第6章 肠道杆菌 p67 （enterobacteriaceae）1. 肠道杆菌的共性。2. 大肠埃希菌的致病性。3. 沙门菌引起的疾病及分离与鉴定程序。4. Widal test，结果判断。重点：肠道杆菌：寄生于肠道的一大群生物学性状相似的G-中等大小杆菌的总称。多数正常菌群部分条件致病菌少数致病菌肠道杆菌2. 培养：兼性厌氧，普通琼脂平板培养， 肠道SS培养基（选择培养基）分离培养，结果： 肠道非致病菌：红色大菌落，肠道致病菌：无色透明小菌落。肠道杆菌的共同特征：1. 形态特征：G-中等大小的杆菌，无芽胞， 多数有周鞭毛及菌毛。基础培养基，乳糖（底物），胆盐、煌绿（抑制非致病菌），中性红（指示剂）。SS培养基：沙门菌属（Salmonella）志贺菌属（Shigella）SS平板（鉴别/选择培养基）肠道非致病菌 乳糖（） 肠道致病菌 乳糖 （ - ）3.生化反应：活泼，分解多种糖类、蛋白质。乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌与非致病菌。代表种 动力 葡萄糖 乳糖 靛基质 H2S 尿素酶 埃希菌属 大肠埃希菌 + + + + - -志贺菌属 痢疾志贺菌 - + - +/- - -沙门菌属 伤寒沙门菌 + + - - -/+ -变形杆菌属 变形杆菌 + + - + + +四类肠道杆菌的生化反应:菌体抗原（ O-Ag）鞭毛抗原（ H-Ag）毒力抗原（Vi-Ag、K-Ag)5. 抵抗力：弱。胆盐和煌绿对非致病性肠 道杆菌有选择性抑制作用。4. 抗原构造6. 变异：耐药性变异。维生素（营养） 细菌素（拮抗）条件免疫力 寄居部位改变第1节 埃希菌属（Escherichia） 大肠埃希菌（大肠杆菌， E.coli）2. 特殊菌株：腹泻。1. 正常菌群：人类出生不久进入肠道，并延续终 身，合成条件致病菌肠外感染。一、生物学特性1. 形态染色：G-中等大小杆菌，周鞭毛及普通菌毛和性菌毛。2. 培养特性：SS培养基上形成红色大菌落。3. 生化特点：葡萄糖 +、乳糖 +，动力+，H2S-O抗原：170种 4. 抗原构造 H抗原：56种K抗原：100种血清型表示方式：O:k:H 如：O111:k58:H2二、致病性（一）致病物质1. 黏附素：定植因子抗原,2. 外毒素志贺毒素 耐热肠毒素（ST） 不耐热肠毒素（LT）3. 其他致病物质内毒素 荚膜 载铁蛋白 型分泌系统：LT ST 对热稳定性 不耐热 耐热65C30min灭活 耐100C20min亚单位 A、B a、b黏膜受体 GM1神经节苷脂 不清致泻机理 活化腺苷酸环化酶 活化鸟苷酸环化酶 ATP cAMP GTP cGMPB亚单位与肠黏膜上皮细胞膜表面 GM1 神经节苷脂结合，A亚单位穿过细胞膜激活 腺苷酸环化酶，使ATP cAMP 肠液分泌 致泻。 型分泌系统：犹如分子注射器，是指细菌接触宿主细胞后，能向宿主细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统，约由20余种蛋白组成。 1. 肠外感染（条件致病菌）：（二）所致疾病 寄居部 位改变肠外感染化脓性感染泌尿道感染肠内正常菌群 腹膜炎 阑尾炎 败血症 新生儿脑膜炎尿道炎 膀胱炎 肾盂肾炎ETEC：婴幼儿、旅游者腹泻 EI EC：大儿童、成人腹泻 EPEC：婴儿腹泻 EHEC：O157:H72. 肠内感染（某些血清型）：胃肠炎（腹痛、腹 泻、恶心、呕吐）外源性大肠杆菌污染的食 物、饮水三、卫生细菌学检查大肠菌群数：作为饮水、食品等粪便污染的 指标之一。我国卫生标准规定：每1000ml饮水3个每100ml瓶装汽水、果汁5个大肠菌群细菌总数每ml样品100个第3节 沙门菌属（Salmonella）沙门菌属：血清型2500余种甲型付伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 希氏沙门菌伤寒沙门菌 付伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌 猪霍乱沙门菌等。常见致病性沙门菌：一、生物学性状1. 形态染色：G- ，有菌毛及周鞭毛。 2. 培养特性：SS培养基：无色透明小菌落。3. 生化反应：葡 乳 尿 靛 H2S 动力 伤寒沙门菌 + - - - -+ +甲型副伤寒沙门菌 - - - -+ +乙型副伤寒沙门菌 - - - + + 4. 抗原结构 ：O抗原/菌体抗原（脂多糖）：耐热100C1h，数种 沙门菌共有，产生IgM型抗体。H抗原/鞭毛抗原（蛋白质）：不耐热60C30min灭活，具特异性，产生IgG型抗体。Vi抗原/毒力抗原：抗原性弱，Vi抗体可用于检测带 菌者。二、致病性与免疫性（一）致病物质1. 侵袭力菌毛 型分泌系统 侵袭蛋白 Vi抗原2. 内毒素：白细胞下降 3. 外毒素：肠毒素（某些菌株产生）沙门菌 粪口途径 肠壁、肠系膜淋巴结 血（第1W：第1次菌血症）全身各脏器（肝、脾、肾、胆囊等）血 （第2W ：第2次菌血症） 肠壁 再次侵入肠壁淋巴组织随粪便排出体外 肠壁坏死、溃疡、出血（第23W：型超 敏反应）病情开始好转（34W后） （二）所致疾病 1. 肠热症 （伤寒、副伤寒）并发症：肠出血、肠穿孔2. 食物中毒：最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。3. 败血症: 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。 4. 无症状带菌者：15%。（三）免疫性胞内寄生菌，细胞免疫，一定程度免疫力。三、微生物学检查（一）病原菌的分离与鉴定1. 标本采取：2. 步骤 ： 1W 血 发病第 2 W 粪便或尿全程 骨髓 粪便、尿 SS培养基 无色可疑菌落血、骨髓 肉汤培养基 双糖铁培养基（增菌）生化反应 玻片凝集反应 （二）血清学诊断：肥达试验（Widal test）概念：用已知伤寒杆菌O、H抗原和甲副、肖氏、希氏伤寒杆菌H抗原与病人血清作试管凝集试验，检查患者血清中有无相应抗体及其效价。原理：试管凝集试验诊断菌液 未知抗体定性、定量 实验方法：1:20 1:80 1:320 1:12801:40 1:160 1:640 阴对伤寒O-Ag伤寒H-Ag甲副H-Ag乙副H-AgTOPBPATHv正常抗体水平： 当 TO1:80TH1:160 有诊断意义PA、PB1:80v动态观察：逐周复查，抗体效价逐次递增4倍有 诊断价值。 判定结果时要考虑因素：O H 抗体型： IgM IgG 出现时间: 早 晚 消失时间: 快 慢 特异性: 弱 强O、H均高：伤寒、副伤寒可能性大 O、H均低：伤寒、副伤寒可能性小 H高、O不高：预防接种或非特异性回忆反应 O高、H不高：感染早期或其它沙门菌引起的交叉反应 vO与H抗体的诊断意义：Widal test1. 简述肠道杆菌的共同生物学特性。2. 分析大肠杆菌的致病性。3. 设计一个肠道杆菌分离培养和鉴定程序。习题