12 二i = 哲，韩宏华陈宇，等血脂康治疗酒精性肝病的l 临床观察中国老年学杂志，2 0 0 0 2 0 ( 3 ) ：1 6 0 1 6 11 3 崔闵普清肝解 酉恢治疗酒精性肝病I 临床研究中医杂志，1 9 9 8 3 9 ( 1 ) ；3 2 3 31 4 董秀敏，高荣慧，郫迎新t 等解肝毒汤治疗4 8 侧褶精性肝损伤中国中医药信息杂志，1 9 9 7 ；4 ( 9 ) ：1 9 2 0l s 侯留法赵玉瑶，陈宝玲渔肝康扬治疗酒精性脂肪肝3 6 倒临床研究河南中医药学刊，2 0 0 0 ；1 5 ( 2 ) 4 1 4 2中医三种治法对B e l 一7 4 0 2 人肝癌细胞增殖 及端粒酶活性的影响邓欣杨大国乐晓华单万水聂广 深圳市东湖医院( 5 1 8 0 2 0 )摘要目的：探讨中医活血软坚、益气养阴、清热解毒三种治法影响肝癌细胞增殖及端粒酶活性各自的特点及意义。方法：从临床治疗肝癌常用的活血软坚药中选取有代表性的丹参、川芎、鳖甲，益气养阴药中选取黄芪、枸杞子、女贞子，清热解毒药中选取半枝莲、白花蛇舌草，分别制成水煎剂，灌喂正常大鼠，每日2 次，连续3 d ，于第4 d ，1 次给予全日剂量后1 h 采血，制备药物血清，药物血清经5 6 C 灭活。以正常鼠血清为阴性对照，将药物血清温育B e l 一7 4 0 2 人肝癌细胞。噻唑蓝( M T T ) 比色法测定细胞增殖，多聚酶链反应一酶联免疫吸附法( P C R E L I S A 法) 检测细胞端粒酶活性。结果：活血软坚药和益气养阴药均可抑制B e l 一7 4 0 2 细胞的增殖( P 0 0 5 ) 。活血较坚药、益气养阴药和清热解毒药均可抑制B e l 一7 4 0 2 细胞端粒酶活性( P 0 0 5 ) 。活血软坚药物组和益气养阴药组相比，魂者A 值差异无显著性( P 0 0 5 ) 。提示：活血软坚药和益气养阴药均可抑制B e l 一7 4 0 2 肝痛细胞的增殖，清热解毒药不能抑制B e l 一7 4 0 2 肝癌细胞的增殖。裹1 药袖血清对B e l 一7 4 0 2 龋胞增囊的影响( M TT 法i 士s )洼：与对照组比* p o0 1 I # P O0 5 。2 三种治法药物血清对B e l 一7 4 0 2 细胞端粒酶活性的影响结果见表2 。与B e l 一7 4 0 2 细胞对照组比，活血软坚药组和益气养阴药组A 值显著降低( P o 0 1 ) ，清热解毒药组A 值也明显降低( P o 0 5 ) ；活血软坚药物纽和清热解毒药组相比，两者A 值差异有显著性( P 0 0 5 ) 。表明：活血软坚药、益气养阴药和清热解毒药均可抑制B e l 一7 4 0 2 细胞端粒酶活性，且活血软坚药抑制端粒酶活性的作用优于清热解毒药。6 8 衰2 药袖血清对B e l - - 7 4 0 2 细胞端枉酶活性的影响( x 士s ) 生：与B e l7 4 0 2 对j ! f 缓比，* P 00 1 i # P O 0 5 ；与蒲热解毒药纽比- # # P ( O0 5 。 讨论中医治法决定选方用药，并体现于方药中。因此，治法的研究离不开具体的方药。我们根据有关中药治疗原发性肝癌用药规律研究报道“。2 ，从常用的抗肝癌活血软坚药中选取有代表性的丹参、鳖甲、J I 】芎，益气养阴药中选取黄芪、枸杞子、女贞子，清热解毒药中选取半枝莲、白花蛇舌草，来研究这三种治法对人肝癌细胞增殖及端粒酶活性的影响。无限制性增殖及凋亡调控异常，是恶性肿瘤细胞区别于正常细胞的显著生物学特征。因此，有效抑制和杀灭肿瘤细胞是抗肿瘤治疗的关键。本研究发现活血软坚法和益气养阴法均可抑制B e l 一7 4 0 2 细胞的增殖，这与有关报道口“5 0 的结果较一致。但我们发现清热解毒法不能抑制B e l 7 4 0 2 细胞的增殖，与有关报道i s 4 j的动物体内实验结果不符，这可能是由于清热解毒法主要通过调节机体的免疫功能间接抗肿瘤”，而体外实验不能充分反映药物对免疫功能的影响的缘教。7端粒酶是一种核糖蛋白体酶，它能利用自身R N A 为模板合成端粒D N A ，弥补随着细胞有丝分裂逐渐缩短的端粒长度。近些年的研究发现 6 1 ”肿瘤细胞大都表达端粒酶活性，端粒酶激活后可促进细胞无限增殖肿瘤细胞周期表现为始终处于增殖状态不能进入静止期。因此，如能有效抑制端粒酶活性，就可抑制肿瘤的生眭。本研究结果发现恬血软坚法和益气养阴法均可显著抑制B e l 一7 4 0 2 细胞端粒酶活性，清热解毒法也有一定的抑制B e l 一7 4 0 2 细胞端粒酶活性的作用。三种治法对端粒酶活性的抑制作用从强到弱依次为活血软坚法、益气养阴法和清热解毒法。因此推测，话血软坚法和益气养阴法可能是通过显著抑制B e l 一7 4 0 2 细胞端粒酶活性，从而抑制B e l 一7 4 0 2 细胞增殖。参考文献脒宁中晚期原发性肝癌中药应用规律陕西中联1 9 9 5 t 1 6 ( 2 ) ，8 7 8 8 ，2 陈德蝴，方肇勤中药治疗原发性肝癌中晚期的药眯频率分析辽宁中医杂志，2 0 0 2 ，2 9 ( 4 ) ：1 8 7 1 8 9j 潘敏求，孙兆泉，划札意等肝癌治则机理实验研究中国中西医结合外科杂志，】9 9 5 ，1 ( 5 ) ：3 1 l 一3 】44 方肇勤管冬元李海燕等不同中医掊怯对大鼠肝癌作用的比较上海中医药太学学报1 9 9 9 - 1 3 ( 1 ) ”一5 9 ，5 剂平周建镩，胡义扬等盘气养胡诱导S M M C - - 7 7 2 1 肝癌缨旌分化作用与意义中国中医基础压学杂志t 2 0 0 0 6 ( 8 ) 。2 9 3 36K i mNW P i a t y s e z e kMA ，P r o u s eKR e ta l ，S p e c i f i ca s s o c i a t i o no fh u m a nt e l o m e r a s ea c t i v i t yw i t hi m m o r t a lc e l l sa n dc a rS c l e 【9 9 4 2 6 6 ( 1 8 ) ：2 0 1 l 一2 0 1 5 7 L a n d h e r g G ，N i e l s e nN H ，N i l s s o nP ，e t a lT e l o m e r a s ea c t i v i t y i sa s , 9 0 c i a t e dw i t hc e l lc y c l ed e r e g u l a l i o ni nh nb r e a s tc s n c e F C a n c e rR e B ，1 9 9 7 I5 7 ( 3 ) ：5 4 9 5 5 36 9