动物遗传育种与繁殖专业优秀论文动物遗传育种与繁殖专业优秀论文 大黄鱼大黄鱼 DNADNA 分子标记技术及其分子标记技术及其在遗传育种中应用研究在遗传育种中应用研究关键词：大黄鱼关键词：大黄鱼 遗传育种遗传育种 人工雌核发育人工雌核发育 属间杂交属间杂交 微卫星标记微卫星标记 DNADNA 分子标记分子标记摘要：本研究采用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库进行大黄鱼微 卫星分离，人工冷休克和静水压法诱导大黄鱼雌核发育二倍体，利用 AFLP 和 SSR 标记技术对大黄鱼的养殖群体与野生群体的遗传多样性、人工雌核发育亲 子代间的遗传关系进行了鉴定分析，并进行了大黄鱼和兢鱼的属间杂交试验。 结果表明： 1、运用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库分离大黄 鱼微卫星标记，获得 82(57.4)个含有核心重复数大于 7 的微卫星序列，其中 18 条送 GenBank(登陆号 EU022002EU022019)。设计合成的 18 对大黄鱼微卫 星引物经 PCR 扩增筛选，获得 13 个多态性好的微卫星标记，多态性信息含量值 (PIE)在 0.4520.915 之间，平均为 0.597。对大黄鱼遗传多样性研究表明， 大黄鱼的养殖与野捕群体遗传多样性仍然比较丰富，但野捕群体具有更高的多 态性，且预期杂合度(He)大于观测杂合度(Ha)值，3 个群体均出现了一定程 度的近交现象。 2、通过冷休克法和静水压法诱导 2 组大黄鱼雌核发育 (G1、G2)，获得了 35.3的孵化率和 45 日龄 9.9的成活率，冷休克诱导效果 明显好于静水压法。AFLP 分析表明家系 G1 的雌核发育成功率为 100，G2 家 系中雌核发育成功率为 87.5，两个家系平均雌核发育诱导成功率为 93.75。微卫星分析得到了与 AFLP 相同的结果。两家系后代的基因纯合率分 别达 87.5和 76.2，平均为 81.9，而其对照组家系为 0，雌核发育使基因 的纯合率提高了 81.9。对亲子间遗传关系的分析表明了雌核发育个体之间的 遗传差异最小，与雌亲的亲缘关系最近。研究还表明雌核发育是促进基因纯合 的一个有效途径，AFLP 和微卫星标记技术是鱼类雌核发育鉴定和遗传分析的有 效方法。 3、大黄鱼()和鮸鱼()属间杂交成功获得了 56.25的受精率、 45.24的孵化率和 0.65的鱼苗成活率。对杂交子代及其亲本的微卫星分析 表明 F1 个体中未出现雄鱼特有位点；AFLP 分析结果中，143 条母本特异性条带 中有 132 条出现在子代中，94 条父本特异性条带中只有 18 条出现在子代中； F1 个体与母本、父本间的遗传相似系数分别为 0.853、0.271，与母本、父本间 的遗传距离分别为 0.159、1.307。表明杂交子代与母本大黄鱼之间具有极高的 遗传同质性，属异精雌核发育个体。正文内容正文内容本研究采用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库进行大黄鱼微卫 星分离，人工冷休克和静水压法诱导大黄鱼雌核发育二倍体，利用 AFLP 和 SSR 标记技术对大黄鱼的养殖群体与野生群体的遗传多样性、人工雌核发育亲子代 间的遗传关系进行了鉴定分析，并进行了大黄鱼和兢鱼的属间杂交试验。结果 表明： 1、运用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库分离大黄鱼微 卫星标记，获得 82(57.4)个含有核心重复数大于 7 的微卫星序列，其中 18 条送 GenBank(登陆号 EU022002EU022019)。设计合成的 18 对大黄鱼微卫星引 物经 PCR 扩增筛选，获得 13 个多态性好的微卫星标记，多态性信息含量值(PIE)在 0.4520.915 之间，平均为 0.597。对大黄鱼遗传多样性研究表明，大黄鱼的 养殖与野捕群体遗传多样性仍然比较丰富，但野捕群体具有更高的多态性，且 预期杂合度(He)大于观测杂合度(Ha)值，3 个群体均出现了一定程度的近交 现象。 2、通过冷休克法和静水压法诱导 2 组大黄鱼雌核发育(G1、G2)，获 得了 35.3的孵化率和 45 日龄 9.9的成活率，冷休克诱导效果明显好于静水 压法。AFLP 分析表明家系 G1 的雌核发育成功率为 100，G2 家系中雌核发育 成功率为 87.5，两个家系平均雌核发育诱导成功率为 93.75。微卫星分析 得到了与 AFLP 相同的结果。两家系后代的基因纯合率分别达 87.5和 76.2，平均为 81.9，而其对照组家系为 0，雌核发育使基因的纯合率提高 了 81.9。对亲子间遗传关系的分析表明了雌核发育个体之间的遗传差异最小， 与雌亲的亲缘关系最近。研究还表明雌核发育是促进基因纯合的一个有效途径， AFLP 和微卫星标记技术是鱼类雌核发育鉴定和遗传分析的有效方法。 3、大 黄鱼()和鮸鱼()属间杂交成功获得了 56.25的受精率、45.24的孵化率 和 0.65的鱼苗成活率。对杂交子代及其亲本的微卫星分析表明 F1 个体中未 出现雄鱼特有位点；AFLP 分析结果中，143 条母本特异性条带中有 132 条出现 在子代中，94 条父本特异性条带中只有 18 条出现在子代中；F1 个体与母本、 父本间的遗传相似系数分别为 0.853、0.271，与母本、父本间的遗传距离分别 为 0.159、1.307。表明杂交子代与母本大黄鱼之间具有极高的遗传同质性，属 异精雌核发育个体。 本研究采用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库进行大黄鱼微卫星分 离，人工冷休克和静水压法诱导大黄鱼雌核发育二倍体，利用 AFLP 和 SSR 标记 技术对大黄鱼的养殖群体与野生群体的遗传多样性、人工雌核发育亲子代间的 遗传关系进行了鉴定分析，并进行了大黄鱼和兢鱼的属间杂交试验。结果表明：1、运用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库分离大黄鱼微卫星标 记，获得 82(57.4)个含有核心重复数大于 7 的微卫星序列，其中 18 条送 GenBank(登陆号 EU022002EU022019)。设计合成的 18 对大黄鱼微卫星引物经 PCR 扩增筛选，获得 13 个多态性好的微卫星标记，多态性信息含量值(PIE)在 0.4520.915 之间，平均为 0.597。对大黄鱼遗传多样性研究表明，大黄鱼的 养殖与野捕群体遗传多样性仍然比较丰富，但野捕群体具有更高的多态性，且 预期杂合度(He)大于观测杂合度(Ha)值，3 个群体均出现了一定程度的近交 现象。 2、通过冷休克法和静水压法诱导 2 组大黄鱼雌核发育(G1、G2)，获 得了 35.3的孵化率和 45 日龄 9.9的成活率，冷休克诱导效果明显好于静水 压法。AFLP 分析表明家系 G1 的雌核发育成功率为 100，G2 家系中雌核发育 成功率为 87.5，两个家系平均雌核发育诱导成功率为 93.75。微卫星分析得到了与 AFLP 相同的结果。两家系后代的基因纯合率分别达 87.5和 76.2，平均为 81.9，而其对照组家系为 0，雌核发育使基因的纯合率提高 了 81.9。对亲子间遗传关系的分析表明了雌核发育个体之间的遗传差异最小， 与雌亲的亲缘关系最近。研究还表明雌核发育是促进基因纯合的一个有效途径， AFLP 和微卫星标记技术是鱼类雌核发育鉴定和遗传分析的有效方法。 3、大 黄鱼()和鮸鱼()属间杂交成功获得了 56.25的受精率、45.24的孵化率 和 0.65的鱼苗成活率。对杂交子代及其亲本的微卫星分析表明 F1 个体中未 出现雄鱼特有位点；AFLP 分析结果中，143 条母本特异性条带中有 132 条出现 在子代中，94 条父本特异性条带中只有 18 条出现在子代中；F1 个体与母本、 父本间的遗传相似系数分别为 0.853、0.271，与母本、父本间的遗传距离分别 为 0.159、1.307。表明杂交子代与母本大黄鱼之间具有极高的遗传同质性，属 异精雌核发育个体。 本研究采用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库进行大黄鱼微卫星分 离，人工冷休克和静水压法诱导大黄鱼雌核发育二倍体，利用 AFLP 和 SSR 标记 技术对大黄鱼的养殖群体与野生群体的遗传多样性、人工雌核发育亲子代间的 遗传关系进行了鉴定分析，并进行了大黄鱼和兢鱼的属间杂交试验。结果表明：1、运用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库分离大黄鱼微卫星标 记，获得 82(57.4)个含有核心重复数大于 7 的微卫星序列，其中 18 条送 GenBank(登陆号 EU022002EU022019)。设计合成的 18 对大黄鱼微卫星引物经 PCR 扩增筛选，获得 13 个多态性好的微卫星标记，多态性信息含量值(PIE)在 0.4520.915 之间，平均为 0.597。对大黄鱼遗传多样性研究表明，大黄鱼的 养殖与野捕群体遗传多样性仍然比较丰富，但野捕群体具有更高的多态性，且 预期杂合度(He)大于观测杂合度(Ha)值，3 个群体均出现了一定程度的近交 现象。 2、通过冷休克法和静水压法诱导 2 组大黄鱼雌核发育(G1、G2)，获 得了 35.3的孵化率和 45 日龄 9.9的成活率，冷休克诱导效果明显好于静水 压法。AFLP 分析表明家系 G1 的雌核发育成功率为 100，G2 家系中雌核发育 成功率为 87.5，两个家系平均雌核发育诱导成功率为 93.75。微卫星分析 得到了与 AFLP 相同的结果。两家系后代的基因纯合率分别达 87.5和 76.2，平均为 81.9，而其对照组家系为 0，雌核发育使基因的纯合率提高 了 81.9。对亲子间遗传关系的分析表明了雌核发育个体之间的遗传差异最小， 与雌亲的亲缘关系最近。研究还表明雌核发育是促进基因纯合的一个有效途径， AFLP 和微卫星标记技术是鱼类雌核发育鉴定和遗传分析的有效方法。 3、大 黄鱼()和鮸鱼()属间杂交成功获得了 56.25的受精率、45.24的孵化率 和 0.65的鱼苗成活率。对杂交子代及其亲本的微卫星分析表明 F1 个体中未 出现雄鱼特有位点；AFLP 分析结果中，143 条母本特异性条带中有 132 条出现 在子代中，94 条父本特异性条带中只有 18 条出现在子代中；F1 个体与母本、 父本间的遗传相似系数分别为 0.853、0.271，与母本、父本间的遗传距离分别 为 0.159、1.307。表明杂交子代与母本大黄鱼之间具有极高的遗传同质性，属 异精雌核发育个体。 本研究采用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库进行大黄鱼微卫星分 离，人工冷休克和静水压法诱导大黄鱼雌核发育二倍体，利用 AFLP 和 SSR 标记 技术对大黄鱼的养殖群体与野生群体的遗传多样性、人工雌核发育亲子代间的 遗传关系进行了鉴定分析，并进行了大黄鱼和兢鱼的属间杂交试验。结果表明：1、运用传统的二次杂交筛选构建微卫星片段富集文库分离大黄鱼微卫星标记，获得 82(57.4)个含有核心重复数大于 7 的微卫星序列，其中 18 条送 GenBank(登陆号 EU022002EU022019)。设计合成的 18 对大黄鱼微卫星引物经 PCR 扩增筛选，获得 13 个多态性好的微卫星标记，多态性信息含量值(PIE)在 0.4520.915 之间，平均为 0.597。对大黄鱼遗传多样性研究表明，大黄鱼的 养殖与野捕群体遗传多样性仍然比较丰富，但野捕群体具有更高的多态性，且 预期杂合度(He)大于观测杂合度(Ha)值，3 个群体均出现了一定程度的近交 现象。 2、通过冷休克法和静水压法诱导 2 组大黄鱼雌核发育(G1、G2)，获 得了 35.3的孵化率和 45 日龄 9.9的成活率，冷休克诱导效果明显好于静水 压法。AFLP 分析表明家系 G1 的雌核发育成功率为 100，G2 家系中雌核发育 成功率为 87.5，两个家系平均雌核发育