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原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:日期:沙,癣乡月yE l学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文储j 锐日期:沙,矿年乡月v 日二、学位论文中的引证、引述处须注明出处;三、学位论文后所附参考文献,必须是学位申请人真正阅读参考过的文献;四、学位论文中没有郑重声明的,不能参加论文答辩。摘要摘要近年来,高尿酸血症和代谢综合征的发病率逐年增加。代谢综合征是以胰岛素抵抗( 取) 为中心的一组疾病的积累,表现为高血压、肥胖、糖脂异常等,胰岛素抵抗又导致尿酸增高,是高尿酸血症的危险因素。尿酸过高使尿酸盐大量积聚,会引发心血管疾病并加重胰岛素抵抗【l 】。二者的内在联系已成为国内外研究的热点,通过膳食因素控制或改善患者病情的方式已受到广泛关注。目的本研究观察酪蛋白磷酸肽结合高钙的膳食对高尿酸血症模型、胰岛素抵抗合并高尿酸血症模型动物的影响,并通过黄嘌呤氧化酶( X O D ) 、腺苷脱氨酶( A D A ) 、鸟嘌呤脱氨酶( G D ) 等尿酸代谢相关酶在该过程中的变化,进一步探讨可能的作用机制。材料和方法1 5 0 只大鼠随机抽取1 0 只作为空白组,余者用腺嘌呤和乙胺丁醇灌胃3 周造高尿酸血症模型后,分为C a 组、C P P s 组、C a + C P P s 组和模型组。分别用混有C a H P 0 4 、C P P s 、C a + C P P s 的饲料和基础饲料喂养2 8 d ,测其血清尿酸A ) 、总胆固醇( T C ) 、甘油三酯( T G ) 、葡萄糖( G L U ) 及动物血清、肝脏中的丙二醛( M D A ) 水平、过氧化氢酶( C A T ) 、总超氧化物歧化酶( T - S O D ) 及X O D 、A D A 、G D 的活性;2 采用同上方法造模后,将动物分为高、中、低三个剂量组,分别用含有三种剂量的C a + C P P s 的饲料和基础饲料喂养2 8 d ,测定同上指标;3 5 0 只大鼠随机抽取1 0 只作为空白组,余者用高脂高糖高盐饲料喂养8 周,再用腺嘌呤和乙胺丁醇灌胃3 周造胰岛素抵抗合并高尿酸血症模型后,分为高、中、低三个剂量组,分别用含有三种剂量的C a + C P P s 的饲料和基础饲料喂养2 8 d ,测定同上指标;结果1 C a + C P P s 干预组大鼠血清U A 、T C 、T G 、M D A 水平和肝脏中A D A 活性明显低于模型组( P 0 0 5 ) ;造模后,模型组大鼠的血清H D L C 水平低于空白组( P O 0 5 ) ,三个干预组中,以混合干预组的大鼠血清L D L C 水平最低。( 见表2 - 4 )酪蛋白磷酸肽、膳食钙以及二者复合物对高尿酸血症大鼠的影响和作用机制的研究表2 4 酪蛋白磷酸肽、膳食钙及二者复合物对高尿酸血症大鼠血清G L U 、H D L - C 、L D L - C的影响( 夏士s )与模型组相比,P O 0 5 ) 。( 见表2 1 0 )酪蛋白磷酸肽、膳食钙以及二者复合物对高尿酸血症大鼠的影响和作用机制的研究表2 1 0 高尿酸血症大鼠在干预期间血清A D A 活性( U m L ) 的比较( z 士s )与模型组相比,P 0 0 5 ) 。各干预组大鼠血清和肝脏中G D 的活性与模型组没有差异。通过干预,各干预组大鼠血清中A D A 活性低于模型组的同时高于空白组,但不明显,其中,以C P P s 组大鼠的血清A D A 活性最低,各组与模型组的差异没有统计学意义;相对于模型组,各干预组大鼠肝脏中该酶的活性均较低,其中以C a 组和混合干预组大鼠肝脏中该酶的活性低于空白组也明显低于模型组( P 0 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ) ;肝脏中该酶的活性随着干预剂量的升高有增强的趋势,其中中、高剂量组与模型组的差异有统计学意义( 尸 0 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ) ;肝脏中,三个干预组大鼠的M D A 水平同样下降,其中以高剂量组与模型组的差异最为明显,有统计学意义( P 0 0 5 ,P 0 。0 5 ) ,而高剂量组大鼠的血清该酶活性出现了明显的降低表现,与模型组相比,差异有统计学意义( 尸 O 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ) 。由以下两表可以看出,模型组大鼠血清A D A 活性明显高于模型组和其他各干预组( P 0 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ) ,但是仍然可以看出各干预组大鼠H D L C 水平高于模型组和空白组,其中中剂量组大鼠H D L C 水平最高。模型组大鼠的L D L C 水平高于空白组,二者之间的差异有统计学意义( 尸 O 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 5 ) 。( 见表4 2 )酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠的影响和作用机制的研究表4 2 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠血清 ) L C 和L D L _ C 的影响( 牙s )与模型组相比,幸P 0 0 53 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠血清G L U 、玳S 以及H O M A I R 的影响:实验结束后,模型组大鼠的血清G L U 、I N S 以及胰岛素抵抗指数均高于空白组和各干预剂量组,并且,三个剂量组大鼠G L U 、I N S 以及胰岛素抵抗指数水平随着干预剂量的增加而降低,三个剂量组中以高剂量组大鼠的G L U 、I N S以及胰岛素抵抗指数水平最接近空白组。( 见表4 3 )酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠的影响和作用机制的研究表4 3 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠血清G L U 、I N S 以及H O M A I R 的影响( 牙s )与模型组相比,P O 0 5 ,料P O 0 14 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠血清和肝脏中M D A 水平和T - S O D 、C A T 活性的影响:模型组大鼠的血清T - S O D 活性低于空白组,各干预剂量组与模型组之间没有明显差异;三个剂量组大鼠肝脏中T - S O D 活性均高于模型组和空白组,其中中、高剂量组大鼠该酶活性与模型组相比,差异有统计学意义( 尸 0 0 5 ,P 0 0 5 ) 。三个干预剂量组的血清M D A 水平低于模型组和空白组,干预剂量越低,大鼠血清M D A 水平也越低,各干预组中低、中剂量组与模型组的差异有统计学意义( 尸 0 0 5 ,P 0 0 5 ) ;三个剂量组大鼠肝脏中M D A 水平随着干预剂量的增加而降低,均低于模型组和空白组,且与模型组的差异有统计学意义( 户 O 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 1 ) 。三个剂量组和空白组大鼠血清C A T 活性高于模型组,差异有统计学意义( 尸 O 0 5 ,P 0 0 5 ,P 0 0 1 ,P 0 0 5 ) ,其中中剂量组大鼠血清C A T 活性最接近空白组,而高剂量组大鼠该酶活性最高;空白组、模型组和三个剂量组大鼠肝脏中C A T 活性没有明显差别,但是根据表3 5 可以看出,干预组大鼠的该酶活性略高于模型组和空白组。( 见表4 - 4 、4 5 )3 2酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠的影响和作用机制的研究表4 4 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠血清中M D A 水平和T - S O D 、C A T 活性的影响( 孑士s )M D AS o DC A T 组别N ( n m o l m L ) ( U I m L ) ( U m L )空白组103 5 8 5 i - 0 4 7 019 8 3 6 6 j :4 0 0 2 4 916 士0 2 7 5 。模型组83 7 5 8 i - 0 6 1 21 9 2 3 7 4 + 5 2 4 72 8 4 9 - a :1 4 9 5 低剂量组83 3 9 6 - 士o 3 9 118 3 4 5 0 - J :1 6 7 3 93 2 0 3 士1 0 5 7 中剂量组83 1 8 3 :L - 0 2 3 6 1 9 7 2 3 0 - J :3 5 0 64 5 9 6 - J :1 5 3 6 高剂量组83 0 6 6 - t - 0 2 2 9 18 7 3 7 1 士8 6 0 66 0 4 4 4 - 2 2 2 5 “F 值5 6 0 25 0 6 74 5 9 6 尸00010 0 0 30 0 1 5与模型组相比,P 0 0 5 ,幸幸氏0 0 1表4 5 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠肝脏中 M D A 水平和T - S O D 、C A T 活性的影响( 君士s )M D AT S O DC A T 组别N ( n m o l m g p r 0 0 ( U m g p m t ) ( U m g p r o t )空白组1 00 5 0 7 :L - 0 0 4 4 3 0 0 7 1 士5 5 4 13 2 5 9 - 1 - 0 5 9 2 模型组80 5 9 8 士- 0 0 7 92 6 7 8 9 a = 1 3 0 4 43 3 7 4 = L - 0 9 1 2 低剂量组80 4 7 9 i - 0 0 6 6 3 3 11 0 - J :5 8 7 53 6 2 7 :t - 0 8 6 7 中剂量组80 4 6 2 - 圭o 0 3 6 4 0 2 7 4 士2 8 4 7 3 7 9 2 - - 士o 5 2 2 高剂量组80 4 2 6 - 士- 0 0 4 8 ”4 0 6 0 1 士1 7 9 1 4 3 4 8 1 - 0 7 4 1F 值9 8 1 43 4 1 12 3 8 2 尸00000 0 5 60 0 7 4与模型组相比,P 0 0 5 ,宰尸 o 0 13 3酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠的影响和作用机制的研究4 2 酪蛋白磷酸肽结合高钙膳食对胰岛素抵抗合并高尿酸血症大鼠干预机制研究4 2 1 材料与方法4 2 1 1实验动物S P F 级雄性S D 大鼠5 0 只,体重1 4 0 1 6 0 9 ,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,合格证号:0 1 4 3 4 3 5 ,许可证编号:S C X K ( 京) 2 0 0 7 2 0 0 1 。所有动物健康状况良好。动物饲养及指标测定在河南省疾病预防控制中心卫生检验检测中心完成。4 2 1 2 实验药品
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