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完成实验完成实验提出问题提出问题作出假设作出假设设计实验设计实验分析结果,得出结论分析结果,得出结论探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 该该探究活动中探究活动中涉及涉及4 4个科学个科学 方法:方法: (1 1)数学模型法;)数学模型法; (2 2)抽样检测法;)抽样检测法; (3 3)显微观察法;)显微观察法; (4 4)微生物培养法。)微生物培养法。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 关注本实验中的几个关键点:关注本实验中的几个关键点: 酵母菌的计数酵母菌的计数 利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种 常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数 法。法。 优点:直观、快速。优点:直观、快速。 适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体 培养基中菌体的计数。培养基中菌体的计数。 此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为 总菌计数法总菌计数法。 酵母菌的计数酵母菌的计数 (1 1)计数工具)计数工具血球计数板血球计数板实物图实物图正面图正面图侧面图侧面图计数室计数室滴液处滴液处 血球计数 板是一种 专门用于 计算较大 单细胞微 生物的一 种仪器。 计数时, 常采用样 方法。 探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数 (1 1)计数工具)计数工具血球计数板血球计数板探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 放大后的计数池放大后的计数池 每块计数板由每块计数板由H H形凹槽分为形凹槽分为2 2个个 同样的计数池。同样的计数池。 每个计数池分为每个计数池分为9 9个大方格。个大方格。2525个中格个中格1616个小格个小格1616个中格个中格2525个小格个小格25X16 = 40025X16 = 400小格小格16X25 = 40016X25 = 400小格小格每个计数室(大方格)共有每个计数室(大方格)共有400400小格,总容积为小格,总容积为0.1mm0.1mm3 3* *抽样检测:抽样检测: 516=80516=80个小格个小格抽样检测:抽样检测: 425=100425=100个小格个小格 酵母菌的计数酵母菌的计数 (2 2)计算:)计算:每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少?探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母细胞个数酵母细胞个数/mL=/mL=所数小方格中细胞总数所数小方格中细胞总数x400x10x400x104 4x x稀释倍数稀释倍数所数的小方格数所数的小方格数 酵母菌的计数酵母菌的计数 (3 3)计数的操作)计数的操作 稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓, ,可可 不必稀释。不必稀释。 镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检 。若有污物,则需清洗后才能进行计数。若有污物,则需清洗后才能进行计数。 加样品:在清洁干燥的血球计数板加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片盖上盖玻片,再用,再用无无 菌细口滴管菌细口滴管将稀释的酵母菌液由将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘盖玻片边缘滴入一小滴滴入一小滴 (将计数室充满即可),让菌液沿缝隙(将计数室充满即可),让菌液沿缝隙自行渗入自行渗入计数室计数室 。注意不可有气泡产生注意不可有气泡产生。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数 (3 3)计数的操作)计数的操作 显微计数:静止显微计数:静止5 5分钟后,先用低倍镜(分钟后,先用低倍镜(16101610)找)找 到到 计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格,计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格, 每个计数室选取每个计数室选取5 5个(或个(或4 4个)中方格中的菌体进行计个)中方格中的菌体进行计 数。每个小方格内约有数。每个小方格内约有5-105-10个菌体为宜。个菌体为宜。对于压在小对于压在小 方格界线上的酵母菌应取方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角相邻两边及顶角计数。计数。如如遇遇 酵母出芽酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为两两 个个菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的 值来计算样品的含菌量。值来计算样品的含菌量。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化的动态变化 酵母菌的计数酵母菌的计数 (4 4)血球计数板的清洗:)血球计数板的清洗: 使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗,使用完毕后,将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗, 切勿用硬刷洗刷切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。,洗完后自行晾干或用吹风机吹干。 镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物镜检,观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物 。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。若不干净,则必须重复洗涤至干净为止。探究培养液中酵母菌种群数量探究培养液中酵母菌种群数量
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