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B yA i H u aL e iAD i s s e r t a t i o nS u b m i t t e dt oU n i v e r s i t yo fC h i n e s eA c a d e m yo fS c i e n c e sI np a r t i a lf u l f i l l m e n to ft h er e q u i r e m e n tF o rt h ed e g r e eo fM a s t e ro fS c i e n c eK u n m i n gI n s t i t u t eo fZ o o l o g y ,C h i n e s eA c a d e m yo fS c i e n c e sM a y , 2 0 1 3中国科学院大学直属院系研究生学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。尽我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体,均已在文中以明确方式标明或致谢。作者签名:中国科学院大学院直属院系学位论文授权使用声明日期:本人完全了解并同意遵守中国科学院有关保存和使用学位论文的规定,即中国科学院有权保留送交学位论文的副本,允许该论文被查阅,可以公布该论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编本学位论文。涉密的学位论文在解密后适用本声明。作者签名:日期:导师签名:日期:目录缩咯词中文摘要目录4A b s t r a c t 6第一章平顶猴在A I D S 动物模型中的应用及研究进展8引言8一、平顶猴A I D S 动物模型的优点9二、S I V H I V 感染与宿主限制因子1 12 1T R 5 1 12 2A P O B E C 3 1 22 3T e t h e r i n 132 4S A 旺I D l 一1 42 5Z A P 1 4三、H I V A I D S 平顶猴模型153 1S I V 感染平顶猴153 2H I V 感染平项猴173 3S H I V 感染平顶猴193 4H S I V 感染平顶猴2 0四、问题和展望2 2参考文献2 4第二章H I V H S I V 在北平顶猴P B M C 中的复制特性研究3 5引言3 5第一节材料与方法3 7一、实验材料一3 7二、实验方法4 01 感染性克隆的转化4 02 菌液P C R 及菌液的冻存4 03 无内毒素感染性克隆的提取4 l4 感染性克隆的酶切4 25 P C R 扩增e H y 部分序列4 26 感染性克隆的转染4 37 S I V m a c 2 3 9 病毒的培养4 48 病毒T C I D s o 的测定4 49 P B M C 的分离4 5中科院昆明动物所硕士论文( 雷爱华,2 0 1 3 )1 0 病毒在H 9 中的复制4 61 1 病毒在人P B M C 中的复制4 71 2 病毒在北平顶猴和中国猕猴P B M C 中的复制一4 81 3 E L I S A 定量检测p 2 4 p 2 7 抗原浓度4 8第二节实验结果5 l一、H S 病毒的鉴定5 l二、阳H S I V 在H 9 中的复制5 2三、H I V H S I V 在人P B M C 中的复制5 3四、卸H S I V 在北平顶猴P B M C 中的复制5 4五、H I V H S I V 在中国猕猴P B M C 中的复制。5 5第三节讨论5 6参考文献5 8第三章H I V t l S I V 感染北平顶猴P B M C 过程中A 3 G 和A 3 Fm R N A 的表达6 2引言6 2第一节材料与方法6 4一、实验材料“二、实验方法6 51 P B M C 的分离6 52 病毒感染实验6 53 E L I S A 定量检测p 2 4 p 2 7 抗原浓度6 54 感染的细胞中R N A 的提取6 55 R N A 的逆转录方法6 66 q R T - P C R 方法6 67 数据处理与统计分析6 8第二节实验结果6 9一、北平顶猴P B M C 中A 3 G 和A 3 Fm R N A 的表达6 9 二、H H S 感染H 9 细胞过程中A 3 G 和A 3 Fm R N A 的表达7 0三、H I V H S I V 感染人P B M C 过程中A 3 G 和A 3 Fm R N A 的表达7 l四、H H S 感染北平顶猴P B M C 过程中A 3 G 和A 3 Fm R N A 的表达。7 4第三节讨论7 8参考文献8 l结论8 58 6作者简历。8 92缩略词缩略词英文缩写英文全称中文全称A P o B E C3 G ,3 FC h R ME L I S AF B SVH S 矾 M o IN C SN P MP B M C sP B SP C RR TR T - q P C RS H A c q u i r e dl m m u n o d e f i c i e n c yS y n d r o m eA p o l i p o p r o t e i nBm R N A - e d i t i n ge n z y m e ,c a t a l y t i cp o l y p e p t i d e - l i k e3 G 3 FC h i n e s er h e s u sm a c a q u eE n z y m e l i n k e di m m u n o s o r b e n ta s s a yF e t a lb o v i n es e r u mH u m a nI m m u n o d e f i c i e n c yV m a s V i f - s u b s t i t u t e d 肌1I n t e r f e r o nM u l t i p l i c i t yo fi n f e c t i o nN e w b o r nc a l fs e r u mN o r t h e r np i g - t a i l e dm a c a q u eP e r i p h e r a lb l o o dm o n o n u c l e a rc e l l sP h o s p h a t e - b u f f e r e ds a l i n eP o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o nR e v e r s et r a n s c r i p t i o nR e a l - t i m eQ u a n t i t a t i v eP C RD e t e c t i n gS y s t e mS t e r i l ea l p h am o t i fa n dh i s t i d i n e a s p a r t i ca c i dd o m a i n - c o n t a i n i n gp r o t e i n1S i m i a n - h u m a ni r n m u n o d e f i c i e n c yv i r u s获得性免疫缺陷综合症载脂蛋白B m R N A 编辑酶催化多肽样蛋白3 G 3 F中国猕猴酶联免疫吸附法胎牛血清人类免疫缺陷病毒H I V - 1 为骨架含S I Vv f 病毒干扰素感染复数新生牛血清北平顶猴外周血单个核细胞磷酸盐缓冲液聚合酶链式反应逆转录实时荧光定量核酸扩增检测系统含S A M 和H D 结构域的蛋白人猴嵌合免疫缺陷病毒S I VS i m i a nI m m u n o d e f i c i e n c yV i r u s猴免疫缺陷病毒T C I D s o5 0 t i s s u ec u l t u r ei n f e c t i v ed o s e半数感染剂量T R I M 5 aT r i p a r t i t em o t i f p r o t e i n5 a三模体蛋白5 aV f fV t r i o ni n f e c t i v i t yf a c t o r病毒感染因子Z A PZ i n c f i n g e ra n t i v i r a lp r o t e i n锌指抗病毒蛋白3中科院昆明动物所硕士论文( 雷爱华,2
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