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单头二龄幼虫的微量D N A 中扩增出大豆胞囊线虫的S C A R 特异性片段,敏感性非常高,达到单条幼虫的水平。这表明本研究研制的P C R 鉴定法可用于生产实践中大豆孢囊线虫的快速灵敏的检测和鉴定。甘薯茎线虫的核糖体D N A 基因遗传多态性初步研究杨玉文1 2 ,彭德良1( 1 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京1 0 0 0 9 42 中国农业科学院研究生院,北京1 0 0 0 8 1 )我国报道的茎线虫种类有1 7 3 5 种,主要种类有腐烂茎线虫( D d e s t r u c t o r ) 和起戎草茎线虫( D 幽瑚c f ) 和噬菌丝茎线虫。有重要经济重要性和引起农作物严重损失的茎线虫是危害甘薯的茎线虫和危害大蒜及球茎和鳞茎类的起戎草茎线虫。茎线虫对我国甘薯上的危害最为突出和明显,该线虫病在我国河北卢龙县、昌黎、滦县、迁安、廊坊、霸州、曲阳县、定州等2 1 个县市,北京密云、大兴、房山、河南许昌、郑州、平顶山、郏县、山东沂水县、江苏徐州等省市发生普遍和严重,主要侵染甘薯的地下部根、块根和块茎,被害部分表现为组织坏死、干缩、糠心和表皮变褐龟裂,俗称甘薯糠腐茎线虫病,该病一般减产2 0 3 0 ,严重者4 0 “ - 5 0 ,甚至绝产,我国华北和华东甘薯的毁灭性线虫病害,严重制约了甘薯产业的发展。我国甘薯茎线虫病的病原,2 0 世纪8 0 年代以前,曾鉴定为起戎草茎线虫( D i t y l e n c h u sd i p s a c i ) ,1 9 8 3 国内学者对河北和山东两个甘薯茎线虫病标样进行了研究,将甘薯茎线虫病病原重新订正为马铃薯腐烂茎线虫( D i t y l e n c h u sd e s t r u c t o r ) ,而对我国其它地区甘薯茎线虫病病原并未深入详细研究,目前我国甘薯茎线虫病的病原一致笼统沿用马铃薯腐烂茎线虫。本文用光学显微镜和扫描电镜对我国北京、河北、山东、江苏、安徽等5个省市不同地区的甘薯茎线虫群体进行了形态学,对其主要形态特征进行了描述和数值测计,结果表明:我国型甘薯茎线虫的形态测计值和主要形态特征与腐烂茎线虫( D i t y l e n c h u sd e s t r u c t o r ) 基本一致。用R F L P P C R 技术研究了我国5 个省市1 0 个不同地区的甘薯茎线虫群体的核糖体D N A - I T S 基因遗传多态性,用通用引物r D l 认1 r D M 屹扩增北京大兴、河北卢龙、河北抚宁、河北易县、河北滦县、河北滦南、山东平阴、安徽泗县等8 个甘薯茎线虫群体( I 型甘薯茎线虫) 和食菌茎线虫( D m y c e l i o p h a g u s ) 的I T S区域均产生了约9 0 0 b p 的片段,而山东沂水、江苏铜山等2 个地区的甘薯茎线虫群体扩增出约1 2 0 0 b p 的片段。1 4 种限制性内切酶进行r D N A I T S R F L P 分析,结果显示:我国北京大兴、河北卢龙、河北抚宁、河北易县、河北滦县、河北滦南、山东平阴、安徽泗县等地8 个甘薯茎线虫群体均产生了相同的酶切谱带,而山东沂水、江苏铜山甘薯茎线虫群体的酶切图谱与上述8 个甘薯茎线虫群体的酶谱带存在较大的差异。因此将我国d 玎8 个甘薯茎线虫群体称为I 型甘薯茎线虫,而山东沂水、江苏铜山甘薯茎线虫群体称为I l 型甘薯茎线虫。经彳缸l 、R s a l 酶切可以区分山东沂水和江苏铜山的线虫群体。将本研究的结果同W e n d te ta 1 ( 1 9 9 3 ) 的酶切结果比较发现:山东沂水、江苏铜山型甘薯茎线虫与国外腐烂茎线虫( D i t y l e n c h u sd e s t r u c t o r ) 酶切谱类似,但是也存在一定的差异。应用T a q M a n - M G B 探针进行松材线虫的实时荧光 定量检测技术研究葛建军1 ,曹爱新1 ,刘先宝2 ,陈长法3( 1 中国检验检验科学研究院,北京1 0 0 0 2 9 ,2 华南热带农业大学,海南5 7 1 7 3 7 ;3 山东出入境检验检疫局,山东2 6 6 0 0 2 )松材线虫是国际公认的最重要的检疫性有害生物之一,也是我国2 类检疫危险性有害生物,我国口岸多次从货物的木质包装中截获该线虫。由于松材线虫与拟松材线虫在形态上极其相似,难以区分,幼虫更无法用于鉴定。传统的形态学鉴定、生化以及其他分子技术等方法存在费时、准确度不高、灵敏度低等缺点,不易形成标准。我们设计筛选一对引物以及一条M G B 探针,对松材线虫进行实时荧光P C R 检测。建立了一条从l p g 到1 0 4 p g 标准曲线,相关系数r = 0 9 6 5 。该检测方法省时、准确、快速、无污染。抗胞囊线虫基因的萝卜染色体定位及其在油菜附加系中稳定性张绍松1 ,H P e t e r k a 2 ,H B u d a h n 2 ,O S h r a d e r 2 ,李成云1 ,李进斌1( 1 云南省农业生物技术重点实验室,昆明,6 5 0 2 2 3 ;2 I n s t i t u t eo fH o r t i c u l t u r a lC r o p so fF e d e r a lC e n t r ef o rB r e e d i n gR e s e a r c h0 1 1C u l t i v a t e dP l a n t s ,G e r m a n y , Q u e d l i n b u r g ,D - 0 6 4 8 4 )许多线虫是危害农作物的一类重要病原。全世乔每年由线虫危害农作物造成的损失约1 0 0 0 亿美元。胞囊线虫是线虫中一大类群,其中的甜菜胞囊线虫( H e t e r o d e r as c h a c h t i iS c h m ) 主要危害十字花科和豆科植物中2 0 余种农作物,以及一些观赏植物。油菜、甜菜、萝卜、白菜;豌豆、小扁豆等都是甜菜胞囊线虫的重要的寄主。病原对多种农作物上的危害,使农作物的生产造成极大的经济损
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