ICS 67040 C 53囝园 中华人民共和国国家标准GBT 50092132008贝类中麻痹性贝类毒素的测定Determination of paralytic shellfish poison in shellfish2008-1121发布2009-03-0 1实施中华人民共和国卫生部世士 中国国家标准化管理委员会及仲GBT 50092 132008刖罱 本标准修改采用国际分析家协会(AOAC)官方方法AOAC 958 0845)。 823将混合物倒回烧杯，搅拌均匀，自然沉降至上清液呈半透明状，不堵塞注射针头即可，必要时将 混合物或上清液以3 000 rrain离心5 rain，或用滤纸过滤。收集上清液备用。 83小鼠试验 831取190 g210 g健康ICR雄性小鼠6只，称重并记录质量。随机分为实验组和空白对照组(O18 molI。盐酸)两组，每组三只。 832对每只试验小鼠腹腔注射1 mL提取液或空白对照液。注射过程中若有一滴以上提取液溢出， 须将该只小鼠丢弃，并重新注射一只小鼠。833记录注射完毕时间，仔细观察并记录小鼠停止呼吸时的死亡时间(到小鼠呼出最后一1：1气止)。 834若注射样品原液后，一只或两只小鼠的死亡时间大于7 min，则需再注射至少三只小鼠以确定 样品的毒力。835若小鼠的死亡时间小于5 rain，则要稀释样品提取液后，再注射另一组小鼠(三只)，直至得到5 min7 min的死亡时间；稀释提取液时，要逐滴加入018 moIL盐酸溶液，调节pH至2040。836注意事项： 为避免毒素的危害，应戴手套进行检验操作。移液管等用过的器材应在5的次氯 酸钠溶液中浸泡1 h以上，以使毒素分解。同样，废弃的提取液等也应以5次氯酸溶液处理。小鼠尸体应按 GB 14925要求焚烧处理，其排放物应达到污物焚烧排放规定的要求。9结果的计算与判断91待测样品校正鼠单位(CMU)的确定 根据待测样品的小鼠死亡时间，在附录A中查出相应的鼠单 位数MU；根据小鼠的质量，在附录B中查出其对应的质量校正系数。同一只小鼠的鼠单位与质量校正系数相乘，即得该只小鼠的CMU。 选取检测样品受试组中三只小鼠CMU的中位数，即为该样品受试组的中位数CMU，以此值进行92 的计算。 92毒素毒力的计算与结果表述921 PSP毒力的计算与结果表述9211 PSP毒力的计算 每100 g样品巾PSP的含量按式(2)计算。 X=CMU，CFDF200(2)式中： x每100 g样品中PSP的含量，单位为微克每百克(1lg100 g)； CMU。检测样品受试组小鼠的中位数校正鼠单位；cF毒素转换系数； DF一稀释倍数；200rtu表示样品提取液定容的体积，单位为毫升(mI。)(提示：822操作中该定容体积为200 mI。)。9212 PSP毒力的结果表述 若空白对照组小鼠正常，则报告待测样品中PSP毒素 含量为：tLg100 g。922 MU毒力的计算与结果判断9221 MU毒力的计算 对于取得麻痹性贝类毒素标准品有困难的实验室，可按式(3)，使用鼠 单位MU对检验结果进行计算。4GBT 50092 1 32008yCMU，DF200(3)式中： y每100 g样品的MU值，单位为鼠单位每百克(MU100 g)；CMU。检测样品受试组小鼠的中位数校正鼠单位； DF稀释倍数；200表示样品提取液定容的体积，单位为毫升(mI。)(提示：822操作中该定容体积为200 ml。)。注：检验结果的仲裁以92 1为准。9222 MU毒力的判断与结果表述 在空白对照组小鼠正常的情况下进行如下判断 和表述： 若小鼠的死亡时间大于60 rain，则待测样品的鼠单位即相当小于 0875 MUg。 若实验组中位数死亡时间小于5 rnin，则应对样品提取液进行稀释，再选取三只小鼠进行试验，直 至得到中位数死亡时间为5 min7 nlin为止，根据最后的稀释液实验结果计算样品的鼠单位毒力，报 告该样品的鼠单位为：MU100 g。 若实验组中位数死亡时间大于7 rain，则直接计算确定样品鼠单位毒力，报告该样品的鼠单位为： MU100 g。若实验组中所有小鼠在观察1 5 rain内均不死亡，则也可报告该样品的鼠单位小于400 MU100 g。GBT 50092 1 32008附录A (规范性附录)麻痹性贝类毒素死亡时间一鼠单位的关系麻痹性贝类毒素死亡时间鼠单位的关系见表A1。 表A 1麻痹性贝类毒素死亡时间鼠单位的关系时间 鼠单位MU时间 鼠单位MUl+00”100420”2 2611 0”66 2425”2 2l11 5”38 3430”2 1 6120”26 d43矿2 1 21 725”20 7440” 2 081+30” l 6 54+4r2 041+351 3 94 750”2 00140”1I 94 55”1 96115”1 0 15 700】921 50 g33 505”189I 75r8 425IO”1 86200”7 67 5+1 5” l 832+05” 7 04520”l 80210”6 52530”1 7421 5”6 065 740”1 602720”；66545”1 6772725 j 32 5 750”1 642 730”5 006+00” l 60235”4 73 6+15” l 542+40” 4 48630”1 48245”4 2664 5 1 4 3250”4 0670。”1 39255388 7 715”1 35300”370 730”13l305”3 57 74 5” 1 28310”3 438+00” l 253l 5”3 31 8+15”1 22320”3 19 830”1 20325”3 08845”1 18330”2 98900” 1 167 3352 889 7301 13340”2 7j10OO“l 11345”2 711030”l 093 750”2 63 】l00”1 0753 755”2 561130+7l 064”2 5012 4”l 0j405”2 4 413+00” 1 0341旷2 381 4+00”101 541 5”2 32 1500”1000GBT 50092 1 32008 表A1(续)时间 鼠单位MU 时间 鼠单位Mul6oo” 0 992300”0 942 l 70旷098 24oo”0 9371800”o 97225+oo” o 934 l 900”o 9653000”0 91 720。o”o 96 4000”0 89821oo”0 95 46000”o 87522 700”0 948CBT 50092132008附录B (规范性附录) 小鼠体重校正表小鼠体重校IF系数见表1。 表B1小鼠体重校正表小鼠体重g校正系数10 o 501 o 5o 5311o5650 592o 621 2 5o6513 o 6751 3 5o 701lo 7311 5o 761 50785 lj 5 o 8l16 o 8416 5o 86 l 7o 881 7 5o90518 o93 l 8 5o 959o97I”5o 9852n1 ooo20 5l 01 521 10321 51 0422 l_0522 51 0623 107