毛细管电泳法测定天麻中五种有效成分的p K a 值。田宝娟h2 杨更亮“ 王德先1 王孟歌2( 1 河北大学化学系保定0 7 1 0 0 2 ；2 河北保定师专保定0 7 1 0 0 0)1 前言天麻为兰科属植物天麻G a s t r o d i ae l a t aB l u m e 的块茎，性味甘平，有祛风定惊之功效， 含天麻素，香草醇，对羟基苯甲醇，香草醛和对羟基苯甲醛等活性成分。临床上多用于治疗 肝阳上亢或风痰所引起的头痛，眩晕等症 1 。药理学研究表明，天麻具有抗惊厥 2 、阵痛 3 、镇静催眠 4 、促智抗衰老 5 、增加心输出量 6 、降低家兔后肢和头部血管阻力、抗缺血抗缺氧等作用 7 。本实验室利用基本电泳理论和一元有机酸的电离平衡，推导出了有效淌度( 1 1 r r ) 与缓冲溶液 H + 的非线性关系H 1 ，测定了物种有效成分的p K a 值，其中测得的对羟基苯甲醇，香 草醛和对羟基苯甲醛的p Z a 值，与文献一致，天麻索和香草醇的p K a 值为首次测定 2 实验部分 2 1 仪器与设备：美国W a t e r s 公司生产的高效毛细管电泳仪( W a t e r sQ u a n t a4 0 0 0 EC a p i l a r yE l e c t r o p h o r e s i ss y s t e m ) ，内设恒温系统和紫外检测器。未涂层熔硅弹性石英毛细管，内径7 5 姗，柱长6 0 c m ，有效柱长5 2 c m ( 河北永年光纤厂) 。P H 一3 C 型酸度计( 上海雷磁仪器厂) 。 2 2 样品与试剂：天麻素和对羟基苯甲醇标准品由中图生物制品检定所提供；香草醛和对羟 基苯甲醛购自北京化学试剂公司：香草醇由本校有机室提供，经毛细管电泳检测为单峰。实验中所用到的其他分析试赉j 均为分析纯。2 3 样品溶液的制备：精密称取五种有效成分，分别溶解于l O m L 水中备用。 2 4 电泳操作：实验前，毛细管首先在室温下用0 1 m o l L 的N a O H 溶液冲洗2 0m i n ，再用背 景缓冲溶液冲洗5 m i n ，每次进样前都要用背景缓冲溶液冲洗5 m i n 。更换缓冲液以后，重复上述冲洗操作。以l O m m o l L 磷酸盐+ 1 5 m m o l L 硼酸盐为背景缓冲溶液，不同p H 值经0 I m o l LH c l 和0 1 m o l L N a O H 调节，由p H - 3 C 型酸度计测得，0 1 m o l L 的N a C l 用来维持体系的离子强度为0 0 7 1 7 士H ) 0 0 6 m o l k g 。为排除组分之间的相互干扰，每种组分的淌度分别测定。样品采用重力 进样，进样时间为5s 。紫外检测波长设在2 1 4 r i m ，检测灵敏度为0 0 0 5 。 3 结果与讨论对于一个一元弱酸卧，我们已经给出了溶质的有效淌度和缓冲溶液 H + 】之间的非线性关系为 8 ：。，：一堕一( 1 )晰2 而-u 其中，l I 。肝为溶质的有效淌度，l I 一一为溶质的离子淌度，K a 为弱酸的离解常数。表1 列出了不同p H 条件下，五种有效成分的有效淌度l l 小值。资助项目：图家自然科学基金( 2 0 0 7 5 0 0 5 ) ，河北省自然科学基金资助项目( 2 0 0 0 7 7 ) ( 2 0 2 0 ) 和中圈科学 院基金、第一作者：田宝娟，女，1 9 7 1 年出生，硕士，讲师 通讯联系入：杨更亮男1 9 6 3 年出生，博士，教授通讯地址河北大学化学系电话0 3 1 2 5 0 3 2 3 1 3e - m a i l ： y g l h b u c d u c n5 2囊1 不同p H 囊件下淫羊誓甙的有效度p t x t O o - l 、，p HI G a s t r o d i nn i l l y ld c o h d州y d o x y b c n z y la l c o h o lV a n i l l i np - H y d r o x y b o n z y la l d e h y d e7 2 01 6 = 0 0 0 61 3 4 ：1 - 0 0 l575 92 1 钳= 0 0 3 62 0 l ：c - O 0 1 08 0 3O 19 I 暗= 0 0 1 72 8 0 士o 0 0 627 2 士o 0 8 684 5O 1 6 ：o 0 0 60 2 2 妇0 03 1 l 士o 0 1 23 2 5 士0 0 1 58 7 8O 1 0 3 0 0 1 0O 3 S m b o 0 0 50 4 0 0 * 0 0 I53 ，l O 士o 1 0 l3 3 4 * 0 O I59 0 70 1 6 n 0 1 60 4 9 ( k 0 0 1 00 5 9 0 * 0 0 1 03 2 0 * 0 0 0 63 5 l 士o 0 0 69 4 00 2 I 曲0 1 00 7 3 0 t - 0 0 l50 8 6 任0 2 I3 1 4 t - 0 0 l23 4 6 士0 0 0 79 7 302 7 = o 0 1 51 3 4 * 0 0 0 01 5 5 士o 0 1 23 4 0 * 0 0 2 63 7 6 士0 0 l5l O O l0 3 2 0 士0 0 l l1 6 铀= o 0 1 52 O 曲0 3 03 4 2 士0 0 5 03 8 触O 0 0 71 0 _ 3 80 3 1 0 0 0 1 52 3 ：o 0 l52 5 3 士o 0 lI3 5 7 士o 0 1 44 0 4 * 0 0 2 l裹2 五种有效成分的p K a 值p - H y d o x y b e n z y lp - H y d r o x y b o n z y lG a s t r o d i nV a n i l l y la l c o h o la l c o h o lV a n i l l i na l d e h y d ep K a9 2 7 * 0 0 79 9 5 士o 0 79 8 8 士o 0 67 3 9 士o 0 57 6 4 * 0 0 6L i t 2 49 8 47 4 07 6 2“A0 3 4 2 * 0 0 l32 9 2 士0 1 9 03 1 5 士o 1 3 43 3 4 - 0 0 4 93 7 2 - * 0 0 7 6图1 显示了五中有效成分的有效淌度对溶液 H + 经两参数( K a ，1 一) 非线性校正的结果。 测定的各组分p K a 值见表2 。由表2 可以看出，对羟基苯甲醇，香草醛和对羟基苯甲醛的p K a 值与文献值很好的吻合，表明该方法有较高的准确性。参考文献1 江苏新医学院编中药大辞典上册p 3 1 52 吴密秋等药学学报1 9 8 9 2 4 ( 7 ) ：4 8 23 邓士贤等云南医药，1 9 8 5 6 ( 4 ) 2 5 2 钟耨i 嘲，等暇川医学院学报。1 9 8 4 1 5 ( 1 ) ：1 75 高南南等中草药1 9 9 4 ，2 5 ( 1 0 ) ：5 2 16 黄秀风等中药通报1 9 8 6 1 l ( 5 ) t5 17 任_ 二I ：兰等巾革药1 9 9 2 2 3 ( 6 ) I3 0 28 D e x i a nW a n g , O e n g l i a n gY a n g , X i u r o n gS o n g , E l e c t r o p h o m s i s ，1 I 矿4 05 0田l 淫羊t 甙的有效淌度对溶液c H + ( + ) 】的两参数非线性校正图B = 蒋革醛：C = 对羟基苯甲醛；D ：对羟基苯甲醇 E _ 香草睥：F = 天麻索5 3“：=拍”bf芦，耋叠_口王