中国药科大学药物分析教研室第六章 芳酸及其酯类药物的分析芳酸及其酯类药物的分析Analysis of Aromatic carboxylic acids & esters*1药物分析中国药科大学药物分析教研室Contents4Chemical structure & feature123IdentificationDetection of specific impurities Assay中国药科大学药物分析教研室第一节 水杨酸类1阿司匹林 aspirin2对氨基水杨酸钠 PAS-Na3双水杨酯 salsalate4贝诺酯 benorilate水杨酸 SA salicylic acid中国药科大学药物分析教研室结 构 式阿司匹林aspirin对氨基水杨酸钠PAS-Na双水杨酯salsalate贝诺酯benorilate 中国药科大学药物分析教研室1. 苯甲酸钠 sodium benzoate2. 甲芬那酸 mefenamic acid3. 羟苯乙酯 ethylparoben4. 丙磺舒 probenecid第二节 苯甲酸类苯甲酸 benzoic acid中国药科大学药物分析教研室结 构 式羟苯乙酯 ethylparoben甲芬那酸 mefenamic acid苯甲酸钠sodium benzoate丙磺舒 probenecid中国药科大学药物分析教研室第三节 其他芳酸类1 12 2氯贝丁酯 clofibrate布洛芬 ibuprofen其他芳酸类中国药科大学药物分析教研室结 构 式氯贝丁酯clofibrate布洛芬ibuprofen中国药科大学药物分析教研室特 点1 12 23 34 4v均有苯环、羧酸或其酯v水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基直接与苯环相连v除了酸性基团外，各自具有本身的官能团v分子中苯环、羧酸和取代基的相互影响，使芳酸的酸性强度各有不同中国药科大学药物分析教研室紫堇色赭色米黄色pH5.06.0T.S.FeCl3pH46中性溶液三氯化铁反应鉴 别中国药科大学药物分析教研室布洛芬中国药科大学药物分析教研室重氮化偶合反应具体方法见芳香胺类药物的鉴别氧化反应异羟肟酸铁反应甲芬那酸H2SO4 深蓝色黄色黄色并产生绿色荧光中国药科大学药物分析教研室Fe/3紫色中国药科大学药物分析教研室水解产物的反应分解产物的反应UV特征吸收 IR吸收光谱中国药科大学药物分析教研室v特殊杂质的由来与方法检查v Acetyl Salicylic Acid 副产物SAASAAspirin生产工艺生产工艺中国药科大学药物分析教研室SA炽灼残渣苯酚易碳化物溶液的澄清度重金属AspirinAspirin中国药科大学药物分析教研室PAS-Na 间氨基酚间氨基酚Ch.PCh.P 样品样品3.03.0g g用用乙醚提取乙醚提取，加入，加入HH2 2OO， 用用HClHCl滴定液（滴定液（0.020.02mol/L)mol/L)滴定，生成滴定，生成 杂质杂质 HClHCl（转溶入转溶入HH2 2OO相，甲基橙指示剂）。相，甲基橙指示剂）。滴定液不得过滴定液不得过 0.300.30mlmlUSP HPLCUSP HPLC法法 C C18 18 NaHNaH2 2POPO4 4(0.05mol/L)-Na(0.05mol/L)-Na2 2HPOHPO4 4(0.05mol/L)(0.05mol/L) -CH-CH3 3OH(OH(含氢氧化四丁基铵含氢氧化四丁基铵1.91.9g)g) (425(425：425425：150)150) 254nm254nm检测 内标：磺胺检测 内标：磺胺中国药科大学药物分析教研室供试品自身对照法 BP（1998）反相TLC 高低浓度对比法取羟苯乙酯丙酮液 1.0%和0.01%，2ul， 254nm查荧光，前一个 任何第二个斑点的大小 和强度不应超过后一个 。羟苯乙酯供 试 品对 照 品中国药科大学药物分析教研室氯贝丁酯对氯酚（0.0025%） 挥发性杂质（0.5%） GC法 5%SE-30 2m 160，N2 FID杂质以归一化法求得中国药科大学药物分析教研室v含量测定酸碱滴定法酸碱滴定法Acid-base titration method以ASA及其制剂为例 苯甲酸 pKa 4.20水杨酸 pKa 2.98 酸性较强羧酸邻位羧酸邻位- -OHOH，吸电子基团，使吸电子基团，使 酸性增加；并有氢键，更增加了酸性增加；并有氢键，更增加了 其极性其极性 因此，可采取直接滴定法中国药科大学药物分析教研室 直接滴定法直接滴定法vpKa 36 的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 vpKa 69 的药物要用非水溶液滴定法中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性， 可消除滴定误差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定过程易水解本法特点：简单注意点：若注意点：若SASA不合格，不宜采用本法不合格，不宜采用本法Aspirin 丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法中国药科大学药物分析教研室 水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法 Residual titration after hydrolysisUSP23方法：取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4中国药科大学药物分析教研室 两步滴定法两步滴定法 Two-step titration用于Aspirin片测定片剂中有稳定剂水解产物 水杨酸SA HAc 枸橼酸 Citric acid酒石酸 Trataric acid为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴 定法中国药科大学药物分析教研室第二步第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA， TA，SA，HAc中国药科大学药物分析教研室双相滴定法双相滴定法 Titrimetry in two phasesCh.P 2005用于苯甲酸钠的测定苯甲酸钠苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断因此，利用苯甲酸能溶苯甲酸能溶于有机溶剂于有机溶剂的性质，采用双相滴定法HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸钠)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙 橙红色中国药科大学药物分析教研室 柱分配色谱柱分配色谱- -紫外分光光度法紫外分光光度法Column Partition Chromatogr.ASA capsule 等制剂除用上述两步滴定法外，最好用色谱法，可以分离酸性杂质分离酸性杂质和辅料辅料以及稳定剂稳定剂等，经分离后同时测定ASA与SA如USP用柱分配色谱-UV测定ASA Capsule中国药科大学药物分析教研室Column Partition Chromatography, CPC200300mm60mm4mm22mm层 析 柱玻 棉压 榨 棒350mm21mm中国药科大学药物分析教研室 阿司匹林栓 Aspirin suppositoriesv测定法 咖啡因乙醇溶液4mg/ml对照品溶液：ASA对照品(约0.15g)50.0ml 内标5.0ml供试品溶液：取本品5粒，精密称定( ) ，4050微温熔融，不断搅拌下冷却至 室温，精密称取适量(ASA约0.15g) (W)内标5.0ml50.0ml乙醇50.0ml2.0ml2.0ml乙醇50.0mlHPLC中国药科大学药物分析教研室C18 甲醇-水-正丁醇 (30:20:1) 237nm 内标：苯甲酸色谱条件血清样品的处理HPLC图 血清中ASA&SA的测定血清样品100 l 加入HClO4(30%) 50 l 、不同浓度 ASA& SA对照品 稀释液、内标(各 浓度均为10 g/ml混合 2min离心进样10320.溶剂峰 1.ASA 2.内标物 3.SA