4 2药物分析杂志气相色谱法测定甲磺酸罗哌卡因中溶媒残留量焦亚奇王九成袁民正陈涛( 西安力邦制药有限公司陕西脂质体工程研究中心西安7 1 0 0 7 5 )甲磺酸罗哌卡因为一酰胺类局麻药，在合成和精制过程中使用了多种有机溶媒，可能引入有毒有害的 二类有机溶媒氯仿和甲苯，三类有机溶媒丙酮和异丙醇。其溶媒残留量的测定可采用多次测定法，但繁琐。 笔者探讨研究了采用气相色谱法一次进样测定四种溶媒残留量的方法。现报告如下。 1 仪器与试药 岛津G C 1 4 B 气相色谱仪，C R 6 A 数据处理机，P E G 一2 0 M ( 交联) 毛细管色谱柱( 0 2 5 m m 3 0 m ) ，氢火 焰离子检测器。甲磺酸罗哌卡因( 批号：2 0 0 1 0 2 1 2 ) ，由西安力邦制药有限公司合成；氯仿、甲醇、异丙醇、 甲苯均为分析纯，西安化学试剂厂生产；二甲基甲酰胺( D M F ) ，分析纯，西安化玻站化学厂生产。 2 方法与结果 2 1 色谱条件色谱柱：P E G 一2 0 M ( 交联) 毛细管色谱柱( 0 2 5 m m 3 0 I n ) ；检测器温度：3 0 0 ；进样器温度： 1 4 5 ；柱温：采取程序升温( 7 0 。C ，5 m i n ，后以1 0 。C m i n _ 的速度升温到1 5 0 ，维持2 0 m i n ) ；氢气压力： 6 5 k P a ，流量：5 0 m L m i n ；空气压力5 0k P a ，流量4 8 0 m L m i n 一；载气压力7 5k P a ；分流比1 ：1 0 0 ；尾吹气流量：4 0 m L m i n ；进样量：2 p L ；走纸速度：4 m m m i n 。 2 2 对照溶液的配制取氯仿、甲苯、丙酮和异丙醇适量，精密称定，加D M F 制成每l m L 含6 0 “g 氯仿、 8 9J t g 甲苯、5 0 0 p g 的丙酮、5 0 0 9 9 异丙醇的溶液，摇匀。 2 3 样品溶液的配制精密称取甲磺酸罗哌卡因1 9 ，置于1 0 m L 的量瓶中，用D M F 溶解并稀释到刻度，即得。 2 4 专属性试验精密量取氯仿、甲苯、丙酮和异丙醇各l m L ，置于同一个1 0 m L 的容量瓶中，用D M F 溶解，并稀释到刻度。精密量取2 1 x L 进样，记录色谱图，计算保留时间。氯仿、甲苯、丙酮和异丙醇的保 留时间分别为5 5 6 ，6 1 3 ，3 2 6 ，4 1 7 m i n ，与上述分别进样的保留时间相符合。且分离度符合要求。 精密量取氯仿、甲苯、丙酮和异丙醇各l m L ，分别置于1 0 m L 的容量瓶中，用D M F 溶解，并稀释到 刻度。分别取2 1 x L 进样，记录色谱图，计算保留时间。保留时间分别为5 5 9 ，6 1 5 ，3 2 6 ，4 2 0 m i n 。 2 5 检测限与定量限将气相色谱仪和处理机的灵敏度调到最大，其它色谱条件不变，分别取2 4 中的氯 仿、甲苯、丙酮和异丙醇的D M F 溶液适量，于1 0 m L 的容量瓶中，用D M F 稀释到刻度。分别取2 u L 进 样，记录色谱图，计算峰高，以信噪比为3 和l O 时计算检测限和定量限。氯仿的检测限、定量限分别为8 2 7 n g ，2 7 5 7 n g ；甲苯的检测限和定量限分别为3 7 9 n g ，1 2 6 3 n g ；丙酮的检测限和定量限分别为3 2 2 n g ， 1 0 7 4 n g ；异丙醇的检测限和定量限分别为6 9 4 n g ，2 3 1 4 n g 。 2 6 线性试验分别取上述对照液0 5 ，0 7 5 ，1 0 ，1 2 5 ，1 5 m L 于1 0 m L 量瓶中，用D M F 稀释到刻度， 摇匀。分别取2 9 L 进样，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作线性回归。氯仿的线性方程为 y = 2 3 6 + 1 7 1 6 6 x ，r = 0 9 8 8 9 ；甲苯的线性方程为y = 1 5 2 4 + 1 7 6 9 0 6 x ，r = 0 9 9 8 7 ；丙酮的线性方程为y = 1 7 8 + 6 8 8 8 x ，r = 0 9 9 9 5 ；异丙醇的线性方程为y = 1 8 2 + 7 5 0 0 8 x ，r = 0 9 9 9 4 。 2 7 精密度试验取上述2 4 中的混合溶液连续进样5 次，记录色谱图，分别计算氯仿、甲苯、丙酮和异 丙醇的峰面积的相对标准偏差( R S D ) ，分别为1 5 0 ，1 0 4 ，0 8 0 ，1 0 6 。结果表明氯仿、甲苯、丙酮 和异丙醇的R S D 均小于1 0 ，精密度良好，符合要求。 2 8 耐用性试验精密称取甲磺酸罗哌卡因O 6 9 ，于1 0 m L 容量瓶中，用D M F 溶解并稀释到刻度，分别 于0 ，2 ，4 ，5 ，1 8 h 取2 9 L 进样，记录色谱图，分别计算不同时间点的氯仿、甲苯、丙酮和异丙醇的峰面 积的相对标准偏差( R S D ) ，结果除氯仿、甲苯未检出外，丙酮、异丙醇的R S D 分别为5 9 7 ，6 5 2 ，均 小于1 0 。 2 9 样品测定精密量供试品溶液、对照品溶液各2 9 L ，注入气相色谱中，记录色谱图，以外标法计算样 品中有机溶媒残留量，结果见下表1 。2 3 ( 增刊) ，2 0 0 34 3表1 三批样品中有机溶媒残留量检测结果 ! 些! 墨! 翌些2 1 堡! i 业苎! 1 2 垃堂坐盥兰璺些坚! 坚! 苎! ! Zg 曼 批号( L o tN o )2 0 0 1 0 2 1 22 0 0 1 0 2 1 52 0 0 1 0 2 1 9氯仿( c h l o r o f o r m )未检出未检出未检出甲苯( t o l u e n e )未检出未检出未检出 丙酮( a c e t o n e l0 3 0 0 3 1 0 3 1 异丙醇( i s o p r o p y le t h a n 0 1 ) 0 1 5 0 1 5 0 1 4 4 讨论 气相色谱测定样品中的有机溶媒残留量是常用的方法。上述的测定结果表明，采用该方法一次测定 多个残留溶媒，分离度完全可以达到要求，线性、精密度、耐用性良好，可作为甲磺酸罗哌卡因中有机溶 媒残留量的测定。止咳祛痰片中甘草酸含量测定单敏1 刘新平1 葛小侠2( 1 西安市药品检验所西安7 1 0 0 5 4 ；2 西安千禾药业有限责任公司西安7 1 0 0 7 5 )止咳祛痰片为中西药复方制剂，具有清肺、止咳、祛痰等功效，用于痰热阻肺引起的咳嗽痰多、胸 满气短、咽干、喉痒。方中甘草具有止咳祛痰作用，甘草酸为甘草的主要活性成分之一，本文采用分离效果好、专署性强的H P L C 法测定甘草中甘草酸的含量。 1 仪器与试药W a t e r s 高效液相色谱仪；4 9 0 检测器；m i l l e n n i u m3 2 工作站。甘草酸单铵盐( 中国药品生物制品检定所提供，批号为7 3 1 - 9 2 0 3 ) ；甲醇为色谱醇；其它试剂为分析醇。 2 方法与结果2 1 色谱条件色谱柱为十八烷基键合硅胶柱，流动相为甲醇一0 2 醋酸铵溶液一冰醋酸( 7 0 ：3 3 ：1 ) ，检测波长2 5 0 n m ，流速1 0 m L m i n 。在此条件下，止咳祛痰片中其他组分能达到基线分离，理论塔板数按甘草酸单铵盐计算应不低于2 0 0 0 。2 2 对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约1 0 m g ，精密称定，置5 0 m l 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。( 每l m L 含甘草酸单铵盐对照品0 2 m g ，折合甘草酸为0 1 9 5 9 m g 。) 2 3 检测波长确定取甘草酸单铵盐对照品，用流动相溶解，以流动相为空白，在2 0 0 n m 3 5 0 n m 波长范围内扫描，甘草酸单铵盐在2 2 3 n m ，2 5 0 n m 波长处各有一最大吸收峰，但2 2 3 n m 波长出甲醇有较强的末端吸收。为了提高其检测的灵敏度，参照中国药典一部选择了2 5 0 n m 为检测波长。2 4 线性关系考察精密称取甘草酸单铵盐对照品5 0 8 0 m g ，置5 0 m L 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液待用。精密吸取上述储备液0 4 ，0 6 ，0 8 ，1 0 ，1 2 ，1 4 ，1 6 m l ，分别置于1 0 m L 量瓶中，加入流动相稀释至刻度，摇匀，各精密吸取1 0 儿，分别注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。回归方程为：Y = 1 2 5 8 6 7 8 4 X + 2 1 4 9 9 2 ，= 0 9 9 9 2 。表明甘草酸在0 0 7 9 6 m g m L 0 3 1 8 4m g m L d 浓度范围内线性良好。 2 5 精密度试验精密吸取对照品溶液1 0 此，重复进样5 次，按上述色谱条件测定峰面积，平均峰面积为2 5 3 4 8 1 4 ，R S D = - 0 5 ( n = 5 ) 。2 6 重复性试验取同批号样品5 份，按正文方法进行测定，平均含量为1 5 5 9 ( m g 片) ，R S D 为0 5 ， 提示该法重复性良好。