实验十目的基因的诱导性表达-

实验十目的基因的诱导性表达一、实验目的v了解学习目的基因诱导性表达过程以及表达产物的活性检测方法二、实验原理v诱导性表达方法v表达产物的检测诱导性表达方法 vIPTG诱导目的基因高效表达原理v乳糖操纵子模型v表达载体表达产物的检测产量高低活性高低不同三、实验器材v转化的Ecoli、LB培养基、Amp、IPTG、 1XPBS、离心管、指形管、移液器、超声波裂解仪等。四、实验步骤v将新鲜菌种液（已含有目的基因）以1:100接种于LB（Amp）培养基中，37振荡培养至 OD600=0.4-0.6 ；v加IPTG至终浓度为0.5mM, 30振荡培养5h;v 4, 8000rpm离, 10min离心收集细细菌；vPBS充分洗涤涤2次后进进行超声波裂解菌体，分别别收集裂解上清和沉淀进进行SDS-PAGE，分析蛋白表达情况并确定诱导诱导表达的最佳条件。