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酵母菌的准备和培养基的准备菌种的逐级扩大培养接种于种子罐24-48H 观察添加硫酸亚铁检测铁含量收集菌体常压低温干燥1.材料准备。 2.取出保存的菌种,接入试管斜面活化,然后经过摇瓶或者扁瓶扩大培养。逐级扩大培 养中,至少准备 3 瓶 250mL 种子液(污染得重新做) 3.将菌种接入种子罐进行扩大培养。 (种子罐) 4.酵母细胞要计数,用血球计数板常规操作计数, 要稀释适当倍数,使酵母菌种子液初 始浓度为 106107个/mL,同时观察是否污染,观察每 ml 菌落总 5.配制硫酸亚铁 FeSO4.7H2O 储备溶液,用量 400 mL ,含铁量含铁量为 100mg/ m L,用 100mL 的三角瓶装起来,0.1 MPa、121 度高压蒸汽灭菌 20 min 。 (无菌操作,把储 备溶液接进种子罐,28C ,2 0 0 转/ min 发酵 24h-48h 收集第一次菌体)6. 吸取待测铁溶液 5.00mL 放入 50mL 容量瓶中,其它试剂加入量同上,然后测定其吸 光度。根据所测吸光度在铁标准曲线上找出对应的铁含量,并计算出原待测溶液中每毫升 含铁的微克数。 符合要求,收集菌体,蒸馏水洗涤酵母泥,离心,反复三次,收集菌体,置于干燥箱 中 6080烘干至恒重收集粉末产品并检测
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