动物遗传育种与繁殖专业优秀论文动物遗传育种与繁殖专业优秀论文 利用性成熟前山羊卵泡卵母细利用性成熟前山羊卵泡卵母细胞体外生产胚胎的研究胞体外生产胚胎的研究关键词：卵母细胞关键词：卵母细胞 卵泡发育卵泡发育 体外受精体外受精 性成熟性成熟 山羊山羊摘要：本研究以长江三角洲白山羊为研究对象，分别研究了羔山羊不同日龄及 激素剂量对卵泡发育及卵巢组织学的影响；与成年羊对比，研究了性成熟前山 羊卵母细胞体外减数分裂进程；体外培养成熟的卵母细胞进行体外受精，研究 了性成熟前山羊卵母细胞卵龄、成熟过程和受精过程中卵丘存在程度对卵母细 胞发育能力的影响，并且比较了性成熟前山羊不同直径卵母细胞体外发育能力， 进一步就卵母细胞体外受精及受精卵体外培养方案进行了优化，旨在提高性成 熟前山羊卵泡卵母细胞体外胚胎生产效率。 1日龄和激素剂量对羔山羊 COCs 的获得影响显著。FSH 处理后 45 日龄羔羊卵巢可见卵泡数、COCs 数及未 扩展 COCs 数均显著高于 90 日龄(Plt;0.05)。45 日龄 FSH70 组卵泡数和 COCs 数显著高于 FSH 40 组，但未扩展 COCs 数低于 FSH 40 组。FSH70 组裸卵比 例较高，未扩展 COCs 数较 FSH 40 组低。FSH 40 组 45 日龄羔羊平均每只单侧 卵巢获得可用卵母细胞 23.331.53 枚，显著高于其它各组(Plt;0.05)。 切片组织学观察发现：FSH 处理对原始卵泡、初级卵泡的直径影响不显著，但 对卵子直径影响显著，均属正常卵子直径范围内(130150m)。FSH 40 处理 组生长卵泡数明显高于 FSH70 处理组，其中 FSH 70 组卵泡较 FSH 40 组大。 2成年山羊和性成熟前山羊卵母细胞体外成熟过程中减数分裂各时相出现时间 不同。在整个体外成熟培养过程中，性成熟前山羊卵母细胞 GV 期存在时间较长 (7.21h)，在成熟培养 23.96h 后才能进入 M期；成年羊卵母细胞 GV 期存在时 间相对较短(2.94h)，大约在成熟培养 20.64h 后，进入 M期。体外成熟培养 24h 和 27h，成年羊卵母细胞成熟率差异不显著，但是性成熟前山羊卵母细胞成 熟率差异显著(Plt;0.05)。与成年山羊相比，羔山羊卵母细胞孤雌发育能 力较差，可能与其卵母细胞本身成熟缺陷有关。 3体外成熟 24h、27h 和 30h，性成熟前山羊卵母细胞受精率、卵裂率差异不显著(Pgt;0.05)，但 显著高于 21h 组(Plt;0.05)。成熟 24h 和 27h 卵母细胞桑椹胚囊胚率显著 高于成熟 21h 和 30h 组(Plt;0.05)。 4去除卵丘的卵母细胞和裸卵体 外培养可以成熟，但受精率、卵裂率、桑椹胚囊胚率显著低于带卵丘的卵母细 胞(Plt;0.05)。成熟前机械去除卵丘严重影响性成熟前山羊卵母细胞发育 能力。13 层和多层卵丘的卵母细胞受精率、卵裂率、桑椹胚囊胚率差异不显 著(Pgt;0.05)。 5性成熟前山羊卵母细胞受精前卵丘存在程度对其受 精率和卵裂率影响不显著(Pgt;0.05)，但受精前完全去掉卵丘严重影响胚 胎后续发育能力，桑椹胚囊胚率显著低于带卵丘的卵母细胞。卵丘完整组与部 分卵丘去除组卵母细胞体外发育能力差异不显著。 6性成熟前山羊卵母细 胞 GVBD 发生率及成熟率随其直径的增加而显著增加。成熟培养 0h，直径 lt;110m 卵母细胞 GV 期比例显著高于其它各组。随着卵母细胞直径的 增加，GVBD 发生率也增加。成熟培养 27h，直径gt;135m 组 M期比率 (75.00)显著高于其它组(Pgt;0.05)，其中直径lt;110m 组卵母 细胞体外培养不能达到 M期。 7性成熟前山羊卵母细胞受精率、卵裂率 随其直径的增加而显著提高(Plt;0.05)。卵母细胞直径lt;110m、110125m、125135m 组桑椹胚囊胚率差异不显著 (Pgt;0.05)，但显著低于直径gt;135m 组(Plt;0.05)。 8TALP 液较 BO 液更适合性成熟前山羊卵母细胞体外受精所用。 9SOFaa 较 CRlaa 更适合性成熟前山羊早期胚胎体外培养所用。正文内容正文内容本研究以长江三角洲白山羊为研究对象，分别研究了羔山羊不同日龄及激 素剂量对卵泡发育及卵巢组织学的影响；与成年羊对比，研究了性成熟前山羊 卵母细胞体外减数分裂进程；体外培养成熟的卵母细胞进行体外受精，研究了 性成熟前山羊卵母细胞卵龄、成熟过程和受精过程中卵丘存在程度对卵母细胞 发育能力的影响，并且比较了性成熟前山羊不同直径卵母细胞体外发育能力， 进一步就卵母细胞体外受精及受精卵体外培养方案进行了优化，旨在提高性成 熟前山羊卵泡卵母细胞体外胚胎生产效率。 1日龄和激素剂量对羔山羊 COCs 的获得影响显著。FSH 处理后 45 日龄羔羊卵巢可见卵泡数、COCs 数及未 扩展 COCs 数均显著高于 90 日龄(Plt;0.05)。45 日龄 FSH70 组卵泡数和 COCs 数显著高于 FSH 40 组，但未扩展 COCs 数低于 FSH 40 组。FSH70 组裸卵比 例较高，未扩展 COCs 数较 FSH 40 组低。FSH 40 组 45 日龄羔羊平均每只单侧 卵巢获得可用卵母细胞 23.331.53 枚，显著高于其它各组(Plt;0.05)。 切片组织学观察发现：FSH 处理对原始卵泡、初级卵泡的直径影响不显著，但 对卵子直径影响显著，均属正常卵子直径范围内(130150m)。FSH 40 处理 组生长卵泡数明显高于 FSH70 处理组，其中 FSH 70 组卵泡较 FSH 40 组大。 2成年山羊和性成熟前山羊卵母细胞体外成熟过程中减数分裂各时相出现时间 不同。在整个体外成熟培养过程中，性成熟前山羊卵母细胞 GV 期存在时间较长 (7.21h)，在成熟培养 23.96h 后才能进入 M期；成年羊卵母细胞 GV 期存在时 间相对较短(2.94h)，大约在成熟培养 20.64h 后，进入 M期。体外成熟培养 24h 和 27h，成年羊卵母细胞成熟率差异不显著，但是性成熟前山羊卵母细胞成 熟率差异显著(Plt;0.05)。与成年山羊相比，羔山羊卵母细胞孤雌发育能 力较差，可能与其卵母细胞本身成熟缺陷有关。 3体外成熟 24h、27h 和 30h，性成熟前山羊卵母细胞受精率、卵裂率差异不显著(Pgt;0.05)，但 显著高于 21h 组(Plt;0.05)。成熟 24h 和 27h 卵母细胞桑椹胚囊胚率显著 高于成熟 21h 和 30h 组(Plt;0.05)。 4去除卵丘的卵母细胞和裸卵体 外培养可以成熟，但受精率、卵裂率、桑椹胚囊胚率显著低于带卵丘的卵母细 胞(Plt;0.05)。成熟前机械去除卵丘严重影响性成熟前山羊卵母细胞发育 能力。13 层和多层卵丘的卵母细胞受精率、卵裂率、桑椹胚囊胚率差异不显 著(Pgt;0.05)。 5性成熟前山羊卵母细胞受精前卵丘存在程度对其受 精率和卵裂率影响不显著(Pgt;0.05)，但受精前完全去掉卵丘严重影响胚 胎后续发育能力，桑椹胚囊胚率显著低于带卵丘的卵母细胞。卵丘完整组与部 分卵丘去除组卵母细胞体外发育能力差异不显著。 6性成熟前山羊卵母细 胞 GVBD 发生率及成熟率随其直径的增加而显著增加。成熟培养 0h，直径 lt;110m 卵母细胞 GV 期比例显著高于其它各组。随着卵母细胞直径的 增加，GVBD 发生率也增加。成熟培养 27h，直径gt;135m 组 M期比率 (75.00)显著高于其它组(Pgt;0.05)，其中直径lt;110m 组卵母 细胞体外培养不能达到 M期。 7性成熟前山羊卵母细胞受精率、卵裂率 随其直径的增加而显著提高(Plt;0.05)。卵母细胞直径 lt;110m、110125m、125135m 组桑椹胚囊胚率差异不显著 (Pgt;0.05)，但显著低于直径gt;135m 组(Plt;0.05)。 8TALP 液较 BO 液更适合性成熟前山羊卵母细胞体外受精所用。 9SOFaa 较 CRlaa 更适合性成熟前山羊早期胚胎体外培养所用。本研究以长江三角洲白山羊为研究对象，分别研究了羔山羊不同日龄及激素剂 量对卵泡发育及卵巢组织学的影响；与成年羊对比，研究了性成熟前山羊卵母 细胞体外减数分裂进程；体外培养成熟的卵母细胞进行体外受精，研究了性成 熟前山羊卵母细胞卵龄、成熟过程和受精过程中卵丘存在程度对卵母细胞发育 能力的影响，并且比较了性成熟前山羊不同直径卵母细胞体外发育能力，进一 步就卵母细胞体外受精及受精卵体外培养方案进行了优化，旨在提高性成熟前 山羊卵泡卵母细胞体外胚胎生产效率。 1日龄和激素剂量对羔山羊 COCs 的 获得影响显著。FSH 处理后 45 日龄羔羊卵巢可见卵泡数、COCs 数及未扩展 COCs 数均显著高于 90 日龄(Plt;0.05)。45 日龄 FSH70 组卵泡数和 COCs 数显著高于 FSH 40 组，但未扩展 COCs 数低于 FSH 40 组。FSH70 组裸卵比例较 高，未扩展 COCs 数较 FSH 40 组低。FSH 40 组 45 日龄羔羊平均每只单侧卵巢 获得可用卵母细胞 23.331.53 枚，显著高于其它各组(Plt;0.05)。切片 组织学观察发现：FSH 处理对原始卵泡、初级卵泡的直径影响不显著，但对卵 子直径影响显著，均属正常卵子直径范围内(130150m)。FSH 40 处理组生 长卵泡数明显高于 FSH70 处理组，其中 FSH 70 组卵泡较 FSH 40 组大。 2成年山羊和性成熟前山羊卵母细胞体外成熟过程中减数分裂各时相出现时间 不同。在整个体外成熟培养过程中，性成熟前山羊卵母细胞 GV 期存在时间较长 (7.21h)，在成熟培养 23.96h 后才能进入 M期；成年羊卵母细胞 GV 期存在时 间相对较短(2.94h)，大约在成熟培养 20.64h 后，进入 M期。体外成熟培养 24h 和 27h，成年羊卵母细胞成熟率差异不显著，但是性成熟前山羊卵母细胞成 熟率差异显著(Plt;0.05)。与成年山羊相比，羔山羊卵母细胞孤雌发育能 力较差，可能与其卵母细胞本身成熟缺陷有关。 3体外成熟 24h、27h 和 30h，性成熟前山羊卵母细胞受精率、卵裂率差异不显著(Pgt;0.05)，但 显著高于 21h 组(Plt;0.05)。成熟 24h 和 27h 卵母细胞桑椹胚囊胚率显著 高于成熟 21h 和 30h 组(Plt;0.05)。 4去除卵丘的卵母细胞和裸卵体 外培养可以成熟，但受精率、卵裂率、桑椹胚囊胚率显著低于带卵丘的卵母细 胞(Plt;0.05)。成熟前机械去除卵丘严重影响性成熟前山羊卵母细胞发育 能力。13 层和多层卵丘的卵母细胞受精率、卵裂率、桑椹胚囊胚率差异不显 著(Pgt;0.05)。 5性成熟前山羊卵母细胞受精前卵丘存在程度对其受 精率和卵裂率影响不显著(Pgt;0.05)，但受精前完全去掉卵丘严重影响胚 胎后续发育能力，桑椹胚囊胚率显著低于带卵丘的卵母细胞。卵丘完整组与部 分卵丘去除组卵母细胞体外发育能力差异不显著。 6性成熟前山羊卵母细 胞 GVBD 发生率及成熟率随其直径的增加而显著增加。成熟培养 0h，直径 lt;110m 卵母细胞 GV 期比例显著高于其它各组。随着卵母细胞直径的 增加，GVBD 发生率也增加。成熟培养 27h，直径gt;135m 组 M期比率 (75.00)显著高于其它组(Pgt;0.05)，其中直径lt;110m 组卵母 细胞体外培养不能达到 M期。 7性成熟前山羊卵母细胞受精率、卵裂率 随其直径的增加而