上皮一间质转化( E M T ) 和W n t 3 一c a t e n i n 信号通路相关分子与非小细胞肺癌浸润和转移关系E p i t h e l i a lm e s e n c h y m a lt r a n s i t i o n ( E M T ) a n dw n t p c a t e n i nr e l a t e dw i t hi n v a s i o na n dm e t a s t a s i si nN S C L C研究生：型：羞导师：堡红论文课题起止时间：至Q ! ! 生圣月二2Q12 生圣旦论文完成时间：2Q12 生三月中国医科大学( 辽宁)20 12 年3 月中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：明。j 6 c中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：指导教师签名：日期：孙患弘口爹t 丑目录一、摘要中文论著摘要l英文论著摘要5二、英文缩略语8三、论文前言”9剐吞”材料和方法1O结果15讨论2 0结论2 5四、本研究创新性的自我评价2 6五、参考文献2 7六、附录综述3 0致 射4 4个人简介4 5文论著摘要上皮间质转化( E M T ) 和W n t p c a t e n i n 信号通路相关分子与非小细胞肺癌浸润和转移关系前言肺癌是我国乃至世界发病率最高的恶性肿瘤，发病率呈不断上升趋势，并已成为目前人类因癌症死亡的主要原因之一。根据国际癌症研究中心( I A R C 愚m O )资料显示，肺癌总发病数占全部恶性肿瘤2 0 0 ，死亡占总癌症死亡数的2 3 82 1 虽然近年来各种诊治手段不断提高，但肺癌患者总生存率仍然没有明显的改善。非小细胞肺癌( N o ns m a l lc e l ll u n gc a n c c r , N S C L C ) 占新发肺癌病例的7 5 8 0 ，鳞癌和腺癌则是N S C L C 的主要类型，其预后也非常差，仅3 0 左右的N S C L C患者在就诊时有手术指征，且在施行肺癌根治术后的患者中，5 0 左右5 年内出现复发或转移，9 0 的肺癌患者死于转移相关的并发症3 1 ，其主要原因在于肺癌的发病机制、特别是肺癌侵袭转移的机制尚不十分清楚。已有研究表明肺癌细胞的侵袭、转移是一个受多因素调控的、十分复杂的生物学过程，其中上皮与间质细胞间的相互作用在肿瘤侵袭和转移过程中起重要作用。G r e e n b u r g 等5 1 于1 9 8 2年发现晶状体上皮细胞在胶原凝胶中可变为间质细胞样细胞，从而提出了上皮间质转化( e p i t h e l i a l m e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n ，E M T ) 的概念。E M T 是指上皮细胞在特定的病理生理情况下向间质细胞转化的现象，表现为上皮细胞的细胞间连接消失，细胞骨架重组，由多边形变为梭形的纤维细胞样形态；细胞失去极性，黏附能力下降，获得较强的侵袭和转移能力。此外，细胞表型亦发生改变，例如上皮钙黏附蛋白( E c a d ) 等上皮标志物丢失；同时表达间质细胞标志物，例如神经钙黏附蛋白( N c a d ) ，波形蛋白( V i m e n t i n ) 等，以及黏附蛋白的辅助分子p 连环素( 3 - c a t e n i n ) 的入核【6 J 。国内外学者把细胞核内出现 F c a t e n i n 蛋白作为W - n t I c a t e n i n 信号通路开通的标志【7 】因此w n t l B c a t e n i n 信号通路应该参加E M T 这一过程目前人们已经发现了W n t 信号传导通路的3 个主要分支，即经典W n t 通路 一一I ( 亦称为W n t 正规通路) ；P l a n e r 细胞极性通路和W n t C a 2 + J 恿路t 引。经典的关性【9 】，并在非小细胞肺癌细胞系中过度表达f I O l ，但与人非小细胞肺癌的浸润转目的方法幺里 ；日木8 9 0 4 ，明显高于癌旁正常肺组织( 2 0 o o ) ( p 0 0 5 )( 2 ) 在N S C L C 组织中E c a d h e r i n 蛋白及其m R N A 的表达的相关性：。4 7 例N S C L C 组织中E c a d h e r i n 蛋白及其m R N A 同时表达有2 例，E c a d h e r i n蛋白及其m R N A 都不表达者2 9 例，在N S C L C 组织中E c a d h e r i n 蛋白及其m R N A的表达具有高度的一致性。( M c N e m a rT e s tX 2 = O 0 6P 0 0 5 )结论1 E c a d h e r i n 低表达及V i m e n t i n 高表达提示肺癌在发生恶性转化的过程中伴3随处与参E e a d h e r i nW n 心1 3 - e a t e n i nV i m e n t i nE M T非小细胞肺癌浸润和转移免疫组织化学R T - P C R4英文论著摘要E p i t h e l i a lm e s e n c h y m a lt r a n s i t i o n ( E M T ) a n dW n t p - - c a t e n i nr e l a t e dw i t hi n v a s i o na n dm e t a s t a s i si nN S C L Co b j c c t i v eT oi n v e s t i g a t et h ee p i t h e l i a lm e s e n c h y m a lt r a n s i t i o n ( E M T ) a n d W n t p - c a t e n i nS i g n a l i n gP a t h w a yr e l a t e d 、J v i t l li n v a s i o na n dm e t a s t a s i si nN S C L C 。M e t h o d sB yt h em e t h o d so ff r o z e nt i s s u ea r r a y - b a s e di m m u n o h i s t o c h e m i c a l s t a i n i n ga n dR T o P C R as t u d yw a sc o n d u c t e dt oc h e c kt h ee x p r e s s i o no rd i s t r i b u t i o no fE c a d h e r i n ，V i m e n t i n ，W n t 2 ，D - c a t e n i ni nn o r m a ll u n gt i s s u e sa n dn o n - s m a l l - c e l ll u n gc a r c i n o m a ，c l i n i c a lp a t h o l o g i c a lp a r a m e t e r sW a sa n a l y z e d R e s u l t s1 T h ee x p r e s s i o no fW n t 2 ，E - c a d h e r i n ，I B - c a t e n i nV i m e n t i np r o t e i ni nN S C L CT h ee x p r e s s i o no fW n t 2p r o t e i ni sh i g hi nN S C L C ，p o s i t i v ee x p r e s s i o nr a t ew a s5 8 9 0 ，i ti ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nn o r m a ll u n gt i s s u e ，p o s i t i v ee x p r e s s i o nr a t e( 15 0 0 ) ( p 0 0 5 )( 2 ) T h ec o r r e l a t i o no fE - c a d h e r i np r o t e i na n di t sm R N AI n4 7c a s e so ft h eN S C L Ct i s s u e s ，E c a d h e r i np r o t e i na n di t sm R N Ae x p r e s s e ss i m u l t a n e o u s l y2c a s e s ，E - c a d h e r i np r o t e i na n di t sm R N Ad o e s n o te x p r e s ss i m u l t a n e o u s l y2 9c a s ，i nN S C L C ，t h ee x p r e s s i o no fE c a d h e r i np r o t e i na n di t sm R N Ah a v eah i g hd e g r e eo fc o n s i s t e n c y ( M c N e m a rT e s tx 2 = O 0 6P 0 0 5 )C o n c l u s i o n1 T h el o we x p r e s s i o no fE - c a d h e r i na n dt