海洋生物学专业毕业论文海洋生物学专业毕业论文 精品论文精品论文 共轭亚油酸两种主要异构共轭亚油酸两种主要异构体的分离及生理功能研究体的分离及生理功能研究关键词：共轭亚油酸关键词：共轭亚油酸 异构体分离异构体分离 生理功能生理功能 预防动脉粥样硬化预防动脉粥样硬化 降低胆固醇降低胆固醇摘要：c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 是共轭亚油酸最主要的两种异构体，具有多 项生理功能。能防止和减轻初期癌症，降低人体内脂肪储存量，增加蛋白质的 合成，提高人体的免疫能力等。研究表明，这两种异构体有不同的作用方式和 机理。t10，c12CLA 侧重在减脂增肌、防止肥胖、降低胆固醇、抗动脉粥样硬 化及抗癌等方面，c9，t11CLA 则可促进生长、提高饲料效率等。 这两种异 构体的分离技术，是深入进行 CLA 生理活性研究的前提。尽管对 CLA 的功能已 有很多研究，但对 CLA 与血管内皮损伤和不同异构体共轭亚油酸对动脉粥样硬 化的影响研究报道不多。 本研究采用三种方法：优化尿素包合法、冷冻结晶 法和生物酶法，对共轭亚油酸两种主要异构体进行了分离研究，完成了中试生 产，通过动物实验，探讨了 CLA 对动脉粥样硬化的影响。主要结果如下： 1、尿素包合法对共轭亚油酸两种异构体的分离结果 中试规模尿素包后的液 相中得到 CLA 的总量为 93.68，t10，c12CLA 和 c9，t11CLA 两种异构体的比 例达到 2.34：1。尿素结晶中包合 CLA 的总含量为 68.89，c9，t11CLA：t10，c12CLA 比例达 1.54：1。 2、冷冻结晶法对共 轭亚油酸两种异构体的分离结果 用乙醇作溶剂，-56对 CLA 乙酯进行冷冻 分离，在乙醇与 CLA 乙酯的比例为 18：1，反应 120h 时固相中得到 t10，c12CLA：c9，t11CLA 达 16.07：1 产品，远高于尿素包合法，收率为 5.4。当乙醇与 CLA 乙酯的比例为 9：1 时，冷冻 31h 后，冷冻结晶后所得液 相中 c9，t11CLA 比 t10，c12CLA 的比例为 1.63：1。回收率为 82.6。因此低 温冷冻分离法适于生产两种异构体比例较高且附加值高的产品。 3、酶催化 酯化法对共轭亚油酸两种异构体的分离结果 用脂肪酶 Lipase AY30 进行异构 体分离，优化反应条件，得 CLA 脂肪酸部分 t10，c12CLA 与 c9，t11CLA 的比例 达 2.63：1；CLA 乙酯部分 c9，t11CLA 与 t10，c12CLA 的最高比可达 4.72：1。说明酶催化分离两种 CLA 异构体，是一种非常有开发前途的技术。 4、无溶剂体系酶促酯化反应合成共轭亚油酸甘油三酯的研究结果 通过酯化 反应，筛选 4 种固定化脂肪酶催化共轭亚油酸和甘油合成共轭亚油酸油脂。其 中脂肪酶 Novozym435 的催化酯化反应活性最高，反应酯化率可达 94.11。采 用旋转筛筐法重复利用 5 次酯化率仍为 87.28。Novozym435 对共轭亚油酸异 构体也有一定的选择性，但效果不如 Lipase AY30。 5、共轭亚油酸对动脉 粥样硬化的影响 CLA 在浓度 1-5mol-L 的情况下，剂量和时间依赖性地刺 激体外培养的 VEC 细胞生存率；可以部分阻断饱和脂肪酸 PA、SA 对血管内皮细 胞的损伤作用，提高存活率。用上述中试实验得到的不同比例 c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 共轭亚油酸产品，饲喂动脉粥样硬化模型大鼠 8 周，后实验结果 表明实验组 TG、TC、LDL 均低于模型组，HDL 较模型组高，且能升高 SOD 活性， 降低 MDA 水平，显示不同异构体比例的共轭亚油酸能调节血脂，抗脂质过氧化 损伤，减轻对动脉内膜的毒性。在一定程度上起到预防动脉粥样硬化形成的作 用。为共轭亚油酸异构体的开发提供有价值的理论依据和生产手段。正文内容正文内容c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 是共轭亚油酸最主要的两种异构体，具有多项 生理功能。能防止和减轻初期癌症，降低人体内脂肪储存量，增加蛋白质的合 成，提高人体的免疫能力等。研究表明，这两种异构体有不同的作用方式和机 理。t10，c12CLA 侧重在减脂增肌、防止肥胖、降低胆固醇、抗动脉粥样硬化 及抗癌等方面，c9，t11CLA 则可促进生长、提高饲料效率等。 这两种异构 体的分离技术，是深入进行 CLA 生理活性研究的前提。尽管对 CLA 的功能已有 很多研究，但对 CLA 与血管内皮损伤和不同异构体共轭亚油酸对动脉粥样硬化 的影响研究报道不多。 本研究采用三种方法：优化尿素包合法、冷冻结晶法 和生物酶法，对共轭亚油酸两种主要异构体进行了分离研究，完成了中试生产， 通过动物实验，探讨了 CLA 对动脉粥样硬化的影响。主要结果如下： 1、尿 素包合法对共轭亚油酸两种异构体的分离结果 中试规模尿素包后的液相中得 到 CLA 的总量为 93.68，t10，c12CLA 和 c9，t11CLA 两种异构体的比例达到 2.34：1。尿素结晶中包合 CLA 的总含量为 68.89，c9，t11CLA：t10，c12CLA 比例达 1.54：1。 2、冷冻结晶法对共 轭亚油酸两种异构体的分离结果 用乙醇作溶剂，-56对 CLA 乙酯进行冷冻 分离，在乙醇与 CLA 乙酯的比例为 18：1，反应 120h 时固相中得到 t10，c12CLA：c9，t11CLA 达 16.07：1 产品，远高于尿素包合法，收率为 5.4。当乙醇与 CLA 乙酯的比例为 9：1 时，冷冻 31h 后，冷冻结晶后所得液 相中 c9，t11CLA 比 t10，c12CLA 的比例为 1.63：1。回收率为 82.6。因此低 温冷冻分离法适于生产两种异构体比例较高且附加值高的产品。 3、酶催化 酯化法对共轭亚油酸两种异构体的分离结果 用脂肪酶 Lipase AY30 进行异构 体分离，优化反应条件，得 CLA 脂肪酸部分 t10，c12CLA 与 c9，t11CLA 的比例 达 2.63：1；CLA 乙酯部分 c9，t11CLA 与 t10，c12CLA 的最高比可达 4.72：1。说明酶催化分离两种 CLA 异构体，是一种非常有开发前途的技术。 4、无溶剂体系酶促酯化反应合成共轭亚油酸甘油三酯的研究结果 通过酯化 反应，筛选 4 种固定化脂肪酶催化共轭亚油酸和甘油合成共轭亚油酸油脂。其 中脂肪酶 Novozym435 的催化酯化反应活性最高，反应酯化率可达 94.11。采 用旋转筛筐法重复利用 5 次酯化率仍为 87.28。Novozym435 对共轭亚油酸异 构体也有一定的选择性，但效果不如 Lipase AY30。 5、共轭亚油酸对动脉 粥样硬化的影响 CLA 在浓度 1-5mol-L 的情况下，剂量和时间依赖性地刺 激体外培养的 VEC 细胞生存率；可以部分阻断饱和脂肪酸 PA、SA 对血管内皮细 胞的损伤作用，提高存活率。用上述中试实验得到的不同比例 c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 共轭亚油酸产品，饲喂动脉粥样硬化模型大鼠 8 周，后实验结果 表明实验组 TG、TC、LDL 均低于模型组，HDL 较模型组高，且能升高 SOD 活性， 降低 MDA 水平，显示不同异构体比例的共轭亚油酸能调节血脂，抗脂质过氧化 损伤，减轻对动脉内膜的毒性。在一定程度上起到预防动脉粥样硬化形成的作 用。为共轭亚油酸异构体的开发提供有价值的理论依据和生产手段。 c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 是共轭亚油酸最主要的两种异构体，具有多项生理 功能。能防止和减轻初期癌症，降低人体内脂肪储存量，增加蛋白质的合成， 提高人体的免疫能力等。研究表明，这两种异构体有不同的作用方式和机理。 t10，c12CLA 侧重在减脂增肌、防止肥胖、降低胆固醇、抗动脉粥样硬化及抗 癌等方面，c9，t11CLA 则可促进生长、提高饲料效率等。 这两种异构体的分离技术，是深入进行 CLA 生理活性研究的前提。尽管对 CLA 的功能已有很多 研究，但对 CLA 与血管内皮损伤和不同异构体共轭亚油酸对动脉粥样硬化的影 响研究报道不多。 本研究采用三种方法：优化尿素包合法、冷冻结晶法和生 物酶法，对共轭亚油酸两种主要异构体进行了分离研究，完成了中试生产，通 过动物实验，探讨了 CLA 对动脉粥样硬化的影响。主要结果如下： 1、尿素 包合法对共轭亚油酸两种异构体的分离结果 中试规模尿素包后的液相中得到 CLA 的总量为 93.68，t10，c12CLA 和 c9，t11CLA 两种异构体的比例达到 2.34：1。尿素结晶中包合 CLA 的总含量为 68.89，c9，t11CLA：t10，c12CLA 比例达 1.54：1。 2、冷冻结晶法对共 轭亚油酸两种异构体的分离结果 用乙醇作溶剂，-56对 CLA 乙酯进行冷冻 分离，在乙醇与 CLA 乙酯的比例为 18：1，反应 120h 时固相中得到 t10，c12CLA：c9，t11CLA 达 16.07：1 产品，远高于尿素包合法，收率为 5.4。当乙醇与 CLA 乙酯的比例为 9：1 时，冷冻 31h 后，冷冻结晶后所得液 相中 c9，t11CLA 比 t10，c12CLA 的比例为 1.63：1。回收率为 82.6。因此低 温冷冻分离法适于生产两种异构体比例较高且附加值高的产品。 3、酶催化 酯化法对共轭亚油酸两种异构体的分离结果 用脂肪酶 Lipase AY30 进行异构 体分离，优化反应条件，得 CLA 脂肪酸部分 t10，c12CLA 与 c9，t11CLA 的比例 达 2.63：1；CLA 乙酯部分 c9，t11CLA 与 t10，c12CLA 的最高比可达 4.72：1。说明酶催化分离两种 CLA 异构体，是一种非常有开发前途的技术。 4、无溶剂体系酶促酯化反应合成共轭亚油酸甘油三酯的研究结果 通过酯化 反应，筛选 4 种固定化脂肪酶催化共轭亚油酸和甘油合成共轭亚油酸油脂。其 中脂肪酶 Novozym435 的催化酯化反应活性最高，反应酯化率可达 94.11。采 用旋转筛筐法重复利用 5 次酯化率仍为 87.28。Novozym435 对共轭亚油酸异 构体也有一定的选择性，但效果不如 Lipase AY30。 5、共轭亚油酸对动脉 粥样硬化的影响 CLA 在浓度 1-5mol-L 的情况下，剂量和时间依赖性地刺 激体外培养的 VEC 细胞生存率；可以部分阻断饱和脂肪酸 PA、SA 对血管内皮细 胞的损伤作用，提高存活率。用上述中试实验得到的不同比例 c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 共轭亚油酸产品，饲喂动脉粥样硬化模型大鼠 8 周，后实验结果 表明实验组 TG、TC、LDL 均低于模型组，HDL 较模型组高，且能升高 SOD 活性， 降低 MDA 水平，显示不同异构体比例的共轭亚油酸能调节血脂，抗脂质过氧化 损伤，减轻对动脉内膜的毒性。在一定程度上起到预防动脉粥样硬化形成的作 用。为共轭亚油酸异构体的开发提供有价值的理论依据和生产手段。 c9，t11CLA 和 t10，c12CLA 是共轭亚油酸最主要的两种异构体，具有多项生理 功能。能防止和减轻初期癌症，降低人体内脂肪储存量，增加蛋白质的合成， 提高人体的免疫能力等。研究表明，这两种异构体有不同的作用方式和机理。 t10，c12CLA 侧重在减脂增肌、防止肥胖、降低胆固醇、抗动脉粥样硬化及抗 癌等方面，c9，t11CLA 则可促进生长、提高饲料效率等。 这两种异构体的 分离技术，是深入进行 CLA 生理活性研究的前提。尽管对 CLA 的功能已有很多 研究，但对 CLA 与血管内