐标，吸收值为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：Y = 0 0 3 3 1 5 X + 0 0 0 3 4 ，r = 1 0 0 0 0 。结果表明十一酸睾酮在4 1 2 t L g m l 。的范围内呈良好的线性关系。3 2 回收率试验按本品的处方，精密称取各辅料适量，再精密称取十一酸睾酮对照品适量，置同一5 0 0 m l 量瓶中，加入3 0 m l 无水乙醇，振摇使主成分溶廨，再用溶出介质稀释至刻度，摇匀，按上述溶出度测定方法进行测定，根据对照品的实测值计算回收率，结果平均回收率为9 8 6 9 ，R S D 为1 3 4 。结果表明方法的准确度符合定量分析的要求，辅料无干扰。3 3 重复性试验在上述回收实验中，9 份回收率测定的R S D 为1 3 4 ，表明方法的重复性良好，符合定量分析的要求。3 4 溶出测定液的稳定性试验取溶出度测定用供试品溶液，在室温下放置，经1 、2 、3 、4 、5 、6 和8 小时时分别测定，结表明溶出测定用供试品溶液在室温条件下8 小时内可保持稳定。3 5 溶出曲线及溶出度均一性试验以0 1 m o l L 1 的盐酸溶液为溶出介质，取十一酸睾酮胶囊，按上述溶出条件及测定方法试验，经下列不同时间时取出溶出液适量，同时补充等温等体积的溶出介质，分别测定其溶出度，结果十一酸睾酮胶囊在5 分钟、1 0 分钟、2 0 分钟、3 0 分钟、4 5分钟和6 0 分钟时6 粒间的溶出率R S D 分别为3 0 5 5 、2 1 3 、4 8 、3 7 I 、3 2 和3 2 ，2 0 分钟以后溶出趋于平稳，溶出均达到9 0 以上，从3 0 分钟至6 0 分钟之间基本为一平台区，3 0 分钟左右为溶出曲线的拐点，所以取样时间定在3 0 分钟。从R S D 值可以看出2 0 分钟后本品的溶出均一性良好。3 6 空白干扰实验：取处方量的空白辅料与供试品同法处理、测定，结果在2 4 5 n m 的波长处吸收度值为0 0 4 ，表明辅料对主成分的测定无干扰。3 7 三批样品的溶出度结果取本品的3 批样品，依上述方法测定，结果三批样品的溶出度分别为1 0 2 5 、1 0 0 2 和1 0 0 5 。参考文献1 中国药典2 0 0 0 二部附录自身对照溶出度测定法在药物分析中的应用余立( 北京市药品检验所1 0 0 0 3 5 )1自身对照溶出度测定法产生的背景随着药物溶出度检查的重要性逐渐被人们所重视，越来越多的口服制剂品种在质量标准中增订了这项检查。1 9 9 5 年版中国药典中有十几个抗生素制剂按经典的溶出度测定模式制订了溶出度检查项。但在经过一段时间的应用之后，渐渐暴露出一些问题，如测定方法的准确度不好，回收率不符合要求，测定结果有时会超过标示量的1 2 0 0 等。经过考察和分析，认为主要原因有两点：一是某些抗生素如大环内酯类抗生素和氨基糖苷类抗生素为发酵生产的多组分抗生素，活性成分不单一，药品由多组分协同发挥药效，通常测定其总体生物活性比测定其化学纯度更有意义且更简便，因此，这类抗生素大多只有标注其生物效价的生物检定用标准品，没有供化学测定用的标注化学纯度的对照品，而二者代表的意义不同，不能通用( 只有当标准品与供试品组分构成完全一致时才可，但这种情况对发酵生产来说几率几乎为零，除非标准品与供试品是同一批发酵产品) 。第二个原因是在经典的溶出度测定模式中，供试品溶液与对照品溶液的溶质溶剂经常不一致，供试品溶液中的辅料有时去除不彻底，特别是需要先衍生显色后测定的品种，辅料干扰时有发生，或者在去除辅料的步骤中主成分又有损失，从而引入较大误差。针对这种现象，在2 0 0 0 年版中国药典中，部分抗生素口服制剂首次应用了自身对照溶出度测定法。2自身对照溶出度测定法的特点与经典的溶出度测定方法相比，该方法有如下特点：用供试品自身( 平均片重量或胶囊内容物平均装量的供试品) 制备对照溶液，而不是用对照品或标准品制备；这样既纠正了用标准品进行化学测定的不科学、不合理现象，