广州中医药大学硕士学位论文“益发”复方治疗女性型脱发的临床疗效观察及对体外培养 SD大鼠毛乳头细胞的影响姓名：陈圣丽申请学位级别：硕士专业：中医外科学指导教师：陈达灿20060401中文摘要目的：探讨中药益发复方对女性型脱发治疗效果以及对患者外周血清双氢睾酮( D H T ) 及脱氢表雄酮( D H E A ) 的表达的影响，并建立体外毛乳头细胞培养技术，初步探讨中药益发复方对毛乳头细胞的影响，以期对益发复方的作用机理进一步深入认识，为我院经验方提供科学依据，指导临床实践，并为新药开发奠定基础。方法：本研究选择4 0 例符合女性型脱发诊断标准的女性患者作为研究对象。治疗前及治疗后6 个月分别对其血清D H T 及D H E A 水平进行测定，同时选取1 5 名健康女性作为对照组，对其D H T 及D H E A 进行测定。以观察“益发”复方对其激素水平的影响，同时观察患者脱发量及油脂分泌情况的变化。为进一步探讨其作用机理，我们进行体外培养毛乳头细胞，将传4 6 代细胞用于实验，并制各不同浓度的中药益发复方的含药血清，作用于对数生长期细胞，运用噻唑兰( M T T ) 法绘制不同浓度细胞增殖盐线并进行普通电镜扫描。探讨在体外培养反应体系中“益发”复方对毛乳头细胞生长的影响。结果：1 临床疗效方面：4 0 例女性型脱发患者在治疗前血清D l - r r 水平明显高于正常组( p 0 0 5 ) ；高浓度中药组毛囊毛发生长长度及V E G F 含量低于对照组( P = 8 0 岁为4 6 9 。在3 0多岁的患者中，以I I I 型最常见，而在7 0 多岁的患者中以V I 型最为常见，这表明随着年龄增大，病情也更为严重。( 2 ) 遗传模式：A G A 的遗传特征仍然存在着争论，目前医学界普遍认为A G A 是常染色体显性遗传。这种观点最初来源于D o r o t h y l 9 1 6 年对A G A 的家系分析研究。脱发基因( B )的男性纯合子( B B ) 和杂合子( B b ) 均可发病，而女性只有在B B 时才能发病。显示男性是常染色体显性遗传，女性则呈常染色体隐性遗传，这是一种性联遗传现象，因为B能否表达还受体内雄激素的影响，带有B 的女性只有体内雄激素水平升高时才能出现发病。经典的分离分析表明，A G A 呈单基因遗传。1 9 9 5 年，B e r g f e l d 等再次提出本病为常染色体显性遗传。有人指出，在人群中可能存在这样一组征候群，临床明显表现为女性多囊卵巢综合征( P C O S ) ，男性早秃和或高血压和或糖尿病，以常染色体共显性方式遗传，可能由一个主基因所决定。另外还有多基因学说。( 三) 临床表现( 1 ) 女性型脱发的分类：O s l e n l 3 2 】首次提出女性型脱发的分类1 、早年发病：伴有雄激素分泌过多不伴雄激素分泌过多1 0“益发”复方治疗女性型脱发的，i 占床疗效观察及对体外培养s D 大鼠毛乳头细胞的影响2 、晚年绝经期后发病：伴有雄激素分泌过多不伴雄激素分泌过多( 2 ) 发病年龄：女性型脱发有2 次脱发高峰，一次在3 0 一4 0 岁，在青春期女性即可发生此型脱发一次在4 0 岁到绝经期。主要是全头部弥漫性毛发脱落，毛发变稀少，毛发变细。B e e k 和V e n n i n g 等认为绝经期女性脱发主要发生在额顶部，在脱发区域头皮活检证明毛囊缩小，位置较浅，休止期毛干增多。( 3 ) 女性型脱发为头顶部弥漫性脱发。按L u d w i n g 分型分为3 型见：I 型：头顶部毛发弥漫性稀少，毛发变细，稍有头皮暴露。型：头顶部及前头部毛发稀少，毛发变纤细，看起来有些象圣诞树样分布，裸露的头皮稍加明显。型：前头部、头顶部弥漫性脱发，头发明显稀疏，头发纤细，但发际线仍存留，不会向上退缩，虽然头皮裸露明显，但不会发生像男型脱发那样发生全光头的谢顶头。F u t t e r w e i t 等研究1 0 9 例弥漫性脱发女病人中，有1 3 病人患有多囊卵巢综合征( p c o s ) ，其导致脱发的机理主要是高雄激素血症，它的脱发均为女性型脱发之2 3 型，S p e r l m 一3 3 】等指出这种病人伴有以下1 0 个症状的体征：多毛、痤疮、脱发、原发性或继发性闭经、性欲亢进、肌肉增粗、声音低沉、乳房缩小、阴蒂增大、不孕症。查体可检出双侧肿大的卵巢。( 四) 女性型脱发的治疗：女陛型脱发的治疗方法还无太有效的疗法。目前治疗女性雄性激素脱发药物主要如下：( 1 ) 内服药物l 、调节雄激素代谢药物：非那雄胺美国默沙东制药公司开发研制的非那雄胺是一种2 型5 a R 抑制剂，能够有效降低血清、前列腺和头皮等处的D I - I T 浓度。已有大量的临床研究显示，口服非那雄胺1 m q d 能够有效的治疗男性A G A 。但是对于女性患者其疗效众说纷纭。普遍认为非那雄胺不用于育龄期妇女。尤其妊妇禁用，虽然保法止安全性良好，但妊妇不能用哺1 1乳妇女不能用：因为胎儿明茎皮肤上成纤维细胞中有型5 a 还原酶，哺乳期妇女服用保法止会使胎儿发生尿道裂畸形。因为在动物实验中发现可致雄性幼仔泌尿生殖道畸形( 如尿道下裂、外阴呈假两性畸形) 。因此尚不能用于治疗女性雄激素源性秃发。P r i c e 3 4 】等对绝经后妇女进行了为期1 年的临床研究，发现非那雄胺对绝经后妇女的维激素源性秃发缺乏疗效。F r i c e I s5 】等对1 3 7 例绝经期后妇女( 4 1 6 0 岁) 女性型脱发无效但病人对非那雄胺的耐受性良好。S h u m 3 6 】等报告4 例女性高雄激素血症脱发病人服用非那雄胺治疗有效。服药6 月、1 年、2 年、2 5 年之后毛发生长均得到改善。作者结论口服非那雄胺治疗高雄激素血症非绝经期女性脱发是有效的，口服非那雄胺对男性生殖器发育有影响，因此，服药期间要采用有效避孕措施，否则分娩男婴会发生先天性尿道裂。R o b e r t s l 3 5 】等指出口服非那雄胺治疗早年开始发病的女性型脱发治疗是有效的。2 、抗雄激素药物：主要药物有氟他胺。有研究指出女性A G A 与头皮睾酮水平增高有关，而与二氢睾酮水平升高无关，这说明了为何5 扩一还原酶抑制剂对治疗女性A G A 无效。V e x i a u m 】等证实了女性A G A 患者脱发程度与5 a 雄烷一3 ，1 7 B 一二醇葡萄糖醛酸甙及还原雄激素反应性成正比，与性激素结合球蛋白水平成反比。这说明女性A G A 应以抗雄激素药物治疗为主。C a r m i n a 3 7 】等采用随机病例对照方法将7 8 例女性A G A 患者分成3 组，分别给予抗雄激素药物氟他胺( f l u t a I i J e ) 2 5 盎m g d 、醋酸环丙孕酮5 0m g d 及非那雄胺5m g d ，治疗时间均为1 年，疗效以L u d w i g 评分、患者和研究人员满意程度作指标。结果显示氟他胺的疗效最佳。氟他胺可以降低L u d w i g 评分2 l ( 2 3 0 2 到1 8 0 1 ，P 2 0 0 )O3 5 f s1 91 063 2 81 41 31 1 ，2 3 66 3 治疗后3 个月，4 0 例患者中，显效1 7 例，有效1 3 ，无效1 0 ；经统计，显效率为4 2 5 ，总有效率为7 5 。治疗后6 个月，4 0 例患者中，显效2 0 例，有效1 4 例，无效6 例；经统计，显效率为5 5 ，总有效率( 显效+ 有效) 8 5 。6 4 治疗前及治疗6 个月后患者单项临床症状疗效情况观察。表3 治疗前及治疗6 个月后患者单项临床症状疗效情况观察2 04 益发”复方治疗士性型脱发的临床疗效观察疆对体外培养S D 大鼠毛乳头细胞的影响4以上结果显示：女性型脱发患者大多表现为精神紧张、烦躁，失眠、熬夜，倦怠乏力，便秘、经期推迟、经量少等。经治疗上症大多数好转，提示中药益发复方具有改善睡眠、缓解紧张，畅通二便等疗效。6 4 健康对照组及女性型脱发患者治疗前后D H T 水平比较( z s )表4 健康对照组及女性型脱发患者治疗前后D H T 水平比较( ；s )注：$ 代表3 组与1 组比较P O 0 5 ，# 代表2 组与l 组比较P O 0 5 。# 代表2 组与3 组比较，P 0 0 1a从表3 可以看出，治疗前患者D H T 明显高于对照组，经t 检验两组间比较差异有统计学意义( P O 0 5 ) 。治疗后D I - 1 T 水平有所下降，经统计差异有统计学意义( P 0 0 5 ) 。说明益发复方可以降低患者血清D H T 水平。但是，治疗后患者血清D H T 水平虽然有所下降，但是仍高于正常值，说明该方治疗女性型脱发需要较长一段时间。6 5 健康对照组及女性型脱发患者治疗前后血清D H E A 水平比较( 工S )表5 健康对照组及女| 生型脱发患者治疗前后血清D H E A 水平比较( ；s )注：$ 代表3 组与1 组比较P O 0 5 ， 玳表2 组与1 组比较P 0 0 5 。# 代表2 组与3 组比较，P 0 0 5 。从表4 可以看出，治疗前D H E A 虽然在正常值范围，但是接近于上限，说明患者血清D 玎认水平还是有升高趋势，与正常值相比，治疗前仍高于正常值，经t 检验两组间差异有统计学意义( P 0 0 5 ) 。治疗后D 玎认水平有所下降，经统计差异有统计学意义2 1广州申医药大学2 0 0 6 届硕士学住论文r P O 0 5 ) a7 讨论本研究对中药益发复方治疗女陛型脱发进行了临床观察，结果显示治疗后3 个月，4 0 例患者中，显效1 7 例，有效1 3 ，无效1 0 ；经统计，显效率为4 2 5 ，总有效率为7 5 ；治疗后6 个月，4 0 例患者中，显效2 0 例，有效1 4 例，无效6 例；经统计，显效率为5 5 ，总有效率( 显效+ 有效) 8 5 。提示该药物能有效地治疗女性型脱发：同时该方还具有改善睡眠、缓解紧张，畅通二便等疗效现代医学认为A G A 的发生与睾酮( 主要为游离睾酮) 及其代谢产物一二氢睾酮( D H T )的水平增高直接相关。本研究中测得治疗前女性患者的D H T 水平明显高于正常值范围，进一步证实了雄激素在A G A 发病过程中的重要作用。同时D H E A 及脱氢表雄酮硫酸脂( D H E A S ) 具有弱的雄激素样活性，是血液中由肾上腺分泌的浓度最高的内固醇激素，可直接或间接代谢生成各种激素，调节机体内分泌及代谢，产生广泛的生理效应。陈德宇教授通过实验观察发现，患者A G A 患者血清中D H E A 水平明显高于正常对照组，与之前p i t t s 研究结果相吻合。本研究结果显示，女性型脱发患者D H E A 水平均在正常值范围，但是大多接近参考值上限，该结果与陈德宇5 4 1 教授报道有出入，究其原因可能与性别差异，或者是由于样本含量较少亦或由于选择样本时发生的偏移等因素有关。今后我们可以加大样本量以进一步观察。经过治疗后我们内服中药可不同程度地降低A G A 患者血清D H T 及D H E A 水平，提示中药生发药物可能通过从整体上调节机体内分泌功能，改善激素水平，营养毛乳头细胞，来达到减少毛发脱落、促进毛发生长的作用，这或许是其治疗机制之一；此外，从服药后患者全身自觉症状，尤其是睡眠情况和一般状况都得到了相应改善。一般而言，药物治疗女性型脱发所需的时间往往比较长。由于时问的限制，本课题将疗程定为6 个月，脱发患者经中药治疗后与治疗前相比D H T 水平虽有所下降，但仍高于正常值，我们推测随着疗程的延长和治疗的深入，患者D H T 水平可能会进一步有所下降，今后在临床上可考虑将血清D H T 测定值作为雄