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氨基移换反应产物的鉴定姓名:俞清 专业班级:13 国贸(全英文) 上课时间:周二晚上 一、背景知识在氨基移换酶的催化下,氨基酸的 氨基和 酮酸的 酮基可以互换,这种反应称为氨基移换反应。它对于生物体内的各大类物质的代谢在相互联系、相互转化上起着很重要的作用。转氨酶的种类很多,具有专一性,最适合的 PH 接近 7.4。转氨酶广泛存在于机体的各种组织中,在肝、心、肾等组织中的谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性较高。本实验利用纸层析法,检查由 酮戊二酸和丙氨酸在酶的作用下所生成的谷氨酸,从而定性证明组织内的氨基移换作用。二、实验方法1、制备转氨酶液 2氨基溶液制备 3层析及显色:取滤纸一张,用铅笔进行 6 等分。找出圆心,用画一直径 2 cm 的细圆圈,在圆心处截一小孔(孔径约 0.2 cm)。在点样点的圆圈内用铅笔轻轻标记样品号,取毛细管依次在原点上点样,各点 3 次;点样时,要待前次点样干燥后方可再次点样,点样直径不超过 0.3 cm。安装灯芯,层析结束,取出滤纸,用镊子拔出灯芯,滤纸用电吹风吹干,再用喷雾器向滤纸均匀喷洒0.3%茚三酮-丙酮溶液,烘干后分析比较实验结果。 三、结果与分析1氨基酸层析图谱:2氨基酸层析图谱的分析:1 号反应管:有丙氨酸和谷氨酸两条显色带。 2 号反应管:只有一条丙氨酸的显色带,没有发生氨基移换反应。 3 号反应管:没有出现显色带,没有发生氨基移换反应4 号反应管:只有一条丙氨酸的显色带,没有发生氨基移换反应。 谷氨酸标准品:出现一条圆弧状的紫红色显色带。 丙氨酸标准品:出现一条圆弧状的紫红色显色带。优秀 良好 中等 及格 不及格成绩
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