实验一 血涂片的制作及免疫细胞的形态观察山东师范大学生命科学学院 杨桂文一、实验目的掌握微量采血及血涂片的制作方法利用光学显微镜观察免疫细胞的形态进一步理解并掌握这些免疫细胞的功能 二、实验原理血涂片是临床化验中最常规的技术，也是血液学研究中的最基本技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏（Wright）染液染色后，不同免疫细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将免疫细胞进行分类计数。 三、实验器材l器材：医用一次性采血针、酒精棉球、 镊 子、经脱脂洗净的载玻片等l试剂：迪夫快速细胞染色液(Diff Quik cell stain)。四、实验步骤1采血采血前用75%酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤；动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后，刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要（因含单核细胞较多）。2涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血涂片的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以3040度为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（如图），推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀。3染色 待涂片在空气中完全干燥后； 把涂片浸泡于迪夫A溶液2030秒； 于磷酸盐缓冲液的染缸中洗掉迪夫A溶液，稍甩干缓冲液； 再把涂片浸泡于迪夫B溶液2030秒； 水洗、干燥、镜检。4封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。5观察分别用低倍、高倍和油镜观察血涂片，分辨不同的血细胞类型。五、实验报告1.画出出并分析比较各种免疫细胞类型和形态特征。2.说明这些免疫细胞的功能。