儿科学专业优秀论文儿科学专业优秀论文 MDR1MDR1 C1236TC1236T 多态性在癫痫患者中的分布及多态性在癫痫患者中的分布及其与癫痫耐药的关系其与癫痫耐药的关系关键词：癫痫关键词：癫痫 多药耐药基因多药耐药基因 抗癫痫药物抗癫痫药物 单核苷酸多态性单核苷酸多态性 耐药机制耐药机制摘要：癫痫（epilepsy，EP）是小儿神经系统最为常见的疾病之一，约有 30 的患儿经过多种抗癫痫药物正规治疗后仍有发作，称为耐药性癫痫。大量研究 发现癫痫耐药与多药耐药基因（MDR1）及其编码的 P-糖蛋白（P- glycoprotein，P-gp）有关。近年来基因的单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）在遗传学研究中得到广泛应用，MDR1 基因 SNP 与该基因和 P-gp 的表达和功能的改变密切相关，研究 MDR1 基因的 SNP 有 助于阐明个体表型差异的原因，解释癫痫患者对抗癫痫药物反应差异的易感性。 C1236T 位点是基因 MDR1 基因发生频率较高的位点之一，其位于第 12 外显子， 它的变异属于不引起氨基酸变化的同义突变，该位点多态性与多种不同的疾病 发生耐药均有关系，目前尚缺乏其与癫痫患者对抗癫痫药物反应关系的研究。 目的: 研究多药耐药基因 MDR1 C1236T 多态性在癫痫患者中的分布特点并探 讨其与癫痫患者对抗癫痫药物反应的相关性，进一步研究该位点多态性在不同 年龄、发作类型、不同病因的癫痫患者中的分布及其与对药物反应的相关性。 方法: 1、从山东大学齐鲁医院及淄博红十字会昌国医院癫痫专科就诊的癫痫 患者中，随机选取耐药性癫痫患者 70 例（耐药组） ，对抗癫痫药物疗效良好的 患者 88 例（敏感组） ，抽取静脉血并提取基因组 DNA。2、用多聚合酶链反应扩 增后继以限制性内切酶片断长度分析法（PCR-RFLP 方法）分别测定两组患者 MDR1 基因 C1236T 位点的基因型频率和等位基因频率。3、用 SPSS130 软件进 行统计学分析，以 Plt;005 代表差异显著性。 结果: 1、全部 158 例癫痫患者基因 MDR1 C1236T 位点基因型为 CC 型 30 例，CT 型 49 例，TT 型 79 例。70 例耐药组患者基因 MDR1 C1236T 位点基因型为 CC 型 16 例、TT 型 35 例、 CT 型 19 例；88 例敏感组：基因型 CC 型 14 例、CT 型 30、TT 型 44 例。CC 基因 型在耐药组的频率高于敏感组；TT 基因型在两组的频率大致相当；CT 基因型在 敏感组的频率要高于耐药组。耐药组 C 等位基因频率略高于敏感组。耐药组和 敏感组病例中的基因型频率相比较，差异均无统计学意义（Pgt;005） ； 两组之间 T 和 C 等位基因频率比较，Pgt;005，差异无统计学意义。 2、将 158 例癫痫患者按照年龄分为两部分，其中（1）小于等于 12 岁癫痫患儿 共 45 例，应用 x2 检验比较耐药组和敏感组病例的 C1236T 的基因型频率和等位 基因频率，差异均没有统计学意义（Pgt;005） 。 （2）大于 12 岁癫痫患 者 113 例，耐药组和敏感组病例比较，C1236T 的基因型频率和等位基因频率的 差异均没有统计学意义（Pgt;005） 。 3、根据临床资料及脑电图检查， 将研究对象按照其发作类型分为（1）部分性发作癫痫患者 46 例，基因型频率 分析因样本少，未能进行统计学分析。而 C 等位基因频率在耐药组患者 （500）高于敏感组（288） ，T 等位基因频率则低于敏感组，两者相比 差异有统计学意义（P=0038） 。 （2）全面性发作癫痫患者 35 例，耐药组和敏 感组基因型频率和等位基因频率比较均无统计学意义（Pgt;005） 。 （3） 混合性发作癫痫患者 67 例，两组患者基因型频率和等位基因频率比较均无统计 学意义（Pgt;005） 。 4、根据临床资料、脑电图检查及影像学资料，将研究对象按照发病原因分为症状性癫痫和特发性或隐源性癫痫两组。 （1）症 状性癫痫患者共 56 例，对耐药组和敏感组病例进行统计学分析，结果基因型频 率和等位基因频率的差异都没有统计学意义（Pgt;005） 。 （2）特发性或 混合性癫痫患者共 94 例，耐药组和敏感组间比较，结果其基因型频率和等位基 因频率均无统计学意义（Pgt;005） 。 结论: 1、MDR1 基因 C1236T 位点 CC、CT、TT 基因型频率在耐药癫痫患者和对抗癫痫药物敏感患中的分布差 异无统计学意义；两组间 C、T 等位基因频率相比较，差异也无统计学意义，提 示 MDR1 C1236T 位点多态性与汉族癫痫患者对抗癫痫药物反应的差异不存在相 关性。 2、对癫痫患者按照年龄分组，分别对儿童和成人的 MDR1 基因多态位 点 C1236T 进行分析，两组无明显差异，说明年龄不是 MDR1 基因 C1236T 位点分 布差异的原因，C1236T 位点多态性与儿童或成人癫痫患者对抗癫痫药物反应的 差异均不存在相关性。 3、按照发作类型分组后，部分性发作患者 C 等位基 因在耐药癫痫患者中的分布较敏感组患者明显增高，说明 C 等位基因可能是部 分性发作癫痫患者发生耐药的危险因素，可能是部分性发作癫痫患者容易发生 耐药的原因。 4、按照病因分类后，MDR1 C1236T 多态位点在症状性癫痫和 特发性或隐源性癫痫中的分布差异无统计学意义，说明 MDR1 C1236T 位点多态 性与不同病因的癫痫患者对抗癫痫药物的反应没有相关性。正文内容正文内容癫痫（epilepsy，EP）是小儿神经系统最为常见的疾病之一，约有 30的 患儿经过多种抗癫痫药物正规治疗后仍有发作，称为耐药性癫痫。大量研究发 现癫痫耐药与多药耐药基因（MDR1）及其编码的 P-糖蛋白（P- glycoprotein，P-gp）有关。近年来基因的单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）在遗传学研究中得到广泛应用，MDR1 基因 SNP 与该基因和 P-gp 的表达和功能的改变密切相关，研究 MDR1 基因的 SNP 有 助于阐明个体表型差异的原因，解释癫痫患者对抗癫痫药物反应差异的易感性。 C1236T 位点是基因 MDR1 基因发生频率较高的位点之一，其位于第 12 外显子， 它的变异属于不引起氨基酸变化的同义突变，该位点多态性与多种不同的疾病 发生耐药均有关系，目前尚缺乏其与癫痫患者对抗癫痫药物反应关系的研究。 目的: 研究多药耐药基因 MDR1 C1236T 多态性在癫痫患者中的分布特点并探 讨其与癫痫患者对抗癫痫药物反应的相关性，进一步研究该位点多态性在不同 年龄、发作类型、不同病因的癫痫患者中的分布及其与对药物反应的相关性。 方法: 1、从山东大学齐鲁医院及淄博红十字会昌国医院癫痫专科就诊的癫痫 患者中，随机选取耐药性癫痫患者 70 例（耐药组） ，对抗癫痫药物疗效良好的 患者 88 例（敏感组） ，抽取静脉血并提取基因组 DNA。2、用多聚合酶链反应扩 增后继以限制性内切酶片断长度分析法（PCR-RFLP 方法）分别测定两组患者 MDR1 基因 C1236T 位点的基因型频率和等位基因频率。3、用 SPSS130 软件进 行统计学分析，以 Plt;005 代表差异显著性。 结果: 1、全部 158 例癫痫患者基因 MDR1 C1236T 位点基因型为 CC 型 30 例，CT 型 49 例，TT 型 79 例。70 例耐药组患者基因 MDR1 C1236T 位点基因型为 CC 型 16 例、TT 型 35 例、 CT 型 19 例；88 例敏感组：基因型 CC 型 14 例、CT 型 30、TT 型 44 例。CC 基因 型在耐药组的频率高于敏感组；TT 基因型在两组的频率大致相当；CT 基因型在 敏感组的频率要高于耐药组。耐药组 C 等位基因频率略高于敏感组。耐药组和 敏感组病例中的基因型频率相比较，差异均无统计学意义（Pgt;005） ； 两组之间 T 和 C 等位基因频率比较，Pgt;005，差异无统计学意义。 2、将 158 例癫痫患者按照年龄分为两部分，其中（1）小于等于 12 岁癫痫患儿 共 45 例，应用 x2 检验比较耐药组和敏感组病例的 C1236T 的基因型频率和等位 基因频率，差异均没有统计学意义（Pgt;005） 。 （2）大于 12 岁癫痫患 者 113 例，耐药组和敏感组病例比较，C1236T 的基因型频率和等位基因频率的 差异均没有统计学意义（Pgt;005） 。 3、根据临床资料及脑电图检查， 将研究对象按照其发作类型分为（1）部分性发作癫痫患者 46 例，基因型频率 分析因样本少，未能进行统计学分析。而 C 等位基因频率在耐药组患者 （500）高于敏感组（288） ，T 等位基因频率则低于敏感组，两者相比 差异有统计学意义（P=0038） 。 （2）全面性发作癫痫患者 35 例，耐药组和敏 感组基因型频率和等位基因频率比较均无统计学意义（Pgt;005） 。 （3） 混合性发作癫痫患者 67 例，两组患者基因型频率和等位基因频率比较均无统计 学意义（Pgt;005） 。 4、根据临床资料、脑电图检查及影像学资料， 将研究对象按照发病原因分为症状性癫痫和特发性或隐源性癫痫两组。 （1）症 状性癫痫患者共 56 例，对耐药组和敏感组病例进行统计学分析，结果基因型频 率和等位基因频率的差异都没有统计学意义（Pgt;005） 。 （2）特发性或 混合性癫痫患者共 94 例，耐药组和敏感组间比较，结果其基因型频率和等位基因频率均无统计学意义（Pgt;005） 。 结论: 1、MDR1 基因 C1236T 位点 CC、CT、TT 基因型频率在耐药癫痫患者和对抗癫痫药物敏感患中的分布差 异无统计学意义；两组间 C、T 等位基因频率相比较，差异也无统计学意义，提 示 MDR1 C1236T 位点多态性与汉族癫痫患者对抗癫痫药物反应的差异不存在相 关性。 2、对癫痫患者按照年龄分组，分别对儿童和成人的 MDR1 基因多态位 点 C1236T 进行分析，两组无明显差异，说明年龄不是 MDR1 基因 C1236T 位点分 布差异的原因，C1236T 位点多态性与儿童或成人癫痫患者对抗癫痫药物反应的 差异均不存在相关性。 3、按照发作类型分组后，部分性发作患者 C 等位基 因在耐药癫痫患者中的分布较敏感组患者明显增高，说明 C 等位基因可能是部 分性发作癫痫患者发生耐药的危险因素，可能是部分性发作癫痫患者容易发生 耐药的原因。 4、按照病因分类后，MDR1 C1236T 多态位点在症状性癫痫和 特发性或隐源性癫痫中的分布差异无统计学意义，说明 MDR1 C1236T 位点多态 性与不同病因的癫痫患者对抗癫痫药物的反应没有相关性。 癫痫（epilepsy，EP）是小儿神经系统最为常见的疾病之一，约有 30的患儿 经过多种抗癫痫药物正规治疗后仍有发作，称为耐药性癫痫。大量研究发现癫 痫耐药与多药耐药基因（MDR1）及其编码的 P-糖蛋白（P-glycoprotein，P- gp）有关。近年来基因的单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）在遗传学研究中得到广泛应用，MDR1 基因 SNP 与该基因 和 P-gp 的表达和功能的改变密切相关，研究 MDR1 基因的 SNP 有助于阐明个体 表型差异的原因，解释癫痫患者对抗癫痫药物反应差异的易感性。C1236T 位点 是基因 MDR1 基因发生频率较高的位点之一，其位于第 12 外显子，它的变异属 于不引起氨基