东莞常平医院东莞常平医院生化实验室生化实验室文件编号： DGCPH-BC-SOP-04-20版序：2005-1 血清肌酐（血清肌酐（Crea）测定苦味酸法）测定苦味酸法页码：第 1 页，共 4 页1 测定方法 速率空白补偿法。 2 测定原理 肌酐苦味酸 碱性环境 肌酐苦味酸复合物 在碱性环境中，肌酐与苦味酸形成一种橘黄色的化合物，颜色的深浅与肌 酐的浓度成正比。肌酐的测定应用速率空白补偿法，可以有效的清除胆红素的 干扰。 另外，血清或血浆中的蛋白将发生非特异性的反应，为了获得准确的结果， 肌酐浓度必须达到 0.3mg/dl。 3 标本 3.1 血液：血清及肝素/EDTA 抗凝血浆（不要用肝素铵的抗凝剂） ，处理方法见标 本准备。 稳定性：2-8 7 天-20 长期储存 3.2 尿液：新鲜标本、不要冷冻、不要加防腐剂 稳定性：2-8 4 天-20 长期储存 4 试剂 4.1 试剂 来源：ROCHE 配套 试剂（详见试剂说明书） 。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：28储存至效期末 R1：打开后机上稳定 28 天 R2：打开后机上稳定 28 天 准备：直接使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE 配套校准物,具体如下：S1：0.9的 NaCl S2:C.f.a.s贮存条件：校准物在 2-8保存可保存至有效期。 准备：直接使用。 定标频率：A 试剂盒在仪器上放置 14 天后 B 试剂批号更换后 C 由质控结果决定东莞常平医院东莞常平医院生化实验室生化实验室文件编号： DGCPH-BC-SOP-04-20版序：2005-1 血清肌酐（血清肌酐（Crea）测定苦味酸法）测定苦味酸法页码：第 2 页，共 4 页4.3 质控物 来源：Precinorm (罗氏正常值质控) Precipath (罗氏病理值质控) 其它适合的质控品 贮存条件：置 2-8冰箱至有效期。 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应 在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P 或日立 7060 生化分析仪。 6 上机操作见仪器作业指导书，参数设置见附表。 7 参考范围 7.1 血清/血浆(成年人) 男性：0.70-1.20mg/dl(62-106umol/l) 女性：0.5-0.9mg/dl(44-80umol/l) 7.2 尿液：晨尿(成年人) 男性：39-259mg/dl(3450-22900umol/l) 女性：28-217mg/dl(2470-19200umol/l) 8 性能指标 本法线性范围为血液：0.1-25mg/dl 尿液：0.1-500mg/dl，不准确度：15%，不精密度血液：CV=3.4%, 尿液：CV=1.9%，灵敏度为 0.1mg/dl。X9 注意事项 9.1 R1 中含有 NaOH 溶液，具有腐蚀性;R2 中含有苦味酸，具有毒性。如果不慎沾 上，请用大量的清水清洗；如果进入眼睛应找医生处理。 9.2 由于敞开口的试剂 R1 会吸收 CO2,致使定标不稳定。一次建议使用试剂罩隔 离绝大部分试剂和空气的接触。减少吸收 CO2。 9.3 仅应用于体外诊断。 9.4 对于尿液标本，本仪器会用生理盐水或者蒸馏水自动进行 1+10 倍稀释，结果 仪器会自行计算得出。不能进行自动稀释的仪器，标本需要手工进行稀释。 检测前应离心以取出沉淀的污染物。 9.5 血清标本出现溶血、脂血或黄疸等的干扰情况参见抗干扰能力。东莞常平医院东莞常平医院生化实验室生化实验室文件编号： DGCPH-BC-SOP-04-20版序：2005-1 血清肌酐（血清肌酐（Crea）测定苦味酸法）测定苦味酸法页码：第 3 页，共 4 页9.6 不能使用苦味算法检测婴儿的溶血标本，因为此使其 HbF 的浓度大于 5%，在 此情况下，应该使用酶法肌酐检测。 9.7 换算公式：mg/dl 88.4 = mol/l 10 抗干扰能力： 10.1 标准：回收率在 90110之间。 10.2 黄疸：黄胆指数达到 10 时不会有明显干扰。 （直接和间接胆红素浓度约为 10mg/dl） 10.3 溶血：溶血指数达到 750 时不会有明显干扰。 （血红素浓度约为 750mg/dl） 10.4 脂血：乳糜指数达到 1000 明显干扰。 （甘油三酯浓度约为 2000mg/dl） 10.5 丙酮的浓度低于 50mg/dl 时不会有明显干扰。 10.6 乙酰乙酸浓度低于 20mmol/l 时不会有明显干扰。10.7-羟丁酸的浓度低于 25mmol/l 时不会有明显干扰。10.8 抗生素包括头孢霉素会造成结果的假阳性。 10.9 在反应的早期阶段产生的浊度将会造成结果的假阴性，这是由于血清中的甘 油三酯的影响造成的，但是和血脂指数没有具体的相关。标本过夜存储后这 种效应会消失。 11 临床意义 在肌代谢中，内源性肌酐来源于肌酸及肌酸磷酸盐，在肾脏功能正常时， 肌酐通过肾小球滤过。在急性/慢性肾性疾病的诊断、治疗以及对肾透析的监测 时，肌酐的测定很有意义。尿液中的肌酐浓度可以作为一些分解物（白蛋白、 淀粉酶）排泄的参考物。 1.1 肾病初期血肌酐通常不变，只有肾功能严重损伤时，血清肌酐才增加，故对 晚期肾病患者临床意义较大。其值增高 2.55 倍，提示尿毒症可能，增高 10 倍常见于尿毒症。与血尿素氮同时测定，若二者均增高，示肾严重损害, 若尿素氮高而肌酐不高,则常为肾外因素,如胃肠出血,尿路梗阻、高蛋白饮食 等。 11.2 肾衰晚期和进行性肌萎缩时,其值降低,故宜动态观察,方能对预后作出评估。东莞常平医院东莞常平医院生化实验室生化实验室文件编号： DGCPH-BC-SOP-04-20版序：2005-1 血清肌酐（血清肌酐（Crea）测定苦味酸法）测定苦味酸法页码：第 4 页，共 4 页Crea 参数设置表TEST NAME CREA R.VOLUME(R4) 0 TEST CORD 690 ABSORBANCE LIMIT 7500/INCREASE ASSAY RATE A PROZONE LIMIT 32000/UPPER REACTION TIME 10 TECHNICAL LIMIT(LOW) 18 Measurement POINT(1) 20 TECHNICAL LIMIT(HIGH) 2210 POINT(2) 25 CALIBRATION METHOD LINEAR POINT(3) 11 CALIBRATION POINT 2 POINT(4) 16 SPAN POINT 2 WAVELENGTH(PRIMARY) 505 DUPLICATE LIMIT(%) 5 SECONDARY 570 DUPLICATE LIMIT(ABS) 10 S.VOLUME(NORMAL) 11 SD LIMIT 0.1 S.VOLUME(DECREASE) 4 SENSITIVITY LIMIT(LOW) 0.57 S.VOLUME(INCREASE) 20 SENSITIVITY LIMIT(HIGH) 1.1 R.VOLUME(R1) 180 S1 ABS(LOW) 0 R.VOLUME(R2) 0 S1 ABS(HIGH) 4000 R.VOLUME(R3) 36