! 里些三堂叁查塑童些妻墨垒兰三_ ! 虽兰垒堡苎叁 氯苯肟唑( S P Rl - w M 0 0 5 ) 的毒理学研究袁莉萍1 周志俊2 曹瑾( 1 上海市农药研究所上海2 0 0 0 3 2 ；张一宾1 陈亮1 栗秀丽12 复旦大学公共卫生学院上海2 0 0 0 3 2 1氯苯肟唑( S P R I W M 一0 0 5 ) 是上海市农药研究所自行设计并研制开发的主要用于防治黄瓜白粉病的结构新型杀菌剂，已获得国家专利公开。田间小区试验也证实了该产品对黄瓜白粉病具有理想的防治效果，目前该药剂已获得农业部农药田间试验批准。我们对该化合物做了第一阶段毒理学研究试验及A m e s 试验，测试方法按G B1 5 6 7 0 1 9 9 5 中华人民共和国国家标准“农药登记毒理学实验方法”进行。1 急性经口毒性试验1 1 样品处理样品( 由上海市农药研究所提供) 用乳化剂配制成试验用液。1 2 试验动物健康s D 成年大鼠，4 0 只，雌雄各半。体重在1 8 0 2 0 0 9 范围内，由复旦大学实验动物部提供。1 3 动物分组动物随机分为4 组，每组动物各1 0 只，雌雄各半。剂量分别为5 0 0 m g k g ，1 0 7 5 m g k g ，2 3 1 1 m g k g 和5 0 0 0 m g k g 。1 4 试验方法动物给药前隔夜禁食( 1 5 小时) ，称重后，按每只动物1 0 0 9 体重给l m l 灌胃量给药次，然后观察并记录动物的急性中毒症状和死亡情况，连续观察二周。1 5 试验结果高剂量组5 0 0 0 m g k g 的动物在染毒后死亡5 0 0 m g k g 低剂量组未出现动物死亡。中毒大鼠主要表现为被毛蓬松、污垢、嘴上分泌物等，未死亡动物从第6 天起渐渐恢复。见表l 。表1“氯苯肟唑( S P R I 哪一0 0 5 ) ”对大鼠的急性经口毒性剂量动物数死亡数L D 5 0 及9 5 7 信限性别 ( r a g & g )( 只)( 只)( m g k g )5 0 0501 0 7 5521 1 6 5雄2 3 1 155( 8 0 0 1 9 9 5 115 0 0 0555 0 05O1 0 7 5512 1 5 0雌2 3 1 l52( 1 3 2 5 - 3 4 9 0 )5 0 0 0551 6 评价按农药的急性经口毒性分级标准进行判定，“氯苯肟唑( S P R I w M 一0 0 5 ) ”急性经口毒性试验，雄性、雌性大鼠L n 。分别为1 1 6 5 m g k g 和2 1 5 0 m g k g ，属低等毒性农药。5 2 3 中国化工学会农药专业委员会第十二届年会论文集2 大鼠急性经皮毒性试验2 1 样品处理样品( 由上海市农药研究所提供) 用乳化剂配制成试验用液。2 2 试验动物健康s D 成年大鼠，2 0 只，雌雄各半，体重在2 0 0 2 5 0 9 范围内，由复旦大学实验动物部提供。2 3 动物分组动物设1 个剂量组，剂量为5 0 0 0 m g k g 。2 4 试验方法动物给药前2 4 J 、时背部去毛，面积为4 c m 5 c m ，皮肤有破损者弃用。称重后，进行定量敷药，每大鼠l O O g 体重0 5 m l ，然后覆盖盒式罩，以胶布固定。涂药持续时间为4 小时，随后用水洗去皮肤上的农药，观察记录动物皮肤的局部反应和急性中毒反应，观察时间为2 周。2 5 试验结果染毒动物未见死亡，也无明显中毒体征。2 6 评价按农药的急性经皮毒性分级标准进行判定，“氯苯肟唑( S P R I 一硼一0 0 5 ) ”急性经皮毒性试验，雄性、雌性大鼠L D ”均大于5 0 0 0 m g k g ，属微毒类农药。3 兔眼刺激试验、3 1 样品处理直接用原液实验。3 2 试验动物健康新西兰白兔，4 只，双眼正常，体重在2 3 k g 范围内，由复旦大学实验动物部提供。3 3 试验方法将左侧下眼睑轻轻下拉，取原液0 1 m l 直接滴入动物眼结膜囊内，闭合眼睑约1分钟。然后分别在1 小时、2 4 J , 时、7 2 J - , 时、4 天和7 天观察动物结膜、角膜、虹膜等眼睛其它部位受损情况。3 4 试验结果见表2 。表2“氯苯肟唑( S P R I _ 删_ 0 0 5 ) ”的家兔眼刺激试验结果动眼刺激反应积分物部位l 小时2 4 ，、时4 8 ，、时7 2 小时第4 天第7 天I A M I 刺激编O I 0 I 强度号样对样对样对样对样对样对结膜201OOO0O0O00虹膜OOOO000OO0OO4 8 小时无刺 l0 角膜20O0OO00000O后为0激性总分2O10O00OOO00结膜201OO0O0O00O虹膜O0OO000O00O04 8 小时无刺 2O 角膜2O0OO00OO0O0后为0激性总分2010O0O0O0003结膜2010O0O0O0O0O4 8 小时无刺虹膜00O0OO000000后为0激性5 2 4 中国化工学会农药专业委员会第十二届年会论文集角膜20OO00O0O0OO总分201O00O0O00O结膜2O1O0OO0O0OO虹膜000O0O0OO00O4 8 小时无刺 40 。角膜2O00OO0O00OO后为0激性总分2010O0OO0O0O总积分8O400O00000000O平均刺激4 8 小时无刺指数000O000后为0激性3 5 评价每只动物试验结果按跟损伤程度评分表评分，最后按眼睛刺激性分级标准进行判定，结果“氯苯肟唑( S P i l l W M 0 0 5 ) ”，在对家兔眼束激试验中，表现为无刺激性。4 兔皮肤刺激试验4 1 样品处理直接用原液实验。4 2 试验动物健康新西兰白兔，4 只，皮肤完好，体重在2 3 k g 范围内，由复旦大学实验动物部提供。4 3 试验方法试验前2 4 d 时将背部两侧皮肤去毛，面积均为2 c m 3 c m 。每只动物涂敷o 5 m l 农药，用纱布覆盖，以胶布固定，涂药持续时间为4 小时。对照为蒸馏水。试验结束后，用水洗去农药，然后观察1 、2 4 、4 8 小时皮肤反应。4 4 试验结果见表3 。动物1 小时2 4 一, m r4 8 小时样品对照样品对照样品对照 编号红斑水肿红斑水肿红斑水肿红斑水肿红斑水肿红斑水肿100000000O0O0200000OOO000030000000O000O4OOO0O00O00O0积分0O0 均值刺激无刺激无刺激无刺激 强度4 5 评价每只动物试验结果按皮肤刺激反应评分表评分。最后按皮肤刺激强度分级标准进行判定，结果“氯苯肟唑( S P R I - I P A - 0 0 5 ) ”在对家兔皮肤刺激试验中，表现为无刺激性。5 豚鼠皮肤致敏试验5 1 样品处理直接用原药实验。5 2 5 一! 璧些三兰叁奎塑童些童墨盒兰三旦兰叁丝苎堡5 2 试验动物健康成年豚鼠，4 2 只，由复旦大学实验动物部提供。5 3 动物分组动物分为3 组，每组1 4 只( 雌7 ，雄7 ) 。分别为阴性对照( 蒸馏水) 组、实验组、阳性对照( 二硝基氯苯) 组。5 4 试验方法实验前2 4 、时动物背部左侧剃毛( 3 c m x 3 c m ) 。将氯苯肟唑“S P R I - - W M 一0 0 5 ”、阳性对照( 0 5 ) 和蒸馏水各0 I m l 涂在2 c mX2 c m 的滤纸上，敷贴在剃毛区，固定，6 小时后冲洗。在第7 天和第1 4 天分别重复一次。在开始实验( 首次涂药) 后第2 7 天将实验组和阳性对照组动物背部右侧剃毛( 2 c r u x 2 c m ) ，次日( 第2 8 天) 涂敷氯苯肟唑”S P R I w M 一0 0 5 ”和阳性对照( 0 2 ) 各0 i m l ，固定，6 小时后冲洗。观察至第4 2 天。第4 3 天实验组动物再涂“S P R I - W M - 0 0 5 。一次，观察至第5 6 天。5 5 试验结果阴性对照组和实验组在实验过程中，未发现任何皮肤异常，阳性对照组动物皮肤均有改变。5 6 评价按农药的皮肤变态( 致敏) 反应分级标准进行判定，结果“氯苯肟唑( S P R I 一吼I - 0 0 5 ) ”的豚鼠致敏试验中，不引起豚鼠皮肤的改变，属弱致敏物。6 A m e s 试验6 1 试验溶剂二甲基亚砜。6 2 试验菌株T A 9 7 、T A 9 8 、T A l 0 0 、T A l 0 2 。6 3 试验剂量2 5pg l m ，5 0 ug r m ，2 5 0 ug m ，5 0 0 Hg 皿。6 4 试验方法采用直接平皿掺入法，每皿加0 1 m 1 测试样品。每个浓度分设活化和不活化系列组。每组3 皿。试验重复一次。各菌株所用阳性对照如下表示。一s 9+ S 9T A 9 79 一氨基吖啶，5 0ug ，皿2 一氨基芴，2 0ug ，皿T A 9 8正啶霉素，5u g 皿2 氨基芴，2 0ug ，皿T A l 0 0甲基磺酸甲酯( 1 ：3 0 X 1 0 0I tI I E2 一氨基芴，2 0ug ，皿T A l 0 2甲基磺酸甲酯( 1 ：3 0 ) ，1 0 0u1 r m2 一氨基芴，2 0I tg 皿6 5 试验结果见表4 和5 。表4“氯苯肟唑( S P RJ - l | | 卜0 0 5 ) ”A l I I e s 测试结果( 1 )T A 9 7T A g s剂量 S 9+ S 9S 9+ S 92 5 g1 2 7 3 3 11 3 2 3 7 42 3 _ 3 1 22 6 0 2 05 0 u g1 3 6 8 01 3 2 0 1 1 52 6 2 02 5 2 2 02 5 0 ug1 4 0 0 4 - 1 01 4 4 3 1 5 62 6 02 3 3 1 55 0 0 I t g1 3 7 7 1 51 2 7 3 3 02 5 0 1 02 4 0 1 01 2 5 0 p g抑菌抑菌抑菌抑菌自发回变1 3 7 7 4 01 3 0 3 2 92 8 3 0 62 5 7 1 55 2 6 中国化工学会农药专业委员会第十= 届年会论文集【溶剂对照1 4 3 0 5 21 3 9 0 1 1 52 2 6 1 72 4 3 1 _ 5Il 阳性对照) 2 0 0 0 2 0 0 0 7 0 0 7 0 0|表5“氯苯肟唑( S P R 卜硼一0 0 5 ) ”A m e s 测试结果( 2 )T A l O OT A i 0 2剂量 - S 9+ S 9S 9+ S 92 54g1 6 8 3 1 3 41 7 2 0 4 - 8 72 5 6 6 1 0 02 3 B 3 2 25 0 u g1 6 5 3 1 1 51 6 6 3 1 1 12 5 1 0 7 02 4 2 7 1 62 5 0 u g1 6 6 3 3 51 6 5 0 2 62 4 8 3 1 1 72 5 1 3 1 95 0 0 pg1 7 1 3 0 51 5 8 7 4 92 5 4 3 1 4 62 3 3 0 1 51 2 5 0 u g抑菌抑菌抑菌抑菌自发回变1 5 6 3 4 517 2 0 6 ，02 6 1 0 1 3 12 4 3 3 1 0溶剂对照1 6 2 3 7 11 6 8 6 1 1 52 4 7 0 1 0 62 3 8 3 7