乙肝病毒乙肝病毒 DNA 知知识识概述概述乙肝病毒 DNA(HBV-DNA）是乙肝病毒的核心物质和病毒复制的基础（在医学上，病毒的繁殖被称之为“复制”）。病毒的复制是靠 DNA 的复制来完成的（DNA 指的是脱氧核糖核酸），DNA 的浓度越高，病毒的复制越活跃。乙肝病毒DNA 检测是判断乙肝病毒复制的常用手段。一般把数值大于 10 的 3 次方为阳性，把 3-5 次方认为是低量复制，5-7 为中等量，大于 7 次方为大量。乙肝两对半并不能准确的判断病毒复制情况，DNA 弥补了两对半的不足。不过由于 DNA检测技术要求严格，容易受到干扰，因此，一次结果不足以说明问题，遇到阳性，可以换医院再次检查。HBV-DNA 在病毒 DNA 携带的遗传基因发出的“指示”下，分别复制出新的病毒外壳和 DNA 核心，随后重新组装，形成大量的新病毒，释放出来继续感染其他肝细胞。 乙肝病毒 DNA 是 HBV 感染最直接、特异性强和灵敏性高的指标，HBV-DNA 阳性，提示 HBV 复制和有传染性。HBV-DNA 越高表示病毒复制越厉害，传染性强。中国及亚太地区乙肝治疗指家均指出：乙肝病毒的持续复制是乙肝致病的根本原因，乙肝治疗的根本目的是抑制病毒复制。 复复制制过过程程不同于一个真正的生物体，病毒并不通过生长和分裂等方式繁殖自身，而是像铸造机器零件一样，按照一定的 （乙肝病毒 DNA 复制过程）模具拷贝出来的。病毒 DNA 中包含有一些程序，指导病毒的遗传物质和其它一些结构蛋白组分增殖。另外，病毒DNA 中还包含有一些信息，使得单一组分能够在细胞因子的帮助下，自发组装成新的病毒颗粒。 在复制的过程中，有两个很重要的因素：一个是催化剂，另一个是模板。没有这两个因素，乙肝病毒就不能复制。乙肝病毒复制的“催化剂”就是乙肝病毒 DNA（即HBV-DNA）聚合酶。没有这种聚合酶的作用，乙肝病毒的复制就会停止。 乙肝病毒的基因组（HBV-DNA）是由两条螺旋的 DNA 链围成的一个环形结构。其中一条较长负链已经形成完整的环状；另一条长度较短的正链，呈半环状。在感染肝细胞之后，这条半环状的 DNA 链就会以负链为模板，在催化剂HBV-DNA 聚合酶的作用下延长，最终形成完整的环状。这时的乙肝病毒基因组就形成了一个完全环状的双股 DNA。把这种 DNA 称做共共价价闭闭合合环环状状 DNA（即cccDNA），可以把它看作是病毒复制的原始模板。模板形成后，病毒基因会以其中的一条 cccDNA 为模板，利用肝细胞基因中的酶和 DNA 聚合酶的“催化”，一段基因又一段基因地复制，形成负链和正链。最后再装配到一起形成新的 HBV-DNA 颗粒。 详详细细复复制制过过程程复复制制的的第第一一步步： ：黏黏附附 HBV 人侵人体后，依靠其外膜(表面抗原，HBsAg)能粘附在肝细胞膜上，当然，粘附的首要条件是 HBsAg 先要识别肝细胞膜。一旦粘附成功，HBv 的外膜也就完成了它的使命，甩掉了外膜，HBV 钻进肝细胞内。 复复制制的的第第二二步步： ：脱脱壳壳 HBV 核心部分来到肝细胞内，在肝细胞浆中还要脱掉它的“核壳”(核心抗原即 HBcAG 及 E 抗原即 HbEAG)，这样，就暴露出了它最核心部分，即乙肝病毒核酸(HBv DNA)，HBV 大有“赤膊上阵”之意。HBV-DNA 包涵着乙肝病毒的全部基因，是它主宰着 HBv 的复制的。 复复制制的的第第三三步步： ：入入核核 HBV-DNA 从肝细胞浆内进入肝细胞核，在这里它要进一步发育完善，形成了 HBv 的“共价闭合环状脱氧核塘核酸”(HBv cccDNA)。这个 cccDNA 十分了得，它深深藏匿在肝细胞核内，而肝细胞核外面有一层坚韧的核膜，目前所有药物都难以通过这坚韧的核膜，因而对 cccDNA 也无可奈何，但 cccDNA 却掌控着 HBv 所有的遗传信息，指令着 HBv 的复制。因此现有的药物想彻底消灭人体内的 HBv 真比登天还难，这些药物只能抑制 HBv 的繁殖或复制，“全部转阴”也只能是一种幻想。 复复制制的的第第四四步步： ：转转录录 HBV 在这一阶段会以 cccDNA 为“模子”，像录音带似的把 HBv cccDNA 上的所有信息全都转录到“信息核糖核酸”(mRNA)上。这个转录过程需要人体内的酶类帮忙，因为所有的病毒都不能自己独立生活必须有生物的机体帮忙，才能完成这个转录过程。HBv 也是这样。在人体酶类的帮助下完成它的复制环节。 复复制制的的第第五五步步： ：翻翻译译 在 mRNA 上已录取了 HBv 的所有信息，然后就是“翻译”了，其实就是开始制造病毒蛋白。MRNA 通过“翻译”过程，可将 HBv 的各种蛋白制造出来，如 HBv 的外膜蛋白(HBsAg)、核壳蛋白(HBeAg、HBcAg)、HBv-DNA 多聚酶等；至此，HBv 的外膜有了，HBv 的核壳也有了，这些东西只是零件，飘浮游离着的，还有重要的 HBv 最核心部分没有“制造”山来。 复复制制的的第第六六步步： ：逆逆转转录录 啥叫“逆转录”把 HBv 的遗传信息从 DNA 转录到RNA 上叫做“转录”，是正常的“顺转录”；而将 HBv 的遗传信息从 RNA 上再转录到 DNA 上，就叫做“逆转录”了。那么，HBv 的 mRNA 上的遗传信息最后就转录成了 HBV的 DNA，这时，HBv 的最核心部分(即 HBv-DNA)也算制造完成。 复复制制的的第第七七步步： ：组组装装 从第五步和第六步的复制看来，HBv 的所有零件均已制作完毕，到了第七步也就简单了，把这些零件进行组装，装配妥了，HBv 的复制也算大功告成了。 HBv 就是这样繁殖或复制的。看起来好像挺复杂，其实 HBv 复制过程是很快的一个复制周期不到 48 小时。复制出的下一代 HBv 或侵入另外的健康的肝细胞，或被释放到血液中去，在人们抽血化验时也就被检测到了。 临临床床意意义义测 HBV-DNA 可以决定抗病毒治疗的方案，具体而言，HBV DNA 检查的意义在于： 进行慢性乙肝诊断和分类， 判断是否需要治疗和什么时候开始治疗， 抗病毒治疗过程中的病情监测， 判断治疗后病情的进展，判断是否已经达到临床上的治疗目标。 乙肝 dna 检测数量多一般代表病情发展迅速、传染性强，此时需要积极的抗病毒治疗。由于 HBV-DNA 是乙肝病毒数量最灵敏的指标，是乙肝治疗是判断身体内乙肝病毒数目的一个重要而且关注的指标。所以当出现乙肝 dna检测数量多的情况，采用快速有效杀灭乙肝病毒的疗法，可以最大化的实现病情发展减缓，最短时间内改善患者症状，从而实现乙肝的快速治愈。 正正常常值值乙肝病毒 DNA 正常值是多少的测定与检测仪器和试剂有关，现在国内国产试剂是1 x 10 的 3 次方拷贝/ml ，这时体内的乙肝病毒复制活跃。 2)定量，即检测乙肝病毒在血液中的含量。定量检测结果主要是对抗病毒治疗提供检测和疗效参考。由于结果是数字的，而不是“高/低”、“阴/阳”、“正常/不正常”，所以看起来比较麻烦。确定正常值指标一定要知道所做实验的参考范围。参考范围因检测仪器、方法、试剂的不同而有差异。 荧光定量 PCR 法，是最常用的检测乙肝病毒 DNA 的方法，能反映血液中乙肝病毒 DNA 存在的多少，乙肝病毒 DNA 检测报告单上的单位通常为“ A x 10n Copies/ml(拷贝/毫升)”，表示每毫升的血清中病毒基因组的个数，该数据越大，表明病毒在人体内的复制越活跃。例如“乙肝病毒-DNA=5.1103 Copies/ml”代表每毫升血清中有 5100 个乙肝病毒。判断血清中病毒含量主要看上式中的“10n” ， n 越大，表示含量越高。在抗病毒治疗过程中， n 变小说明病毒的复制得到控制，治疗有效。通常，如果病毒含量下降至 n3 ，说明病毒基本得到控制。 治治乙乙肝肝为为何何检检测测病病毒毒 DNA由于乙肝两对半并非乙肝病毒的传染物质和致病物，换句话说不是活的乙肝病毒，因此检查乙肝两对半只反映了患者是否感染过乙肝，却不能直接地、动态地提示乙肝病毒在人体内的复制和致病情况，因此这种检验技术不能反映和量化乙肝病毒在体内复制，也不能正确指导临床用药和制定治疗方案。 为寻找一个正确合理的病毒量化指标，经多年研究，终于找到了一种可以反映乙肝病人体内的 HBV 基因量化法即 HBV-DNA 定量试验。所谓 HBV-DNA(翻成中文即“乙肝病毒脱氧核糖核酸”)就是乙肝病毒的基因。乙肝病毒基因是含有遗传信息的物质，它是复制子代乙肝病毒的基础。因此，了解了 HBV-DNA 在患者体内的消长情况，就间接地弄清了乙肝病毒的复制情况。现在肝病医师为患者作 HBVDNA 定量试验，正是临床用药和制定治疗方案的需要。如果在治疗中发现乙肝病毒的量(即 HBV-DNA 定量值)在下降，说明抗病毒治疗有效。反之，如果在治疗中发现乙肝病毒的量在上升，说明抗病毒治疗无效，需要重新选药和调整治疗方案。 正正确确理理解解乙乙肝肝病病毒毒 DNA 数数值值乙肝病毒 DNA 定量为 410 的 5 次方 copies/ml，不能解释为血液中每亳升含有乙肝病毒 40 万个，拷贝数是利用 DNA 信号扩增技术，由计算机算出血液中乙肝病毒核酸的含量，拷贝数是一个分子生物定量单位，不是简单的数量单位。拷贝数高，说明病毒核酸含量高。 由于肝脏组织中的乙肝病毒每时每刻释放到血液中的数量都在变化之中，每天检测血液中的乙肝病毒核酸含量都不相同，不能简单用乙肝病毒核酸含量解释乙肝治疗效果。 另外乙肝病毒核酸的检测灵敏性高，特异性强，实验室及仪器设备要求较高，目前具备合格实验条件的实验室并不多，各实验结果不统一，没有可比性，这是在分析乙肝病毒 DNA 定量结果时，必须加以考虑的问题。 乙乙肝肝病病毒毒 DNA 定定量量能能说说明明病病情情的的轻轻重重吗吗？乙肝病毒 DNA 定量数值只能说明游离在血液中的病毒含量，但病毒多少、含量高低与病情严重程度没有直接关系。乙肝病情严重程度须通过检测肝功能系列指标确定，这些指标包括：血清胆红素、转氨酶胆碱酯酶活力、白蛋白、前白蛋白、凝血酶原活动度、转肽酶、胆汁酸、蛋白电泳等，凝血酶原活动度、白蛋白、胆碱酯酶活力越低，说明病情越严重。 乙肝病毒 DNA 定量数值高低与病情无直接关系，如绝大多数无症状乙肝病毒携带者，尤其是少年儿童患者，乙肝病毒 DNA 检测数值均较高，乙肝病毒处于高度复制状态，而他们的病情相对轻微。不少肝硬化或肝癌患者的乙肝病毒 DNA 检测多为阴性，但病情却十分严重。 乙肝患者在进行检查或者复查时，不仅要查乙肝病毒DNA，还要检查肝功能、B 超等指标，全面衡量病情。 乙乙肝肝病病毒毒 DNA 检检测测的的作作用用： ：“乙肝两对半”和“肝功能”检测为检查乙肝的常规检查项目，但是这两种检测项目均不能测定乙肝病毒在体内的含量及复制状况，是否有必要继续服药，不能判断患者服用哪一类抗病毒药物才是对症。如果盲目给患者用药，可能会因个别分歧而引起调节无效，致使病情迁延不愈。这也是一些乙肝患者久治不愈的主要原因。 乙肝病毒 DNA 为乙型肝炎病毒中心的主要成分，临床上可从被浸染者血清中检测到它，阳性(+)透露感染者血清中存在游离乙型肝炎病毒，具有传染性。 另一方面，可检测血清中乙型肝炎病毒在体内的含量。乙肝病毒 DNA 检测为临床诊断调节提供了信得过的依据，成为临床调节疗效剖断的依据。